伊宁市犬猫弓形虫病流行病学调查
2018-01-19夏春芳
夏春芳,高 亮,魏 斌,田 甜
(1.伊犁职业技术学院,新疆伊宁 835000;2.伊犁州动物卫生监督所,新疆伊宁 835000)
弓形虫病是由刚地弓形虫引起的一种人兽共患寄生虫病。弓形虫的生活史可以分为肠内阶段和肠外阶段,肠内阶段只出现于终末宿主体内,肠外阶段可出现于终末宿主和中间宿主体内。目前,其终末宿主已证明的有猫及一些野生猫科动物,而其中间宿主种类很多,已报道的有200多种,包括人、犬以及其他哺乳动物和鸟类[1-2]。弓形虫病可使孕畜流产死胎,人感染后可侵害其神经系统、呼吸系统、心脏、淋巴内皮系统等多种器官或系统,并造成损伤,甚至造成死亡。孕妇感染后可引起流产,胎儿畸形或产出弱智儿。有报道表明,有犬猫接触史的孕妇弓形虫感染率明显高于无犬猫接触史的孕妇[3]。随着伊宁市经济快速发展和人们生活水平不断提高,宠物犬猫以及流浪犬猫的数量激增,与宠物相关的人畜共患传染病越来越受到人们的重视,前来宠物医院咨询以及给犬猫做相关疾病检测的主人络绎不绝。为探明伊宁市宠物犬猫及流浪犬猫刚地弓形虫的感染情况,为伊宁市弓形虫的防控提供参考依据,笔者于2016年对伊宁市3家宠物医院收治病例及某流浪动物收容所随机抽取的440份犬、猫血清样品进行检测,现将检测结果报道如下。
1 材料与方法
1.1血清在伊宁市3家宠物医院收治病例中随机抽取犬猫血清样本240份,其中宠物犬血清样本200份,每季度抽取50份,4个季度4个不同年龄段各50份;宠物猫血清样本20份,散养猫血清样本20份;在伊宁市某流浪动物收容所随机抽取流浪犬血清样本200份,每季度抽取50份新接收的流浪犬(表1)。
表1伊宁市犬猫弓形虫病流行病学调查血清样品采集情况
Table1SerumsamplecollectionoftoxoplasmosisofdogsandcatsinYiningCityforepidemiologicalinvestigation
诊疗机构Medicalinstitutions宠物犬Petdog宠物猫Petcat流浪犬Straydog散养猫Free-rangecat小计Subtotal宠物医院APethospitalA6850679宠物医院BPethospitalB102807117宠物医院CPethospitalC3070744流浪动物收容所Thestrayanimalshelter002000200合计(平均)Total(Mean)2002020020440
1.2试剂动物弓形虫IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫吸附试验),珠海经济特区海泰生物制药有限公司生产,生产批号:20150506;弓形虫抗体快速诊断试纸(免疫色谱分析法),韩国安捷公司生产,生产批号:2206DD006。
1.3仪器小型高速冷冻离心机(Beckman Allegra 64),酶标仪(318MC型),电热恒温培养箱(DHP-9272B)。以上仪器设备均由伊犁职业技术学院动物科学系动物疫病检测中心实验室提供。
1.4方法使用普通真空采血管于待检动物前臂头静脉或后肢阴静脉无菌采血1~3 mL,分离血清,-20 ℃保存备用。 检测分别按照珠海海泰生物制药有限公司和韩国安捷公司提供的生产说明书进行操作。
1.5数据分析所有数据应用SPSS 17.0统计软件进行分析。
2 结果与分析
2.1不同生活状态犬猫弓形虫酶联免疫吸附试验通过对3家宠物医院收治病例的240份犬猫血清样本及流浪动物收容所采集的200份犬血清样本进行弓形虫IgG抗体检测(酶联免疫吸附试验),440份血清样本中,阳性数89例,阳性率20.23%,宠物犬、流浪犬、宠物猫、散养猫阳性率分别为15.50%、24.00%、10.00%、40.00%(表2)。通过配对资料卡方检验分析显示,宠物犬组与流浪犬组之间差异显著(P<0.05),宠物猫组与散养猫组之间差异显著(P<0.05),宠物犬组与宠物猫组、流浪犬组与散养猫组之间差异均不显著(P>0.05)。
表2不同生活状态犬猫弓形虫酶联免疫吸附试验检测结果
Table2Theenzyme-linkedimmunosorbentassayresultsoftoxoplasmosisofdogsandcatsindifferentlifestatus
生活状态Stateoflife数量Quantity阳性数Positivenumber阴性数Negativenumber阳性率Positiverate∥%宠物犬Petdog2003116915.50流浪犬Straydog2004815224.00宠物猫Petcat2021810.00散养猫Free-rangecat2081240.00合计(平均)Total(Mean)4408935120.23
