藏药喜马拉雅米口袋显微及薄层色谱鉴别
2017-12-21袁瑞瑛卓玛东智王聚乐
普 珍 袁瑞瑛 卓玛东智 王聚乐
(西藏大学医学院,西藏 拉萨 850000)
藏药喜马拉雅米口袋显微及薄层色谱鉴别
普 珍 袁瑞瑛 卓玛东智 王聚乐*
(西藏大学医学院,西藏 拉萨 850000)
目的:建立藏药材喜马拉雅米口袋的质量标准。方法采用显微鉴别法与薄层色谱法对样品进行鉴别。结果喜马拉雅米口袋的显微特征与薄层鉴别可作为该药材质量评价方法。结论两种方法简便、可行、操作性强,为该药材的质量控制提供了参考依据。
喜马拉雅米口袋;显微鉴别;薄层色谱鉴别
喜马拉雅米口袋(藏名杰巴区土)是《中华本草》藏药卷(2002)[1]所收载的药材之一,来源于豆科喜马拉雅米口袋Gueldenstaedtia himalaica Baker.的根、茎、花果及全草。具有利尿、消肿,主治水肿。目前该药材质量控制方面仅有性状鉴别,本文采用显微鉴别法与薄层色谱鉴别法对该药材进行定性鉴别,可作为藏药材喜马拉雅米口袋的质量评价方法。
1 仪器及试药
1.1 仪器:FA2004B电子天平(上海精密科学仪器有限公司)、恒温水浴锅(上海科析实验仪器厂)、JP2FⅠ-Ⅱ型紫外分析仪(上海嘉明马科技有限公司)、0.5%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板(青岛高能达化工有限公司)。RE-52A旋转蒸发器 (上海精科实验有限公司)、OLYMPUS-BX51高级荧光显微镜、TSView显微照相机。
1.2 试药:无水乙醇(批号20060516,天津市博迪化工有限公司)、甲醇(批号20060414,天津市博迪化工有限公司)、乙酸乙酯(批号20061109,天津市德才工贸有限公司)、芦丁对照品(中国药品生物制品检定所)。喜马拉雅米口袋药材采自西藏拉萨、林芝,并经西藏自治区食品药品检验所生药学专家 (格桑索朗,副主任药师) 鉴定为为豆科喜马拉雅米口袋的根、茎、花果及全草。
2 方法
2.1 显微鉴别:照显微鉴别法(《中国药典》2005年版第一部附录 II C)[2]项下的方法制片观察。包括根茎横切面显微鉴别、粉末显微鉴别。
2.2 薄层色谱鉴别
2.2.1 供试品溶液的制备:取本品粉末2g,用40mL无水乙醇分两次各超声处理30min,过滤,合并滤液,滤液蒸干,再用1.5mL无水乙醇溶解,即得供试品溶液。
2.2.2 对照品溶液的制备:精密称取芦丁对照品加甲醇制成1mg/mL的对照品溶液。
2.2.3 对照药材溶液的制备:取对照药材粉末2g,用40mL无水乙醇分2次各超声提取30min,合并滤液,滤液蒸干,再用1.5mL无水乙醇溶解,即得对照药材溶液。
2.2.4 薄层色谱法:按照《中国药典》2005年版第一部附录Ⅵ B试验[2],吸取上述3种溶液各10μL,分别点于同一以0.5%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-甲酸-水(8:1:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以3%三氯化铝-乙醇溶液进行显色,在100℃加热至斑点显色清晰,置紫外光灯(365nm) 下检视。供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
3 结果
3.1 显微鉴别:根茎横切面显微鉴别:本品根茎类圆形。最外层由1列栓化的细胞构成,细胞多角形或类圆形。皮层较窄,2~4列细胞,细胞圆形、类圆形,细胞壁不均匀增厚。维管束5~9个,呈环状排列,韧皮部外方被帽状的纤维束包裹,韧皮部较小,细胞多角形,较小;木质部类圆形,导管2~4个径向排列,形成层不明显。髓射线明显,较宽,由3~5列细胞构成,近木质部的细胞略木质化。髓部较宽广,全部由大型的薄壁细胞构成,见图1。
粉末显微鉴别:本品粉末浅棕色。单细胞或多细胞非腺毛多见,先端锐尖,基部细胞类长圆形,非腺毛长500~2000μm。纤维束较多,纤维细胞多碎断,胞腔较大,纹孔明显。导管多见,多为螺纹导管,单个或直径成束存在,直径50~80μm。表皮细胞可见,垂周壁较平直,偶有波状弯曲,有的表皮细胞上可见气孔,见图2。
3.2 薄层色谱鉴别:不同产地喜马拉雅米口袋平行条件下进行薄层色谱,结果如图3所示。
4 讨论
藏药材喜马拉雅米口袋的质量控制方面仅有性状鉴别,不能有效控制其质量[3]。本文采用显微鉴别法与薄层色谱鉴别法对该药材进行定性鉴别,并建立了该药材质量评价方法。结果显示,该方法简便、可行、操作性强。
[1]国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草(藏药卷)[M].上海:上海科学技术出版社,2002:318.
[2] 国家药典委员会.中国药典[S].一部,北京:化学工业出版社,2005:附录18.
[3] 陈静,支张,索朗次仁. 现代分析技术对藏药质量标准化的重要性[J].中国民族医药杂志,2015(6):36-37.
普珍(1971-),女,西藏日喀则人,副教授,研究方向:藏药药效学。
*通讯作者:王聚乐(1963-),男,陕西兴平人,教授,研究方向:藏药作用的物质基础与作用机制。
R291.4
B
1006-6810(2017)07-0048-02
2017年3月18日收稿