血清Hcy和Cys-C联合尿β2-MG检测对2型糖尿病患者肾损害早期的诊断价值

安 勇

(巨鹿县人民医院 检验科，河北 邢台055250)

血清Hcy和Cys-C联合尿β2-MG检测对2型糖尿病患者肾损害早期的诊断价值

安 勇

(巨鹿县人民医院 检验科，河北 邢台055250)

糖尿病(DM)易引起肾脏损害，早期具有可逆性，严重者可导致肾功能衰竭，是导致DM患者死亡主要诱因。临床研究表明，早期诊治可以有效逆转或降低其肾功能损伤的发生率，延缓疾病的进程，降低病死率、改善患者生活质量等[1]。本文旨在探讨血清Hcy和Cys-C联合检测尿β2-MG对DM肾损害早期的诊断价值，为糖尿病肾病(DN)的早期诊断提供实验室依据。

1 资料与方法

1.1一般资料选取2015年3月-2016年9月间在本院肾内科诊治144例2型糖尿病(T2DM)患者，根据患者的24 h尿微量白蛋白排泄率(UAER)水平，75例为单纯糖尿病患者(单纯DM组)，其中男51例，女23例，平均年龄(57.9±10.1)岁，病程(1-20年)。UAER≤30 mg/24 h，排除脑卒中、合并有肾炎、尿路感染、原发性高血压等其他疾病以及使用肾毒性药物引起肾损伤的患者。69例为DN早期(早期DN组)，其中男49例，女20例，平均年龄(55.2±11.2)岁，病程(2-18年)。UAER为30-300 mg/24 h，排除1型DM、中晚期DN、恶性肿瘤、心力衰竭等疾病和其他急慢性肾脏疾病以及严重肝脏、原发性和药物性引起肾损伤的患者。以上T2DM患者的病情符合美国糖尿病协会《2010年ADA糖尿病诊疗指南》的诊断标准[2]。同期选择在本院进行健康体检者72例(对照组),其中男50例、女22例,平均年龄(57.1±10.8)岁。经体格和实验室检查，健康体检者的重要器官(心、肝、肾等)功能、生化指标(血糖、尿蛋白、尿糖)以及UAER水平正常，且无DM、高血压病、肾脏疾病以及其它内分泌疾病。以上研究对象均自愿参加并签知情同意书，本研究获得本院医学伦理委员会批准。三组的年龄分布、性别构成等方面经统计学分析(P>0.05),具有可比性。

1.2方法次日清晨空腹(禁食12 h以上)抽取肘静脉血3 ml。同时收集24 h尿液并测量总量，量取5 ml。静脉血和24 h尿按常规方法以3 500 r/min，离心10 min。仪器为日立7600-020全自动生化分析仪。采用循环酶法检测Hcy水平，采用胶乳免疫比浊法检测Cys-C水平及尿液上清液β2-MG、mALB水平，计算UAER,公式UAER=mALB[mg/ml×24 h尿量(ml)]。Hcy检测试剂由四川新健康成生物股份有限公司提供，Cys-C、Uβ2-MG和mALB检测试剂由北京百奥泰康生物技术有限公司提供。

1.3判断标准所用正常参考区间为本实验室近年来对200例正常健康人群检测资料分析结果。Hcy<25 μmol/L为正常；Cys-C≤1.11 mg/L为正常；Uβ2-MG为0.03-0.14 mg/L为正常。单项检测时，结果超过参考区间的上限值即判定阳性。联合检测时，检测项目中只要其中二项或二项以上指标超过参考区间的上限值，即判定样本为阳性，反之则样本为阴性。

2 结果

2.13组血清Hcy、Cys-C、Uβ2-MG和UAER结果比较单纯DM组Hcy、Cys-C和Uβ2-MG检测水平高于对照组(P<0.05)，UAER略高于正常组(P>0.05)，早期DN组Hcy、Cys-C、Uβ2-MG和UAER检测水平均显著高于对照组和单纯DM组(P<0.01或P<0.05)。见表1。

2.2血清Hcy、Cys-C、Uβ2-MG与UAER相关性分析多因素线性相关分析显示 Hcy、Cys-C、Uβ2-MG与UAER均呈正相关(r=0.912，P<0.05，r=0.871，P<0.01，r=0.882，P<0.05)。Hcy与Cys-C、Uβ2-MG变量间呈显著正相关(r=0.753，0.631，P<0.05)，Cys-C与Uβ2-MG变量间呈正相关(r=0.832，P<0.01)。

表1 3组血清Hcy、Cys-C、Uβ2-MG和UAER结果比较

注：与对照组比较，aP<0.05。与单纯DM组比较，cP<0.01或dP<0.05。

2.3血清Hcy、Cys-C、Uβ2-MG单检或联检对DM患者肾损害早期诊断效率比较三项联合检测的特异性(61.3%)低于三项单项指标检测(69.3%,81.3%,76.0%)，比较差异无统计学意义(χ2分别为0.490，2.805,1.574，P均>0.05)；敏感性(94.2%)明显高于三项单项指标检测(62.3%,68.1%,65.2%)，比较差异有统计学意义(χ2分别为6.502,4.197,5.276,P均<0.05)，见表2。

表2 3项指标单项及联合检测患者肾损害早期诊断效率比较 (%)

