简阳市农村生活饮用水水质微生物学指标检测探析

翁卫红

（简阳市疾病预防控制中心 四川 成都 641400）

水是人类生活必须依赖的一类营养物质，但是由于追求经济的发展，城乡生活污水、工业废水等的排放量不断增加，农田化肥、农药使用量也屡增不减，这些都在不同程度上污染了农村生活饮用水[1]。虽然当前各个部门都加强了对农村生活饮用水水质的重视，也增加了相应的投入，但是对于一些比较偏远的地区，安全用水设施建设不够完善，大部分村民甚至直接取水直接饮用，饮水安全无法得到保障[2]。本研究具体就我市不同村的生活饮用水水质情况进行分析，检测水中的生物学指标情况。

1.资料、方法

1.1 基本资料

任意选取简阳市以自然水源当成生活饮用水的多个村组作为采集水样的地点，分别于枯水期、丰水期进行水样采集实施微生物学指标检测。共收集240个水样，水样来源包括集中供水点和天然井水。通过无菌瓶在每个点收集1000ml水样，检测样本中总大肠菌群、细菌总数、微生物指标、一般化学指标、毒理指标、消毒剂指标、感官指标。微生物学指标包括：耐热大肠菌群、总大肠菌群、菌落总数。毒理指标包括：汞、四氯化碳、砷、三氯甲烷、镉、硝酸盐、铬、氟化物、铅、氰化物、硒。感官性状和一般化学指标包括：氨氮、色度、阴离子合成洗涤剂、浑浊度、挥发性酚类、臭和味、耗氧量、肉眼可见物、总硬度、pH、铝、溶解性总固体、铁、铜、氯化物、锌、硫酸盐、锰。

1.2 方法

1.2.1 仪器设备及培养基 仪器设备主要包括超净工作台、pH试纸、接种环、德汉氏小管、水样采集器、10mL注射器、发酵管、高压灭菌锅、1mL注射器、培养皿、电子天平、培养基分装器、三角瓶等。

培养基包括乳糖蛋白胨、牛肉膏蛋白胨琼脂、伊红美蓝琼脂、三倍浓缩乳糖蛋白胨。

1.2.2 试验实施 采集水样：对于集中供水点的取样方法：装一管道在取样点上方，让水自然从管道中流出，水流持续5分钟后，将无菌瓶盖打开，接1000ml水作为样本进行检测。对于井水的取样方法：把无菌采样器放入井水15～20cm，将瓶盖绳拉起，取好水样后将瓶盖绳松开，瓶口会自行盖好，接着将采样器通过采样器绳取出来，在无菌水样瓶中倒入水样进行检测。

按照国家饮用水卫生标准（GB5750-2006）进行微生物指标、一般化学指标、独立指标、消毒剂指标、感官指标的检验，另外检测总大肠菌群：通过多管发酵法进行，（1）初发酵试验：将100ml水样分别加入2个装有3倍浓缩的乳糖蛋白胨发酵液50ml以及德汉氏小管的三角烧瓶中，将10ml水样分别加入10支装有3倍浓缩的乳糖蛋白胨5ml及装有倒置德汉氏小管发酵管中，每号水样进行3次重复，充分混匀后在37℃恒温的环境下进行一天时间的培养，观察德汉氏小管中是否出现气体、发酵液是否出现颜色变化。将发酵液紫色变为黄色、德汉氏小管中有气体的三角瓶以及发酵管实施进一步的平板分离。没有产气的小管继续进行下一个24h的培养。（2）平板分离：把24小时、48小时后分别产酸产气的发酵瓶或者发酵管，分别划线在伊红美蓝琼脂平板上进行接种，接着在37℃温度下进行18～24小时的培养，标注与以下条件相符合的菌落：有金属光泽、颜色为深紫黑色的标为A，稍微有金属光泽、颜色为紫黑色标为B，中心有较深颜色，颜色为淡紫红色标为C。分别选取一部分实施涂片，进行革兰氏染色后镜检。（3）复发酵试验：通过涂片、染色以及镜检处理后，假设为革兰氏阴性无芽胞杆菌，将这一菌落中的另外一部分在普通浓度的乳糖蛋白胨发酵管中进行重新接种，每管能够接种来自相同初发酵管的1～3个同类型菌落，在37℃环境下进行一天时间的培养，结果如果产气有产酸，表明存在大肠菌群，对于确定有大肠杆菌存在的继续依照初发酵阳性管数或者瓶数进行总大肠菌群检数表核查就能获取最终总大肠菌群数。

测定细菌总数：通过平板计数法完成，通过无菌注射器分别抽取各个水样1ml，注入到灭菌培养皿中，将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基倾注15ml左右到每平皿中，该培养基已经溶化并冷却到接近45℃。倾注号后置于平整桌面，摇动培养皿，保证水样完全混匀培养基。另外选择一个无菌培养皿，直接倾注15ml上述培养基，不加水样，进行对照试验，每个水样包含对照试验共进行3次重复。等到培养基凝固之后，放在恒温37℃的环境下进行一天时间的培养，完成菌落计数。每个水样平板菌落平均数也就是1ml水样的细菌总数。

1.3 判定标准

按照国家饮用水卫生标准（GB5750-2006）进行评价，合格生活饮用水不得检出总大肠菌群，细菌总数检出率应该低于100CFU/mL。其他检测指标只要有一个不合格均视为不合格水样。

