孕17周前夫妇地中海贫血流行病学分析

邹团标，王 蓉，姚莉琴，谢妙娟，杨 媛，郭光萍

（云南省妇幼保健院，昆明 650051）

孕17周前夫妇地中海贫血流行病学分析

邹团标，王 蓉，姚莉琴，谢妙娟，杨 媛，郭光萍*

（云南省妇幼保健院，昆明 650051）

目的：探讨云南省妇幼保健院产科门诊孕17周前孕产妇及其丈夫地中海贫血的携带情况，并对夫妇同型携带进行干预。方法：对2016年来本院门诊进行产检的300对夫妇静脉血用SYSMEX XT-1800全自动血细胞分析仪做血细胞分析，用SEBIA Capiliary 2进行血红蛋白电泳分析，对血红蛋白筛查阳性的夫妇进行基因诊断，对结果进行统计分析。结果：门诊产检的群体人口背景组成较复杂，包括了13个民族和19个籍贯，地中海贫血的血细胞筛查阳性率为11．00%，电泳的阳性率为7．50%，基因诊断阳性率为2．33%。检出的基因型别为αα∕-α3．7，αα∕--SEA，IVS-Ⅱ-654 复合αα∕-α4．2，CD17，CD41-42，βE，βE复合αα∕-α3．7共7种类型，其中以CD17和αα∕--SEA为主，没有发现地中海贫血同型夫妇。结论：了解了本院产科门诊的地中海贫血流行情况，为优生优育及地中海贫血的防控和诊断提供重要依据。

地中海贫血；孕17周夫妇；流行病学分析

地中海贫血（Thalassemia），也称珠蛋白合成障碍性贫血，是由于珠蛋白基因的缺陷使珠蛋白肽链合成减少或不能合成，导致红细胞内血红蛋白的组成成分发生改变，引起的慢性溶血性贫血〔1〕。地中海贫血是全球最大的单基因遗传病之一，好发于世界上一些特有的热带及亚热带地区，我国南方省份如广西、广东和云南为地中海贫血高发区〔2〕，包括中国南部，有严重的危害性。云南省部分少数民族的地中海贫血携带率在21%左右，育龄人群携带率在10．5%左右〔3〕。目前缺乏对重型地中海贫血的有效治疗方法，新婚夫妇和计划怀孕夫妇在怀孕前实施地中海贫血筛查，是目前防止重型贫血儿出生的有效预防方法。对于孕前未接受地中海贫血筛查的夫妇，孕期要动员其及早接受地中海贫血筛查，孕17周前是一个关键时期，对妊娠妇女及其丈夫进行产前干预显得相当重要。为此，我们对我院孕17周前产检的孕妇及其丈夫进行地中海贫血筛查和基因诊断，了解我院门诊常见地中海贫血基因携带情况，进一步指导规范地中海贫血防控，以实现优生优育，现总结报告如下。

1 资料与方法

1．1对象收集2016年1月至2016年12月在我院门诊产前检查300名孕周＜17周孕妇，同时对其配偶也进行地中海贫血筛查，总共600名，男方年龄：18～51岁，均值：（29．5±4．3）岁，女方年龄：18～44岁，均值：（27．2±5．9）岁。

1．2方法与步骤

1．2．1 填表咨询 随机选择我院产科门诊产检孕周＜17周的孕妇及其配偶，在其知情同意后，统一填写《地中海贫血技术服务档案》，并记录详细信息。

1．2．2 血样采集 在知情同意基础上，到实验室进行静脉血的采集，一次性采集夫妇抗凝静脉血各2管，每管血样不少于2 mL，做好标识，其中1管用于血常规检查及血红蛋白分析，另一管标注“基因”字样，用于基因检测，方便群众，避免多次抽血。

1．2．3 血细胞分析 用SYSMEX XT-1800五分类血细胞分析仪在采血4 h内进行血常规检查，检测平均红细胞体积（MCV）和平均红细胞血红蛋白含量（MCH）红细胞参数：红细胞平均体积（MCV）、红细胞平均血红蛋白量（MCH）、血红蛋白量（HGB）采用全自动五分类血细胞分析仪进行检测。每日质控，操作严格按照SOP操作规程完成检测。

1．2．4 血红蛋白电泳检测 下列情况之一者，受检对象血常规检查结果为阳性：（1）MCV＜80 fL；（2）MCH＜27 pg；（3）MCV＜80 fL和MCH＜27 pg。进行血红蛋白电泳分析，采用法国SEBIA Capillarys 2 flexpiercing毛细管血红蛋白分析仪及原装试剂和质控品。

1．2．5 地中海贫血基因诊断 仪器：美国伯乐CFX 96实时荧光PCR仪。试剂：地中海贫血基因诊断试剂盒由深圳益生堂提供。α地中海贫血基因检测内容应包括--SEA、-α3．7、-α4．23 种缺失型基因及CS、QS和WS 3种非缺失基因突变。β地中海贫血基因检测内容应包括：CDs41-42（-CTTT）、IVS-Ⅱ-654（C＞T）、-28（A＞G）、CDs71-72（+A）、CD17（AAG＞TAG）、CD26（GAG＞AAG）、CD31（-C）、CDs27∕28（+C）、IVS-I-1（G＞T）、CD43（GAG＞TAG）、-32（C＞A）、-29（A＞G）、-30（T＞C）、CDs14-15（+G）、Cap+40-43（-AAAC）、Initiation condon（ATG＞AGG）、IVSI-5（G＞C），共17种非缺失基因突变。

