贝牡莪消颗粒对PTU致大鼠甲状腺肿组织形态的影响

杜丽坤，李新梦，仲丽丽*

(1.黑龙江中医药大学附属第一医院,哈尔滨 150040；2.黑龙江中医药大学,哈尔滨 150040)

贝牡莪消颗粒对PTU致大鼠甲状腺肿组织形态的影响

杜丽坤1，李新梦2，仲丽丽2*

(1.黑龙江中医药大学附属第一医院,哈尔滨 150040；2.黑龙江中医药大学,哈尔滨 150040)

目的 通过丙硫氧嘧啶（PTU）造成大鼠甲状腺肿的模型，观察贝牡莪消颗粒对大鼠甲状腺肿组织形态的影响，进而探究该药物对本病的治疗作用。方法 选取40只雄性SD大鼠，随机选取其中10只作为空白组，其余30只给予丙硫氧嘧啶0.15 mg/g，1次/d，持续灌胃40 d。造模成功后，将30只大鼠随机分为3组，即模型对照组（2 mL/d）、贝牡莪消组（22.2 mg /g）、优甲乐组（0.08 μg /g）。30 d后处死大鼠，光镜下观察大鼠甲状腺的组织形态。结果 肉眼观察:PTU组大鼠甲状腺较空白组体积明显增大；镜下观察：PTU组与空白组对比，甲状腺滤泡间的差异明显，大小不一，呈圆形或椭圆形，滤泡腔变窄，呈现不规则的形状，腔内胶质数量明显降低。显微镜下观察大鼠甲状腺HE染色示：贝牡莪消组甲状腺滤泡与上皮细胞恢复较好，形态较为规则，基本恢复正常；而优甲乐组仍然可见到少许浸润的炎性细胞存在于滤泡腔和间质。结论 PTU能够导致大鼠甲状腺肿大；贝牡莪消组甲状腺细胞恢复程度明显优于优甲乐组，并能使大鼠甲状腺肿组织形态得到改善。

贝牡莪消颗粒；大鼠；甲状腺肿

结节性甲状腺肿是一种常见的良性甲状腺疾病，多是由于甲状腺良性上皮细胞增生太过而形成[1]。本病发病率约为7%以上，其中甲状腺癌的比例为5%～15%左右[2-3]，其影响因素多为年龄、性别、放射线接触史、遗传及其他[4]。以女性和老年人群发病率高，多表现为不同程度的甲状腺肿大，可触摸到甚至看到多个大小不等的结节，早期也可只有单个结节，本病病情进展缓慢，多数患者无自觉症状，或仅有颈部不适感[5]。本病隶属于中医“瘿病”“瘿瘤”“瘿囊”“瘿气”的范畴[6]。《外科正宗·瘿瘤论》认为：“夫人生瘿瘤之症，非阴阳正气结肿，乃五脏浊气、瘀血、痰滞而成”，认为气滞、血瘀、痰凝壅结于颈前乃本病的基本发病机理。《重订严氏济生方·瘿瘤论治》说：“夫瘿瘤者，多由喜怒不节，忧思过度，而成斯疾焉。大抵人之气血，循环一身，常欲无滞留之患，调摄失宜，气凝血滞，为瘿为瘤”，其认为气机郁滞、情志内伤与瘿瘤的发生密切相关[7-8]。本研究用PTU造成大鼠甲状腺肿的模型，分别予以贝牡莪消颗粒、优甲乐，观察两种药物对大鼠甲状腺肿组织形态的影响。

1 材料与方法

1.1 动物 40只SPF级健康雄性SD大鼠，体质量约（123±8.5）g，由黑龙江中医药大学实验动物中心供给，随机分为8笼，每笼5只。

1.2 药品 贝牡莪消颗粒（由浙贝母30 g、莪术20 g、牡蛎30 g、玄参20 g、夏枯草20 g构成）由黑龙江中医药大学附属第一医院制剂室供给，每只大鼠22.2 mg/g，1次/d灌胃；PTU：上海朝晖药业有限公司生产，50 mg×100片/瓶，批号：国药准字H31021082；优甲乐：德国默克公司，50 μg × 100片/瓶，批号：H20140052。