注：与单项比较，aP<0.05，bP>0.05。

3 讨论

DM发病率呈逐年上升趋势,与人们饮食结构变化以及DM的治疗方法改善密切相关。DN是DM治疗过程中最为普遍的和常见的严重微血管慢性并发症之一，肾损害可阻碍体内代谢物从肾脏排出[3]。肾损害早期可减少肾小球基底膜上带负电荷的成分，降低肾小球滤过膜电荷选择性，致肾小球基底膜滤过屏障障碍，使mALb滤过率增加，当超过肾小管重吸收阈值时，患者的肾功能呈进行性下降，使mAlb可明显升高，持续性mAlb是目前临床DM引起肾小球损伤的重要标志[4]。即标志肾功能已开始恶化，预示患者的肾损害已无法逆转，已引起临床医务工作者的高度重视。DM患者肾损害的早期诊断，对于DM肾损害的治疗非常关键，可阻止DM进一步发展，亦是改善DM患者预后及提高生活质量的关键。因此，筛选肾损害早期评估指标对DM患者肾功能损害的早期治疗和预防具有重要意义。

Hcy是蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中的一个重要中间产物(含硫的非必需氨基酸)，并不参与蛋白质的合成，但其水平的高低与心脑血管疾病的发生发展有着极其密切的联系。亦是DM和DN的一个独立危险因素[5]，其易氧化成过氧化氢和超氧化物，进入血液循环可降低血管内皮细胞自由基清除系统，引起大量的自由基产生致肾脏微血管内皮细胞损伤，使细胞膜的完整性遭到破坏而导致肾小球功能受损，导致肾功能减退。肾脏是Hcy合成代谢的主要场所，无论是肾小球滤过功能下降，还是肾小管上皮细胞代谢功能异常均可直接影响Hcy在血液中水平[6]。Cys-C是一种低分子碱性非糖化的蛋白，由机体内有核细胞以恒定速率产生释放人血，参与调节细胞内肽和蛋白质的代谢。血液中的Cys-C通过肾小球滤膜滤过后绝大部分在近曲小管被重吸收，尿液排出量极少。肾前因素几乎影响血清Cys-C水平，但与肾小球滤过率呈明显的负相关[7]。当肾小球有轻微损伤时，血中Cys-C水平迅速升高，并随病情加重而逐渐增高，是临床目前公认反映肾小球滤过功能受损的早期敏感内源性标志物[8]。β2-MG是一种小分子球蛋白，由淋巴细胞、血小板等细胞产生。能自由经肾小球滤过，99.9%被肾近曲小管重吸收，最后由肾小管内皮细胞降解为氨基酸。正常情况下，经肾脏排出极为微量，当肾小球滤过功能受损或滤过负荷增加时，致β2-MG血清水平升高。尿液中β2-MG排出增加，说明滤过负荷增加或肾小管功能损害，是目前临床反映肾小球的滤过功能、肾小球病变早期诊断的敏感重要实验室指标之一[9]。

本研究结果显示，单纯DM组Hcy、Cys-C和Uβ2-MG检测水平高于对照组(P<0.05)，UAER高于正常组(P>0.05)，早期DN组Hcy、Cys-C、Uβ2-MG和UAER检测水平均显著高于对照组和单纯DM组(P<0.01或P<0.05)。说明Hcy、Cys-C和Uβ2-MG与DM病变进程密切相关，且随着肾损伤加重而逐步升高，可作为DM进程中重要检测指标。DM患者进行Hcy、Cys-C和Uβ2-MG和UAER检测，可及时发现DM患者肾损伤情况，为动态监测DM肾损害的发生发展、早期诊断提供实验室依据。

由于DM患者机体长期受多重代谢紊乱以及持续高血糖的影响，全身组织器官特别是肾、心血管及神经系统的损害及其功能障碍和衰竭，引起组织器官的严重损伤以及各种急慢性并发症已成为DM患者致残、致死的主要原因[10]。随着临床检验技术的不断发展，血清与尿液指标联合检测已逐步成为DM肾病早期发现的重要手段，通过多样化的多项指标联检综合评价DM的发生和进展，可提高DM肾损害早期诊断的准确性[11]。本研究通过对血液和尿液中的多项指标检测，综合分析DM早期肾损害。研究结果显示，Hcy、Cys-C、Uβ2-MG与UAER均呈正相关(r=0.912，P<0.05，r=0.871，P<0.01，r=0.882，P<0.05)。Hcy与Cys-C、Uβ2-MG变量间呈显著正相关(r=0.753，0.631，P<0.05)，Cys-C与Uβ2-MG变量间呈正相关(r=0.832，P<0.01)，与文献报道一致。说明Hcy、Cys-C和尿β2-MG指标与UAER的相关较好，3指标检测水平变化可反映DM患者的肾小球和肾小管已发生不同程度损伤。对DM患者肾损害早期诊断效率， 三项联合检测的特异性(61.3%)低于三项单项指标检测(69.3%,81.3%,76.0%)，比较差异无统计学意义(χ2分别为0.490，2.805,1.574，P均>0.05)；敏感性(94.2%)明显高于三项单项指标检测(62.3%,68.1%,65.2%)，比较差异有统计学意义(χ2分别为6.502,4.197,5.276,P均<0.05)，提示对DM患者来讲，在临床未出现大量蛋白尿之前，检测Hcy、Cys-C和Uβ2-MG水平可更准确、更客观地评估DM肾损害发生发展情况，提高临床肾损害早期诊断的敏感性，帮助基层医生制定合理的治疗及干预措施，促进肾脏功能的恢复有较高的临床应用价值。

综上所述，在DM肾损害早期Hcy、Cys-C和Uβ2-MG水平均会升高，是辅助诊断DM患者肾损害早期较为敏感的指标，联合检测可提高DM患者肾损害早期诊断的敏感性，减少误诊，为糖尿病肾病早期诊治、病情监测提供可靠的实验室依据。

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1007-4287(2017)12-2162-03

安勇(1983-), 男, 主管检验师, 主要从事临床检验、生化和免疫工作。

2017-02-15)