罗红霉素含量测定技术分析

赵德春

摘 要：目的：对于罗红霉素的含量进行测定，并且针对相关技术进行分析。方法：首先选取一定数量的罗红霉素样本，经过分配之后再进行研究，并且利用HPLC的方式对其进行检测，主要针对其进行吸光度以波长方面的检测，经过一系列试验之后进行对比和分析，经过总结就可以得出其中罗红霉素的实际含量了。结果：我们经过实际试验所得到了数据，并且对数据进行了分析，我們已经发现这种测定方式具有较高的精度，并且具有良好的稳定性，针对片剂以及分散片进行测定之后得到的含量并非完全相同，很多外界因素也会对其造成影响，例如反应时的温度以及作用时间等等。结论：上文中对罗红霉素进行质量测定的方式是比较合理的，运用光谱法可以有效检出罗红霉素在整个药品中的含量，值得进一步推广使用。

关键词：罗红霉素；含量测定；测定技术

有些物质本身存在着富电子的属性，而有些却又有缺电子的属性，所以利用这种属性来有效转移电荷，这样就可以组成一种络合物了，这个过程中就运用了荷移反应。很多物质生成的时候，荷移反应过程中所形成的络合物也经常在吸收波长和自身的颜色上存在一定的特色。所以在这个时候我们就需要通过一定手段来测定其物质含量，这种方式目前在罗红霉含量测定中有了一定程度的应用。在对罗红霉素的含量进行测定的时候，荷移光谱法是一种比较简便、测定结果较为准确的方式，可以有效确保整个试剂的稳定性，所以在目前受到很多人的重视，具有一定的推广价值。

就罗红霉素来说，其本身是抗生素的体验一个类别，具有较为明显的杀菌作用，尤其是对格兰阳性菌和厌氧菌具有较好的处理效果。当前来看，我们针对罗红霉素进行检定的方式还仍然较为传统，运用到的SP法和伏安法都已经比较老旧没并且测定结果本身也存在着一系列的问题，难以适应具体的需要，所以现在已经有越来越多的研究人员采用荷移光谱法了。本文主要针对荷移光谱法进行分析和探讨，确定其物质分析的准确性，希望可以给相关工作带来一些参考。

1 资料与方法

1.1 主要试剂与设备

TCNQ（Sigma公司产品）丙酮溶液：5.0×10-3mol/L：标准罗红霉素（罗红霉素对照品，购自中国药物生物制品检定所）：1.0×10-3mol/L丙酮溶液；甲醇、无水乙醇、丙酮、氯仿等有机试剂均为分析纯。罗红霉素片（江苏恒瑞医药股份有限公司，批号0501125l；江苏亚邦爱普森药业有限公司，批号041l129）。实验用水均为二次蒸馏水。UV2401PC型紫外可见分光光度计（日本岛津）；HHS21Ni型恒温水浴（北京靖卫科学仪器厂）。

1.2 实验方法

选定样品试剂，并应用能够承装10ml溶液的比色管进行丙酮溶液的承装，所承装的丙酮溶液量需要控制为5.0×10-3mol/L。同时在比色管中，加入适量的罗红霉素，利用丙酮溶液来对罗红霉素进行稀释，直到比色管中的混合液达到了标准刻度的时候，就可以充分的对两种物质进行摇匀处理，在进行混合液配制的过程中，需要将温度控制在30℃，并且两种物质的反应时间也需要控制在20min，将摇匀的溶液放置到低温环境下，进行冷冻，直到混合物的温度下降到室温温度值即可停止冷冻。最后配制一个相应的空白试剂，利用该试剂与混合试剂进行对比分析，利用比色皿来对两个试剂的吸光度进行检测，而吸光度的检测位置设定在743nm以及842nm的位置处。

1.3 样品的测定

（1）样品的准备：取不同厂家生产的罗红霉素各10片（标示量均为每片150rag），精确称量后研磨混匀，然后准确称取总量的十分之一，用丙酮溶解，过滤，弃去不溶物。滤液于100ml容量瓶中定容备用。

（2）样品的测定：取适量上述制备好的样品试液于10ml比色管中，按实验方法在max处进行测定，另按药典方法测定相同药物制剂含量，并用标准加入法作回收率实验。

2 结果

2.1 罗红霉素吸收光谱

按1.2实验方法配制溶液，以相应的试剂空白为参比，绘制吸收光谱。试验表明，罗红霉素与TCNQ形成的络合物分别在波长743、844nm处有两个吸收峰，试剂在此波长范围内吸收较小，罗红霉素在此波长范围内无吸收。

2.2 反应温度的影响

分别在10℃～60℃恒温一定时间后测量荷移络合物的吸光度，研究温度对荷移反应的影响。试验表明，反应的最佳温度为30℃。

2.3 反应时间的影响

控制反应温度为30℃，分别选择反应时间为10-50min，测定溶液吸光度，研究反应时间对生成络合物的影响。试验表明，最佳时间为20min。混合物在室温下放置，120min内溶液的吸光度稳定。

2.4 试剂用量的影响

改变试剂用量，研究试剂用量对反应的影响。实验表明，随着试剂用量的增加，荷移络合物的吸光度增大，当试剂用量达到一定时，溶液的吸光度基本保持不变，说明荷移反应趋于完全。适宜试剂用量为2ml。

2.5 溶剂的影响

分别用甲醇、无水乙醇、丙酮、氯仿等作溶剂，研究溶剂对反应的影响。实验表明，以丙酮作溶剂为好，其荷移络合物吸光度最大且稳定。

2.6 方法的重现性

移取6份罗红霉素进行测定，测定结果的相对标准偏差为1%，说明方法重现性较好。

3 结论

物质如果发生了荷移反应，经常会导致物质颜色出现变化，其实这些颜色变化也是荷移反应所产生的络合物上自带的。这种络合物可以有效吸收特定的波长，所以这是其具有的一个非常重要的特性，所以我们可以以此作为依托，来对物质含量进行较为精确的测定。当前荷移光谱法这种方式已经应用到很多药物的检测工作中了，其测量结果精确，操作简单，可以有效节约检测成本。

当前来看，经常用来药物含量测定的方式还有紫外光法，这种方式可以有效针对波长在0.2-0.4μm的物质进行检测，而罗红霉素的波长为0.212μm，所以刚好在其检测范围内，但国内外都已经有学者证明，这种检测方式本身并不具有很强的有效性，应用效果经常受到很多外界因素的影响，导致检测结果不准确。在针对罗红霉素进行检测的时候，往往会出现一些特殊情况，例如试剂被吸收、辅料在试验过程中被过量吸收等等，这些都给罗红霉素成分的测定带来了较大的影响，对于HPLC检测方式来说，其并非是针对最大吸收波长这一项内容进行检测的，所以我们采用了这种新型的、荷移光谱法来进行针对罗红霉素的检测工作。本次试验在最低检出量这一项虽然受到了一定程度的影响，但是我们也可以通过提高其使用剂量的方式来对这个问题进行弥补，这样一来，检测结果仍然是比较准确的，其他杂质也难以对检测结果造成什么干扰。

结合上文所谈，运用荷移光谱法这种方式可以得到较为准确的检测结果，具有着很多旧有的检测方式不具备的优点，例如操作简单、检测据有较高的稳定性等等，所以罗红霉素检测工作运用荷移光谱法完全可行，可以替代旧有的方式，值得进行广泛推广。

参考文献

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