山东省部分地区屠宰场猪旋毛虫病检测

盖文燕，王君玮，王 娟，黄秀梅，曲志娜，洪 军

（中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032）

山东省部分地区屠宰场猪旋毛虫病检测

盖文燕，王君玮，王 娟，黄秀梅，曲志娜，洪 军

（中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032）

为了解山东省屠宰场猪群的旋毛虫感染情况，对2015—2017年从全省9个市猪屠宰场采集的758头份血清，采用ELISA方法进行旋毛虫抗体检测，发现近3年的旋毛虫抗体阳性率分别为1.42%、1.54%、1.74%，平均阳性率为1.58%。对12份ELISA检测阳性猪的膈肌肉样进行旋毛虫压片镜检和消化法检测，均未发现旋毛虫虫体。ELISA抗体检测结果表明，山东省部分地区屠宰猪群存在不同程度的旋毛虫感染，且在个别地区呈持续感染状态。

旋毛虫；ELISA；血清学；压片镜检法；消化法

旋毛虫病（Trichinellosis）是由旋毛虫引起的一种严重的人兽共患寄生虫病。人类感染旋毛虫主要是通过生食或半生食含有幼虫囊包的猪肉及猪肉制品所致。旋毛虫病不仅是一个非常重要的公共卫生问题，给人类健康带来严重威胁，而且对畜牧养殖业、肉食品加工业，以及外贸出口造成严重的经济损失，已成为影响我国食品安全和人类健康的重要因素之一。在屠宰检疫中，旋毛虫是首检寄生虫，为肉类和肉制品的必检项目[1]。压片镜检法和免疫胶体金检测法相结合是旋毛虫屠宰检疫的主要方式，但现场检出率较低。为了解山东省屠宰场猪旋毛虫感染情况，对2015—2017年从全省9个市猪屠宰场采集的血清和膈肌肉样进行旋毛虫病检测。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1猪血清和膈肌 从山东省9个市（济南、临沂、日照、烟台、潍坊、枣庄、德州、淄博和青岛）28个猪屠宰场，随机采取外观健康猪血清758份，对应猪两侧膈肌肉样758份。每头猪采集血清1 mL，存储备用；膈肌样品100 g/份，注明生猪来源。所有血清样品和膈肌样品编号一致。

1.1.2试剂 旋毛虫抗体ELISA快速诊断检测试剂盒（货号273501）：德国Qiagen公司提供，主要检测猪及野猪的血清和血浆抗体；消化液：胃蛋白酶（3 000 UI）10 g、盐酸（质量体积比1.19 g/mL）10 mL、蒸馏水1 000 mL，40 ℃搅拌溶解，现用现配。

1.2 方法

1.2.1ELISA方法 严格按照试剂盒使用说明书操作，对实验结果用光学密度（OD450）测量。结果判断：在酶标仪OD450波长读结果；阳性对照结果的OD450≥0.7，阴性对照结果的OD450≤0.2，结果成立；S/P≥0.3判定为阳性，S/P≤0.3判定为阴性。

1.2.2压片镜检法 取膈肌肉样，撕去外膜，用大拇指和中指握住肉样两端，以食指顶住，使肌纤维绷紧，用小剪刀顺肌纤维方向，随机取米粒大肉样（见到针尖大小白点时必须剪下），每份肉样剪24粒；将剪下的肉粒均匀放在清洁玻片上，排成2排，每排12粒；盖上玻片，轻轻压平、压均匀，置显微镜下观察（如果是冰冻的肉样，可用5%的美兰染色1 min后检查）。

1.2.3消化法 将ELISA检测阳性相对应的膈肌肉样，应用本实验室配置的消化液，严格按照国标《猪旋毛虫病诊断技术》（GB/T18642—2002）规定方法操作。

2 结果

共检测山东省9个市28个猪屠宰场的血清758份，发现2015—2017年旋毛虫抗体阳性率分别 为 1.42%（3/211）、1.54%（4/260）、1.74%（5/287），平均阳性率为1.58%（12/758）；同时对12份ELISA检测阳性血清对应的膈肌样品，直接进行压片镜检和消化法检测，均未检出旋毛虫体（表1）。