2.2不同季度犬弓形虫酶联免疫吸附试验检测结果400份犬血清样本中,每季度抽取样本各100份(宠物犬与流浪犬各50份),对弓形虫IgG抗体检测(酶联免疫吸附试验)结果按季度统计分析得出,第一季度、第二季度、第三季度、第四季度的阳性率分别为14.00%、27.00%、20.00%、18.00%(表3),再通过配对资料卡方检验分析显示,阳性率最低的第一季度与阳性率最高的第二季度差异显著(P<0.05),其余各组之间差异均不显著(P>0.05)。
表3 不同季度犬弓形虫酶联免疫吸附试验检测结果
2.3不同年龄段宠物犬弓形虫酶联免疫吸附试验对200份宠物犬血清样本的弓形虫酶联免疫吸附试验检测结果按4个不同的年龄段分组进行统计分析得出,随着年龄增长,阳性率呈逐步升高趋势,<1岁组、1~3岁组、3~6岁组、>6岁组的阳性率分别为8.00%、10.00%、16.00%、28.00%(表4),再通过配对资料卡方检验分析显示,阳性率最低的<1岁组与阳性率最高的>6岁组之间差异极显著(P<0.01),1~3岁组与>6岁组之间差异显著(P<0.05),其余各组之间差异均不显著(P>0.05)。
表4不同年龄段宠物犬弓形虫酶联免疫吸附试验检测结果
Table4Theenzyme-linkedimmunosorbentassayresultsoftoxoplasmosisofpetdogindifferentagegroups
年龄段Agegroups数量Quantity阳性数Positivenumber阴性数Negativenumber阳性率Positiverate∥%<1岁Lessthan1yearold504468.001~3岁1-3yearsold5054510.003~6岁3-6yearsold5084216.00>6岁Morethan6yearsold50143628.00合计(平均)Total(Mean)2003116915.50
2.4不同检测方法检测结果对比对440份犬猫血清样品进行弓形虫IgG抗体检测(酶联免疫吸附试验)的同时,采用目前伊宁市宠物诊疗机构普遍使用的弓形虫抗体快速诊断试纸(免疫色谱分析法)进行同步检测,快速诊断试纸检出阳性为93例,阳性率21.14%(表5),但通过配对资料卡方检验分析显示,2种检测方法之间差异性不显著(P>0.05)。
表5 不同检测方法检测结果
3 讨论与结论
(1)通过此次调查发现,伊宁市犬猫弓形虫抗体阳性率处于较高水平,440份血清样品中阳性89例,阳性率高达20.23%,明显高于张红超等[4]、邓波等[5]、谢桂萍等[6]、郑世英等[7]的相关报道,而与马依兰·阿布来提等[8]的报道相近。出现这种情况的原因,一是与新疆独特的地理因素和气候环境有关,二是与饲主科学饲养的观念意识及犬猫的生活状态有关,通过对阳性犬猫的饲主走访调查了解到,高达20%走访饲主认为犬应该吃生肉,大多数饲主对犬猫的科学饲养常识知之甚少,对犬猫等人畜共患病的认识欠缺,这一点尤其值得相关部门重视。
(2)犬猫弓形虫感染与其生活状态及流动性密切相关,流浪犬、散养猫的阳性率显著高于宠物犬和宠物猫(P<0.05),这与卢爱桃等[9]、禹海杰等[10]的报道一致。伊犁作为一个牧业地区,流浪动物与各种家畜接触机会更多,为弓形虫的传播提供了便利,家畜中,猪弓形虫病例较多,牛、羊和马对弓形虫易感而不易发病,后三者是弓形虫在动物和人间传播的重要储存库[11]。而宠物犬猫一般生活在楼内,饮食及环境相对卫生,空间封闭,感染率相对较低。由此可见,相关部门非常有必要制定相关制度,加强宠物市场管理,控制流浪动物数量。
(3)调查显示,随着犬猫年龄增长,弓形虫IgG抗体阳性率越高,阳性率最低的<1岁组与阳性率最高的>6岁组之间差异极显著(P<0.01),1~3岁组与>6岁组之间差异显著(P<0.05)。这是由于动物体一旦产生弓形虫IgG抗体之后,可以终生存在于其体内,另一方面也验证了随着动物年龄增长,感染弓形虫的概率提高这一结论[12]。在季节性因素方面,第二季度的阳性率最高,与阳性率最低的第一季度度差异显著(P<0.05),这与邓波等[5]的报道不符,可能与新疆独特的地理环境有关,新疆冬季较长,积雪覆盖,动物外出机会及外出停留时间短,而第二、第三季度气候宜人,遛狗频率和遛狗时间都有所增加。
(4)2种检测方法的检测结果并无明显差异,酶联免疫吸附试验虽然具有特异性和敏感性较好,易于定量,结果客观等优点[5],但是需要更多的仪器设备,不能满足宠物诊疗市场尤其是西部欠发达地区市场对价格低廉、操作简单、快捷方便的需求。目前伊宁市多数宠物诊疗机构选择使用的弓形虫抗体快速诊断试纸(免疫色谱分析法)更适合宠物诊疗机构作为临床检验使用。
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