2.结果

2.1 整体情况及总大肠菌群数、细菌总数检出情况

240个水样经检测符合合格标准的有156个，合格率为65%。其中丰水期120个水样中合格的有79个，合格率65.83%；枯水期120个水样中合格的有77个，合格率为64.17%。收集的240个水样，在丰水期检出总大肠菌群数平均结果为230CFU/mL；在枯水期检出总大肠菌群数平均结果为77CFU/mL。收集的240个水样，在丰水期检出细菌总数平均结果667CFU/mL；在枯水期检出细菌总数平均结果236CFU/mL。

2.2 不同指标检测结果

枯水期120个水样中感官指标合格的有115个，合格率为95.83%；丰水期120个水样中感官指标合格的有110个，合格率为91.67%。枯水期120个水样中一般化学指标合格的有102个，合格率为85%；丰水期120个水样中一般化学指标合格的有98个，合格率为81.67%。枯水期120个水样中毒理指标合格的有120个，合格率为100%；丰水期120个水样中毒理指标合格的有120个，合格率为100%。枯水期120个水样中微生物指标合格的有86个，合格率为71.67%；丰水期120个水样中微生物指标合格的有53个，合格率为44.17%。

3.讨论

从本研究上述检测结果能够得知，本市不同村在不同水位期其水质的微生物学指标均与生活饮用水标准不符合，简阳市农村生活饮用水存在比较严重的微生物污染，其中更为严重的为总大肠菌群的污染。农村饮用水取水点一般分布在野外，没有有效的防护措施，大部分水体都是直接暴露在外，人畜粪便很容易对水体造成污染，尤其处于雨季时期，受到雨水的影响，污染更严重[3]。降雨量会对农村饮用水水源形成比较明显的影响，降雨量不同，水质也会存在差别，一般来说，丰水期的水质不如平水期水质以及枯水期水质[4]。

简阳市农村生活饮用水的水源一般分布在河、沟、耕种地等处，临近住房，生活垃圾、污水以及人畜粪便都可能污染水源[5]。总大肠菌群是生活饮用水受粪便污染程度评定的重要指标，从本研究结果可以发现简阳市农村生活饮用水存在比较严重的粪便污染。另外结果发现简阳市农村生活饮用水其水环境水位紧密联系微生物污染状况。丰水期的总大肠菌群数高出枯水期，证实生活饮用水其水循环以及水环境水位紧密联系总大肠菌群数。

微生物指标对水质合格率形成影响的原因主要包括供水点没有配备消毒设备，人畜的粪便对水质形成污染，没有依照规范实施水质净化以及消毒。另外微生物指标不合格是绝大多数农村小型集中式供水水厂共同存在的问题，农村饮用水受人畜粪便污染情况比较严重，为了保证农村饮用水安全，必须做好饮用水的消化以及净化处理。有类似研究发现，从供水类型来看，分散式供水水质合格率不及集中式供水水质合格率，农村居民饮用分散式饮水健康方面存在的问题比较明显，水质指标中，部分毒理指标存在超标情况，主要存在微生物指标超标情况。由此得知，农村集中式供水覆盖率低是对农村水质合格率形成制约的一个重要因素，因此如果有条件的话，有必要大力推广集中式供水，可以建设中大型饮水供水工程，这样更方便做好水质处理、水源保护以及其他相关管理。除此之外，还应该重视配备饮用水消毒设备，部分农村地区虽然配备有消毒设备，不过操作缺乏规范性，因而仍无法保证饮水合格率，必须加强这方面的重视，进行相应处理。

本市枯水期一般化学指标合格率为85%，丰水期一般化学指标合格率为81.67%，从结果可以得知我市农村生活饮用水还存在部分化学指标方面的不合格，化学指标污染主要是由于工厂等导致，当前工厂为了节省租金，加上交通的逐渐便利，越来越多的向郊区以及乡村转移，一定程度上影响了郊区和农村的环境。对此，相关部门必须做好工厂的管理，保证生产废物按规范处理，废水经规范处理后排放，同时生产也要按规范进行，最大程度减小对环境的污染。

自然井水是简阳市农村饮用水主要水源，自然井水没有消过毒，大肠菌群和细菌总数均没有较高的合格率，所以有必要做好安全饮水的宣传，提升农户居民安全用水意识，给予科学的帮助和指导，做好不同水位期水质的保护工作，以保证农村饮水安全。

[1]周忠静，戴曙杰.永嘉县2011-2013年农村生活饮用水水质监测结果分析[J].实用预防医学，2015，22(6):734-735.

[2]李太树，覃陶琼，李晓丽，等.广西金秀瑶族自治县农村生活饮用水监测结果分析[J].现代预防医学，2016，43(11):2090-2092，2097.

[3]刘驰青，郭永斌，狄小兰，等.2014年昆明市五华区农村生活饮用水水质监测结果[J].中国农村卫生事业管理，2015，35(5):620-621.

[4]刘凤莲，马玲，许秉忠，等.2009-2012年宁夏农村集中式供水水质状况分析[J].宁夏医科大学学报，2016，38(8):961-963.

[5]李月红，黄敬秀，李家培，等.2014—2016年扶绥县农村生活饮用水水质监测结果分析[J].应用预防医学，2017，23(2):158-160.