用电阻抗法自动血细胞分析仪检测血小板的影响因素研究

李少芳，韦 敏

(广西壮族自治区南宁市第一人民医院医学检验科，广西 南宁 530022)

用电阻抗法自动血细胞分析仪检测血小板的影响因素研究

李少芳，韦 敏

(广西壮族自治区南宁市第一人民医院医学检验科，广西 南宁 530022)

目的：探讨用电阻抗法自动血细胞分析仪检测血小板的影响因素。方法：将2014年7月至2016年10月在广西壮族自治区南宁市第一人民医院实施血小板输注治疗的60例患者作为研究对象。采集本组患者的空腹静脉血，分别使用手工显微镜法及电阻抗法自动血细胞分析仪对血液标本进行血小板检测，然后分析对本组血液标本的血小板异常直方图及血小板正常直方图中存在大血小板及血小板聚集的情况，并观察对本组中存在60～70 f1、50～59 f1及＜50 f1小红细胞的血液样本采用电阻抗法自动血细胞分析仪与手工显微镜法进行血小板检测的情况。结果：与血小板异常直方图相比，本组血液标本的血小板正常直方图中血小板聚集的检出率及大血小板的检出率均较高，差异有统计学意义（P＜0.05）。与血小板异常直方图相比，血小板正常直方图中血小板的计数较多，差异有统计学意义（P＜0.05）。与采用手工显微镜法进行血小板检测相比，在采用电阻抗法自动血细胞分析仪对本组中存在体积为60～70 f1、50～59 f1及＜50 f1小红细胞的血液样本进行血小板检测时，血小板的检出数均较多，差异有统计学意义（P＜0.05）。随着血液标本中小红细胞体积的缩小，在对其进行电阻抗法自动血细胞分析仪检测时血小板的检出数逐渐增多。结论：在对血液样本进行电阻抗法自动血细胞分析仪检测时，检出血小板的数量会受到血液样本中存在大血小板、血小板聚集及红细胞体积过小等因素的影响，其检测结果存在一定的误差。

电阻抗法；血小板；影响因素

血小板是巨核细胞脱颗粒产生的具有生理及酶活性的无核细胞，在某些生理和病理过程（如生理性止血）中可发挥重要的作用。进行血小板检测是临床上研究凝血及止血功能障碍的重要方法。获得准确的血小板数量可为临床医师诊治出血性疾病及血栓性疾病提供重要的参考数据。自动血细胞分析仪是临床上测定血小板的常用仪器，用其检测血小板具有可重复操作、操作方便快捷等特点，但用其测定血小板数量的准确度会受到一些因素的干扰[1]。本研究主要探讨用电阻抗法自动血细胞分析仪检测血小板数量的相关影响因素。

1 资料和方法

1.1 一般资料

本研究的对象为2014年7月至2016年10月在我院进行血小板输注治疗的60例患者。在这些患者中，有男41例，女19例；其年龄为45～70岁，平均年龄为（60.65±8.50）岁。这些患者均排除了发生恶性肿瘤、脑血管疾病及多器官功能衰竭的可能，均知晓本研究的内容并签署了对本研究的知情同意书。本研究已经通过本院伦理协会的审核与同意。

1.2 方法

抽取本组患者2.0ml的空腹静脉血，置于真空抗凝管（IMPROVE公司生产，EDTA-K2）中混匀，置于室温下，分别采用手工显微镜及电阻抗法血细胞分析仪（迈瑞生物医疗电子股份有限公司，BC3000）检测其中血小板的数量。

1.3 观察指标

1）分析对本组血液标本采用电阻抗法自动血细胞分析仪进行检测时血小板异常直方图及血小板正常直方图中存在大血小板及血小板聚集的情况。2）分析对本组中存在60～70 f1、50～59 f1及＜50 f1小红细胞的血液样本采用电阻抗法自动血细胞分析仪与手工显微镜法进行血小板检测的结果。

1.4 统计学分析

采用SPSS19.0统计软件对本研究中的数据进行分析，计量资料用（±s）表示，采用t检验，计数资料用%表示，采用X2检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 对本组血液标本采用电阻抗法自动血细胞分析仪进行检测时血小板直方图的分析

在对本组血液标本采用电阻抗法自动血细胞分析仪进行检测时，共检出血小板异常直方图20例，血小板正常直方图40例。与血小板异常直方图相比，血小板正常直方图中血小板聚集的检出率及大血小板的检出率均较高，差异有统计学意义（P＜0.05）。与血小板异常直方图相比，血小板正常直方图中血小板的数量较多，差异有统计学意义（P＜0.05）。对本组中检出血小板异常直方图与血小板正常直方图的血液样本进行手工显微镜检测时检出血小板的数量相比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。详情见表1。

2.2 对存在不同体积小红细胞的血液样本进行血小板检测的情况分析

与采用手工显微镜法进行血小板检测相比，在采用电阻抗法自动血细胞分析仪对本组中存在体积为60～70 f1、50～59 f1及＜50 f1小红细胞的血液样本进行血小板检测时，血小板的检出数均较多，差异有统计学意义（P＜0.05）。随着血液标本中小红细胞体积的缩小，在对其进行电阻抗法自动血细胞分析仪检测时血小板的检出数逐渐增多。详情见表2。