1.3 仪器 FA2004电子天平，低温冰箱，光镜，石蜡切片机，包埋机等。

1.4 方法 造模：选取40只雄性SD大鼠，喂养1周后，随机选取其中10只作为空白组，给予生理盐水2 mL /d。其余30只予以PTU 0.15 mg /g，1次/d，连续灌胃40 d。造模成功后，将30只大鼠随机分为3组，即模型对照组、贝牡莪消组、优甲乐组，分别予以生理盐水（2 mL /d）、贝牡莪消颗粒（22.2 mg /g）、优甲乐（0.08 μg /g）。30 d后处死大鼠，镜下观察大鼠甲状腺组织形态。样本收集：各组大鼠禁食不禁水12 h（实验当天禁水），10%水合氯醛（0.4 g /kg）腹腔注射麻醉[9]。剖取大鼠甲状腺组织，镜下观察大鼠甲状腺细胞形态。

1.5 统计学方法 实验数据用均数±标准差（x ± s ）表示，组间差别的对照应用单因素方差分析，两两进行比较，用SPSS 16. 0统计学软件进行分析，P ＜ 0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 大鼠甲状腺病理 由图1可见，镜下观：PTU组与空白组对比，甲状腺滤泡间的差异明显，大小不一，呈圆形或椭圆形，滤泡腔变窄，呈现不规则的形状，腔内胶质数量明显降低，立方上皮细胞增生肥大，其中部分滤泡增生，融合而形成巨大的滤泡，可见大量的炎性细胞浸润存在于滤泡腔和间质，在滤泡周边可见到丰富的毛细血管，滤泡间有多少不一的纤维组织分隔，表示大鼠甲状腺肿模型制造成功。

图1 大鼠甲状腺造模前后

2.2 贝牡莪消颗粒及优甲乐对PTU致大鼠甲状腺肿组织形态的影响 由图2可见，显微镜下观察大鼠甲状腺HE染色[10]，1）空白组：甲状腺滤泡呈中等大小，上皮细胞呈现出立方状或扁平状，滤泡腔充满着丰富的胶质。2）模型对照组：与空白组对比，甲状腺滤泡大小差异明显，滤泡腔变小，形状明显不规则，腔内胶质量明显降低，上皮细胞增生肥大，可见大量的炎性细胞侵润存在于滤泡腔和间质，呈高度增生相，滤泡之间界线模糊。3）贝牡莪消组：甲状腺滤泡与上皮细胞恢复较好，形态较为规则，基本恢复正常。4）优甲乐组 ：甲状腺恢复至中等大小，滤泡和上皮细胞得到较好的修复，但仍然可见到少许浸润的炎性细胞存在于滤泡腔和间质。

图2 贝牡莪消颗粒及优甲乐对PTU致大鼠甲状腺肿组织形态的影响

3 讨论

甲状腺具有调节人体生长、发育、代谢等非常重要的生理功能，对人体各个系统和腺体影响重大，是人体内最大的且具有特异性内分泌功能性腺体，合成、分泌的激素主要包括甲状腺素（T4）和三碘甲状腺原氨酸（T3）[11]。甲状腺疾病是内分泌系统中的一种常见疾病，由于生活环境的变化，近年来甲状腺疾病的发病率持续上升，而结节性甲状腺肿是其中较为常见的疾病。病人常常没有自觉症状，多是在体检时经触诊和检测后发现，其中经过触诊而发现的甲状腺结节约占4%，而根据高分辨率的超声检查，甲状腺结节的检出率约为17%到67%[12]，本病可由缺碘、辐射、细胞因子、遗传因素等引起[13]。对于本病，西医多采用药物和手术治疗，其中手术治疗复发概率高达18%～30%[14]，而甲状腺激素是目前传统治疗甲状腺结节最为常用的药物，但长期的甲状腺激素替代会影响甲状腺的正常生理功能[15]。优甲乐即左旋甲状腺素片，是一种人工合成的四碘甲状腺原氨酸钠，在体内转变为三碘甲状腺原氨酸，是目前临床最常用的甲状腺激素，能够抑制TSH分泌，防止甲状腺增大，阻止结节的形成，从而发挥对结节性甲状腺肿的防治作用[16]。