3 讨论

动物旋毛虫病的检测方法包括肌肉压片镜检法、消化法和血清学法。本研究应用3种检测方法对同一编号样品进行检测。从3种方法检测结果来看，ELISA法检出率最高，3年的平均检出率达到1.58%；压片镜检和消化法均未检出虫体。3种方法检测结果差异较大。究其原因可能与3种检测方法的敏感性、检测人员的操作熟练程度，以及旋毛虫的发育史、感染特点和感染轻度有关。压片镜检法是许多国家肉类中旋毛虫的检疫方法。该法敏感性较低，每克肌肉含有6条或6条以下幼虫时的漏检率达52%[2]，因此目前不是旋毛虫检疫的首选方法。消化法为国际旋毛虫委员会推荐使用的方法[3]，其检出率为每克肌肉中有1个幼虫。但李峰等[4]对每克含有1个幼虫的猪肉，用消化法进行检测的幼虫检出率仅为10%，说明该法极易漏检。血清学方法主要为ELISA法。该法可以检测出每克肌肉小于1个虫体的感染强度，敏感性高且耗时短，但对旋毛虫早期感染检测的假阳性率偏高，同时血清学方法只能用于检测血清样品，无法检测屠宰后肉品。从上述3种方法的特点来看，镜检法只适用于中度或重度感染的猪，在感染早期及轻度感染时不适合使用；在没有酶标仪、试剂盒的情况下，对屠宰后肉品的检疫，可以选用消化法。ELISA法虽然其特异性有待于研究，但有灵敏性高和检出率高的特点，可用于血清学诊断和血清流行病学调查，同时也可用于感染猪的生前诊断。本研究选用3种检测方法，对山东省部分地区屠宰场进行猪旋毛虫病检测，可以做到早确诊、早治疗、早康复，从而避免感染旋毛虫猪肉的上市，让人民群众吃上放心肉。

表1 山东省部分地区猪屠宰场旋毛虫抗体ELISA检测结果

ELISA检测结果显示，2015—2017年山东省9个市屠宰场猪群存在不同程度的猪旋毛虫感染，旋毛虫抗体平均阳性率为1.58%，且在个别地区呈持续感染状态。各地区应高度重视并积极开展猪旋毛虫病防治工作，认真做好屠宰场的猪旋毛虫检验。

本次调查的山东省部分地区屠宰场猪旋毛虫的平均感染率与杨永斌等[5]报道的青海省部分商品猪旋毛虫感染阳性率为1.78%的结果相近，但明显低于韦春葵等[6]2008年对广西市崇左市调查的猪屠宰场旋毛虫感染阳性率（25.9%），高于彭达平等[7]2014年对东莞市屠宰场调查的旋毛虫感染阳性率（0.44%）。这可能与不同地区养殖场的卫生条件、人员卫生习惯等因素有关。本次调查覆盖了山东省9个市（济南、临沂、日照、烟台、潍坊、枣庄、德州、淄博和青岛）28个猪屠宰场。受采样条件限制，只在青岛市和临沂市两个地区连续3年采集到样品，在其他地区都是分散采集到的。但是，连续3年的检测结果仍能反映出山东省部分地区屠宰场猪群的旋毛虫感染状况。

[1] 崔晶，王中全. 肉类及肉类食品中旋毛虫检疫的现状与对策[J]. 肉品卫生，2005（12）：20-23.

[2] BECK R，MIHALJEVIC Z，MARINCULIC A.Comparison of trichinelloscopy with a digestion method for the detection of Trichinella larvae in muscle tissue from naturally infected pigs with low level infections [J].Veterinary parasitology，2005，132（1/2）：97-100.

[3] GAMBLE H R，BESSONOV A S，CUPERLOVIC K，et al. International commission on Trichinellosis：recommendations on methods for the control of Trichinella in domestic and wild animals intended for human consumption [J]. Veterinary parasitology，2000，93（3/4）：393-408.

[4] 李峰，王莉，王中全，等. 人工消化法对猪肉中旋毛虫检疫敏感性的研究[J]. 热带病与寄生虫学，2008，6（3）：133-135.

[5] 杨永斌，张秀娟，叶成红，等. 青海省部分地区商品猪旋毛虫感染的血清学调查[J]. 动物医学进展，2011，32（9）：135-136.

[6] 韦春葵，黄国敏. 崇左市屠宰猪旋毛虫感染情况调查报告[J]. 畜牧兽医科技信息，2008（9）：53-54.

[7] 彭达平，卢小明，谢柱彬，等. 东莞市屠宰场旋毛虫血清学调查[J]. 畜牧兽医科技信息，2016（6）：31-32.

Swine Trichinosis Detection in Slaughterhouses in Some Areas of Shandong Province

Gai Wenyan，Wang Junwei，Wang Juan，Huang Xiumei，Qu Zhina，Hong Jun

（China Animal Health and Epidemiology Center，Qingdao，Shandong 266032，China）

In order to recognize the infection status of swine Trichinosis in slaughterhouses in Shandong Province，758 serums were collected from swine slaughterhouses of 9 cities from 2015 to 2017，and detection of Trichinella antibody was carried out by ELISA. The results showed that the antibody positive rates from 2015 to 2017 were 1.42%，1.54% and 1.74%，respectively，with an average position rate of 1.58%. And 12 phrenic muscle samples，of which the ELISA test was positive，were tested by tabletting microscopy and artificial digestion methods，and no Trichinella spiralis was found. The results of ELISA antibody test showed that there were different degrees of Trichinella infection in slaughtered swine in some area of Shandong Province，and there was persistent infection status in individual regions.

Trichinella spiralis；ELISA；serology；tabletting microscopy；artificial digestion method

国家农产品质量安全风险评估专项（GJFP201700703）

王君玮

S851.3

A

1005-944X（2018）01-0011-03

10.3969/j.issn.1005-944X.2018.01.003

朱迪国）