表1 对本组血液标本采用电阻抗法自动血细胞分析仪检测时血小板直方图的分析

表2 对存在不同体积小红细胞的血液样本进行血小板检测的情况分析(×109/L，±s)

表2 对存在不同体积小红细胞的血液样本进行血小板检测的情况分析(×109/L，±s)

检测方法 小红细胞体积＞70 f1（n=26）小红细胞体积＜50 f1（n=5）手工显微镜检测血小板的数量 206.68±19.92 242.12±21.68 256.94±24.26 271.88±34.62自动血细胞分析仪检测血小板的数量 214.06±24.64 260.95±32.45 347.88±42.62 488.87±63.33 t值 1.188 2.047 7.867 12.755 P值 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05小红细胞体积为60～70 f1（n=18）小红细胞体积为50～59 f1（n=11）

3 讨论

近年来,需要进行血小板输注治疗的患者逐渐增多。血小板极易粘附于破损的血管壁上。在临床上，检测血小板数量的方法虽较多，但其准确性均较差[2-3]。

电阻抗法是一种重复性高、操作快速的检测方法。此法可根据血细胞相对非导电的性质，以电解质溶液中悬浮的血细胞颗粒经过小孔时引发的电阻变化为向导，较为准确地测定血细胞的计数。但是，对发生异常情况的血液标本采用电阻抗法进行检测，难以准确测出血小板的数量。例如，在对患有糖尿病、血小板减少性紫癜等疾病的受检者采用电阻抗法进行血小板检测时，检出血小板的数量往往偏低。我们认为，导致这种情况的因素可能包括以下几种：1）血液标本中存在大血小板及血小板聚集现象对血小板数量测定的影响。在用电阻抗法进行血小板检测时，一定量的大血小板未被计入血小板数，进而造成检出的血小板的数量偏低[4]。本研究的结果显示，与血小板异常直方图相比，血小板正常直方图中血小板聚集的检出率及大血小板的检出率均较高，差异有统计学意义（P＜0.05）。与血小板异常直方图相比，血小板正常直方图中血小板的计数较多，差异有统计学意义（P＜0.05）。可见，存在大血小板及血小板聚集现象是影响采用电阻抗法进行血小板检测准确度的关键因素。在采用此法进行血小板检测时若出现血小板异常直方图，应采用手工显微镜法重新进行血小板检测。2）血液标本中小红细胞的干扰。电阻抗法是通过对同一系统中不同颗粒的大小进行区分来鉴别红细胞与血小板。当血液中小红细胞的量较大时可导致血小板上限区域改变。当血液标本中红细胞的体积超过70 f1时，对其进行电阻抗法自动血细胞分析仪检测的准确度一般不会受其中血小板上限区域的干扰。因此对其进行手工显微镜检测与电阻抗法自动血细胞分析仪检测的结果无明显的差异。当血液标本中红细胞的体积≤70 f1时，对其进行电阻抗法自动血细胞分析仪检测的准确度会受到血小板上限区域的干扰，其检出的血小板直方图上会错误地显示出小红细胞，进而可导致血小板的检出数偏高。我们在本次研究中发现，随着血液标本中小红细胞体积的缩小，在对其采用电阻抗法自动血细胞分析仪进行检测时血小板的检出数逐渐增多。可见，在对血液标本进行血小板检测时若发现其中存在体积较小的小红细胞，应采用二维激光散射或流式细胞计数法重新进行血小板检测。3）血液标本的放置时间过长。将血液标本放置较长的时间易使其中产生巨大血小板。巨大血小板若在体积为100～250 f1的红细胞直方图中出现，可导致血小板的检出数偏低。因此，在采集血液标本后应在1 h内完成血小板检测，而且应对全血标本频繁地进行混匀操作，以提高检测血小板数量的准确率。4）所用试剂的质量较差。在进行血小板检测时所用试剂质量的好坏可直接决定血小板的检出数，因此我们应尽可能使用与检测仪器的操作原理相匹配的试剂。对血液标本所用稀释液的离子强度及渗透压等可对检测结果造成不同程度的影响。因此，在对血液标本进行检测时应严防所用的稀释液受到污染，并禁止使用污染试剂（污染试剂中所含的杂质微粒可导致血小板数量偏高）。此外，在进行血液标本检测时使用不同的抗凝剂也可在一定程度上影响检测结果[5]。

综上所述，在对血液样本进行电阻抗法自动血细胞分析仪检测时，检出血小板的数量会受到血液样本中存在大血小板、血小板聚集及红细胞体积过小等因素的影响，其检测结果存在一定的误差。在采用电阻抗法自动血细胞分析仪进行血小板检测的过程中，应尽可能消除上述因素对检测结果的影响，并应在检出血小板异常直方图时采用手工显微镜法重新进行检测。

[1]焦瑞宝,李娜,刘娜,等.激光散射法和电阻抗法在全血血小板计数中的比较[J].安徽医药,2013,17(11):1887-1889.

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[3]周静,陈建安,陈丽莉,等.红细胞MCV和RDW对不同方法计数低值血小板的影响[J].海南医学,2016,27(13):2129-2131.

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R331.1+43

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2095-7629-（2017）12-0110-02