中医认为，本病多与情志所伤、饮食劳倦、水土失宜及体质因素等有关，发病机理多是肝旺克脾，脾失健运，气机阻滞，导致气聚痰凝，壅结于颈前而发为瘿。中医治疗结节性甲状腺肿累积了丰富的经验，大多数医家应用含碘量丰富的药物，如海藻、昆布、贝母、牡蛎等治疗本病[17]。本研究采用的复方中药制剂贝牡莪消颗粒，针对其气滞、痰凝、血瘀的主要病机，以活血行气、消瘿散结为治疗方法，标本同治，其中贝母、莪术清热化痰，消肿止痛，破血行气；牡蛎、夏枯草软坚化痰，清肝泻火，散结消肿，收敛固涩；玄参清热凉血，滋阴解毒。本方寒温并调，气血并调，咸味药和辛味药联合应用，共奏活血行气、消瘿散结之功效。根据实验结果，PTU能够导致大鼠的甲状腺肿大，贝牡莪消组的甲状腺细胞恢复程度明显优于优甲乐组，能使甲状腺肿大鼠的甲状腺组织形态得到改善。

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Effect of granule on the morphology of goitre induced by PTU in rats

DU Likun1, LI Xinmeng2, ZHONG Lili2*
(1.First Aff i liated Hospital of Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, China;2.Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, China)

Objective To investigate the effect of shellfish granule on the morphology of goiter in rats by probiotics (PTU), and to explore the therapeutic effect of the drug on the disease. Methods Forty male SD rats were randomly selected, and 10 of them were randomly selected as the blank group. The other 30 rats were given 0.15 mg/g of propylthiouracil and once/d for 40 days. Thirty rats were randomly divided into three groups: model control group (2 mL/d), shellfish (22.2 mg/g) and excellent group (0.08 μg/g). Rats were sacrificed 30 days later and the histomorphology of the thyroid was observed under light microscope. Results The naked eye: PTU group signif i cantly increased the volume of thyroid gland compared with the blank group; Microscopic view: PTU group compared with the blank group, the difference between the thyroid follicles were signif i cant, and sizes of them were different, round or oval, follicles cavity narrowed, showing irregular shape, the number of intracavity gel decreased significantly.Under the microscope, HE staining showed that the thyroid follicle and epithelial cells recovered from the shellf i sh were better than those in the control group. The morphological changes were normal and the control group showed that the inf i ltration of inf l ammatory cells was still cavity and interstitial. Conclusion PTU can lead to thyroid enlargement in rats. The recovery of thyroid cells in the shellf i sh was signif i cantly better than that in the excellent group, whichcould improve the thyroid tissue morphology and treatment was safe and effective.

shellf i sh eruca particles; rat goiter; PTU

R285.5

A

2095-6258(2017)06-0877-03

10.13463/j.cnki.cczyy.2017.06.006

黑龙江省自然科学基金项目(H201484) ; 黑龙江省博士后科研启动金资助项目( LBH-Q13164) 。

杜丽坤（1973 -），女，博士后，主任医师，硕士研究生导师，主要从事中医药治疗内分泌代谢疾病的研究。

*通信作者：仲丽丽，电话-18846421768，电子信箱- 516333572@qq.com

2017-02-27）