对超广谱β内酰胺酶、碳青霉烯酶、甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌及其他重要耐药表型的快速检测药敏试验方法

纸片扩散法是一种高度标准化的药敏试验方法，其检测结果准确、可靠，花费少、操作简便，可用于重要耐药表型的检测。但根据指南大部分药物-细菌组合需要经过16～20 h的培养才能得到结果。本研究对Copan公司的WASPTM自动化纸片扩散法药敏系统进行快速药敏试验的可能性进行评估，包括区分重要耐药表型菌株和“野生型”菌株的能力以及各种药物-细菌组合在较短培养时间下临床折点是否需要做出修正。本研究共纳入1 852株临床分离菌株，包括475株大肠埃希菌、375株肺炎克雷伯菌、301株阴沟肠杆菌、407株金黄色葡萄球菌、294株表皮葡萄球菌，各类菌株均包括野生株及重要耐药表型的菌株，药敏结果判读参考EUCAST指南6.0版本。自动化检测系统在培养的6、8、12 h与标准的18 h分别拍照成像并由WASP LabTM阅读软件完成结果判读。研究结果显示，培养6～8 h的结果能对ESBL、AmpC、碳青霉烯酶、MRSA和喹诺酮耐药的耐药表型进行可靠的检测，灵敏度和特异度均超过95%，而青霉素结合蛋白2a（PBP2a）阳性的表皮葡萄球菌在各时间点均不能与野生株区分开，四环素类药物-葡萄球菌组合在6～8 h亦不能较好区分。野生株的抑菌圈分布可用以确定流行病学界值ECOFF，本研究采用野生株抑菌圈的第5百分位数值以判断变化是否有差异，以18 h与6 h的差值大于2 mm为有显著差异。肠杆菌科细菌对44种药物-细菌组合中34种（77.3%）保持稳定，7个组合显著增加，3个包含甲氧苄啶-磺胺甲唑的组合显著降低。而葡萄球菌所有组合在6 h的ECOFF均低于18 h的结果。综上所述，本研究说明自动化纸片法药敏系统能依据培养早期的阅读结果将临床常见菌中的野生株与非野生株进行区分，专家规则同样适用于纸片法快速药敏，但对于部分药物-细菌组合（尤其是葡萄球菌）所使用的判读标准需要做必要的改 变。

HOMBACH M, JETTER M, KELLER PM， et al. Rapid detection of ESBL， carbapenemases， MRSA and other important resistance phenotypes within 6-8 h by automated disc diffusion antibiotic susceptibility testing. J Antimicrob Chemother， 2017， 72（11）：3063-3069.