色谱检测技术对粮食真菌毒素的检测方法研究

金明亮

粮食真菌毒素种类及特点

真菌毒素对人体健康构成严重威胁，包括黄曲霉毒素、赭曲霉毒素 A、伏马毒素、呕吐毒素、展青霉素、玉米赤霉烯酮、T-2 毒素等，其中黄曲霉毒素在紫外线下，黄曲霉毒素 B1、B2 发蓝色荧光，黄曲霉毒素 G1、G2 发绿色荧光，难溶于水，易溶于油、甲醇、丙酮和氯仿等有机溶剂，但是不溶于石油醚、乙烷和乙醚中，容易感染黄曲霉毒素的粮食产品包括大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油等；赭曲霉毒素 A 是稳定的无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀碳酸氢钠溶液，微溶于水，容易感染赭曲霉毒素 A 的粮食产品包括大豆、绿咖啡豆、绿豆、啤酒、葡萄汁、调味品、猪肾等；伏马毒素是一种近年来发现的新型毒素，白色粉末，易溶于水、甲醇及乙腈 - 水中，容易感染该毒素的粮食产品包括大米、面条、调味品、高粱、啤酒等；呕吐毒素可以导致食用者肠功能紊乱、口腔黏膜和真皮损伤，免疫力下降，一般在大麦、小麦、玉米、燕麦中有较高浓度，在黑麦、高粱和大米中有较低浓度；展青霉素具有致畸性、致突变性和致癌性，主要存在于霉烂的苹果和山楂中；玉米赤霉烯酮主要存在于玉米、玉米制品、干草和青储饲料中。

色谱检测技术流程

色谱检测需要按照相应的标准内容来实施，首先需要确保检测数值和结果的准确度。一般情况下，可设置95% ～ 110% 的加标回收率，并要结合实际情况，加入一些混合溶液，控制过大的检测误差 . 在前期进行分组时，包含了同类的待测农产品，在此基础上可以进行标准化空白溶液的调配；然后在检测过程中，需要针对各组样本设定相应的加标回收率，确保每批样本都具有精确的回收率。这里需要采用相应的判定标准，也就是符合 70% ～ 130% 加标回收率的农产品，才能判定为合格。最后，针对那些超标的农产品样本，需要利用质谱检验的工序进行二次确定。

色谱检测技术检测方法

样品与设备。

采用液相色谱检测方法检测玉米和小麦中存在的真菌毒素，黄曲霉毒素标溶液、OTA 标准溶液、DON标准溶液、T-2 毒素标准溶液、乙醇、甲醇、乙腈；设备采用 1260 高效液相色谱仪。

各种检测方法。一是气相色谱法，当前其得到了广泛的应用。该方法具有較快的分析速度，可以对有机物进行多层次分离。采用气相色谱分析方法，可以提高检测工作的灵敏度。例如，一些物质不易被分解，但在特定的温度下可能会受到汽化的影响，这类物质便可采用气相色谱法进行检测，如各类卤素、硫化物和磷化物；对于一些肉类产品，其中的三甲胺可以利用气相色谱法来进行检测。二是液相色谱法。相比气相色谱，液相色谱稳定性不强，且挥发性较差，是一种沸点较高的复杂物质，多为化合物。液相色谱仪由液相色谱柱、高压泵等部件构成，检测器也具备较高的灵敏度，针对那些离子化合物、高聚物可以选用液相色谱仪来进行检测，如甲胺磷化物等。三是气质联用仪，是将质谱和色谱的性能结合起来，对待测物质可以进行精准的定位，但难以精准判断较为复杂的农产品。四是液质联用技术，以液相色谱作为分离系统，质谱为检测系统。样品在质谱部分和流动相分离，被离子化后，经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图。液质联用在对兽药进行检测时，具有高选择性、高灵敏度等特点。比如，利用安捷伦 6410 串联四级杆液质联用仪对虾仁和鸡肉中的氨霉素进行分析时，可以使用同位素内标和简单的固相萃取法基质样品中氯霉素进行检测，其检测限可达到 10 mg/kg。

选择合适的技术指标。从仪器分析的角度来看，在选择技术指标时，不仅要选用符合特性的检出限，而且应选用敏锐度、稳定性和重复性较为合适的指标。在实际检测工作中，一些厂家会根据相应的内容，给出技术性的检出限指标，然后将待测样本分为多种，这样检测到的数值可能与实际情况存在一些出入。如果选用规模较大的色谱检测仪，那么需要通过前期的调研和对比才能进行工作。与此同时，应和相关领域的专家进行沟通，全面了解检测仪的技术优势和技术性能。

利用高效液相色谱分析法对其进行检测，实验表明该种方法具有很高的灵敏性、很强的辨识性、很好的回收率、检测时间短，该种检测技术值得被推广应用到粮食产品真菌毒素的检测中，为人类食品安全检测提供保障。endprint