如何对益生菌进行评估
2018-01-18
益生菌通过刺激特异性或非特异性免疫功能,分泌抗菌类物质,竞争性抑制其他病原菌的定植或增殖,产生各种消化酶帮助消化吸收,从而参与调解胃肠道菌群平衡,促进动物生长和提高饲料转化率。目前,益生菌被认为是最具潜力替代抗生素的产品。
不同种属或同一种属不同菌株的益生菌,其生理特性(生长快慢、生长环境、代谢产物等)和功效性等均存在较大差异,因此仍需要进行综合性评估。芽孢杆菌是一类重要的益生菌,相对于其他类型益生菌(如乳酸菌),芽孢杆菌一般对营养要求简单,代谢速度快,而且易于分离、培养和保藏,对工业化生产技术条件要求不苛刻。此外,芽孢杆菌产生的芽孢对热、紫外线、电离辐射和低pH(2~3)等不良环境有极强的抵抗能力。因此,芽孢杆菌类益生菌剂易于保存,使用方便,活性成分高,有很大的推广和应用价值。
一、益生菌评估指标
活菌数量 有些益生菌产品存在不标明菌种和组成成分、任意扩大和渲染益生菌的作用和用途、实际活菌数值远低于标示值等问题。
胃肠道耐受性 动物摄入益生菌后,菌株抵抗胃酸、胆汁酸盐和消化酶的能力,确定是否有足够的活菌抵达肠道并发挥作用。
耐温性 益生菌如需经过饲料高温制粒,则需进行耐温性评价,确保菌株可以抵抗制粒过程中高温、高压、高湿的作用,保证有效活菌数。
抑菌性 当微生物处于稳定期时,菌体分泌大量次级代谢产物,如各种抑菌物质、色素、激素等;因此必须先进行发酵培养至稳定期,才能测定菌株是否具有抑菌性。
抗生素兼容性 无论是临床治疗使用抗生素,还是饲料中添加功能性抗生素,都需要考虑对益生菌是否存在抑菌性;如两者不兼容,则需选择兼容的抗生素进行生产。
产酸产酶 益生菌在生长过程中能代谢出各种有机酸和水解酶,直接或间接对动物机体发挥益生作用;不同菌株特性不同,代谢产物也不同,仍需注意测试。
二、评估时需要注意的问题
1.所有微生物实验必须进行严格的无菌操作和避免操作过程中的交叉污染。
2.不同菌种对营养成分和培养条件的要求不同,活菌计数时要根据菌种类别选择合适的培养基和培养条件。耐温性主要针对饲料制粒过程,试验时应考虑制粒过程中的高温高压高湿等抗性因素。由于益生菌只有达到生长周期中的稳定期时,才开始分泌次级代谢产物,因此,评估益生菌抑菌性时,一定要根据菌种特性先进行发酵培养(至少培养过夜),待菌种分泌抑菌物质后再进行测定(复合益生菌产品,要根据不同菌种的特性分别进行培养,如是否需氧、培养温度、培养基成分等)。
3.各项指标都最好的菌株是不存在的,但可以通过综合评估,选出综合性能最好的产品。