1．3统计学方法采用统计学软件SPSS 19．0对数据进行统计学分析。计量资料用（x±s）表示，用t检验；计数资料用%表示，采用χ2检验，以P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1人口背景资料我院门诊产检的群体人口背景组成较复杂，包括了13个民族，血液学和电泳地中海贫血筛查阳性以汉族、彝族和白族3个民族为主。人群地域上显示，来自19个省市，其中以湖南、重庆、云南和四川筛查阳性率最高，分别是17．65%、16．67%、11．46%和5．71%。见表1～2。

2．2筛查阳性率情况地中海贫血的血细胞筛查阳性率为11．00%，电泳的阳性率为7．50%，基因诊断阳性率为2．33%。红细胞参数和筛查阳性率男、女比较，MCV、MCH、HGB、HbA2、计量资料t检验，只有HGB、HbA2两个项目在男女中，差异有统计学意义（P＜0．05），用红细胞参数和毛细管电泳阳性率用χ2检验比较，差异没有统计学意义（P＞0．05）。见表3。

表1 民族分布情况统计

表2 籍贯分布情况统计

表3 红细胞参数结果男女比较

2．3基因诊断结果红细胞参数和筛查阳性率比较见表4。基因型构成比情况见表5。本次显示检出的基因型别为αα∕-α3．7，αα∕--SEA，IVS-Ⅱ-654 复合αα∕-α4．2，CD17，CD41-42，βE，βE复合 αα∕-α3．7共7种类型，其中以CD17和αα∕--SEA为主。

表4 不同筛查项目男女阳性率比较

表5 基因型构成比情况

3 讨论

3．1地中海贫血概述地中海贫血是一组严重威胁人类健康的致死、致残的常染色体隐性遗传病。临床症状轻重不一，大多表现为慢性进行性溶血性贫血，主要有α地中海贫血和β地中海贫血。若夫妻为同型地中海型贫血携带者的，每次怀孕，其子女有1∕4的机会为正常，1∕2的机会为携带者，另1∕4的机会为重型地中海贫血患者〔4〕。目前地中海贫血尚无经济可靠的治疗方法，但通过地中海贫血筛查、基因检测和产前诊断，可以实现有效预防。为减少重症地中海贫血儿出生，应对新婚夫妇及计划怀孕夫妇实行地中海贫血筛查、基因检测和产前诊断等地中海贫血防控措施。对于孕前未接受地中海贫血筛查的夫妇，孕期要动员其及早接受地中海贫血筛查，最好在孕17周前为产前诊断赢得时间。产前诊断宜在孕24周以前进行。采用绒毛穿刺术穿刺时间为孕10～14周、羊水穿刺术的穿刺时间在孕16周。云南省为地中海贫血高发区，特别是少数民族地区，全国两次较大规模的调查，云南发生率是全国之冠〔5〕。本文通过随机抽取我院门诊孕17周前的300对夫妇了解地中海贫血携带情况。

3．2地中海贫血的地域和民族比较本次调查显示，我院门诊产检的群体人口背景组成较复杂，有满族、阿昌族、白族、布依族、傣族、哈尼族、汉族、回族、傈僳、蒙古、苗族、彝族、壮族等13个民族，其中以汉族、彝族和白族3个民族为主，血液学和电泳地中海贫血筛查阳性也是以他们为主。人群地域上显示，来自19个省市，其中湖南、重庆、云南和四川筛查阳性率最高，分别是17．65%、16．67%、11．46%和5．71%，说明随着社会经济发展，人口流动性在加大，一定意义上对地中海贫血的防控是有利的。因为地中海贫血有一定的民族和地域性分别规律，在我国主要集中在长江以南省区的一些少数民族地区〔6〕，按遗传规律看，携带者与正常人群结婚生育的下一代，携带者的几率为25%，重症的几率为0。

3．3地中海贫血的横向比较本次调查，因为抽样的样本不够多和人口背景的复杂性，地中海贫血的血细胞筛查阳性率为11．00%，电泳的阳性率为7．50%，基因诊断阳性率为2．33%，与文传芳的报道〔7〕相当，与文献报道云南省部分少数民族的地中海贫血携带率在21%左右，育龄人群携带率在10．5%左右〔8〕相差较大，原因是本次调查人群组成的复杂性，所以不是云南省本土真实情况，只代表我院门诊产检人群的携带情况。

3．4男女筛查结果比较调查分析显示红细胞参数和筛查阳性率男女比较，MCV、MCH、HGB、HbA2、计量资料t检验，只有HGB、HbA2两个项目在男女中，差异有统计学意义（P＜0．05），红细胞参数和毛细管电泳阳性率用χ2检验比较，差异没有统计学意义（P＞0．05）。

3．5基因诊断情况本次显示检出的基因型别为αα∕-α3．7，αα∕--SEA，IVS-Ⅱ-654 复合αα∕-α4．2，CD17，CD41-42，βE，βE复合 αα∕-α3．7共7种类型，其中以CD17和αα∕--SEA为主，与胡绍梅报道〔9〕相一致有两例是α和β复合型的，这样的型别遗传给下一代的概率增加〔10〕。这次调查没有发现夫妇同型地中海贫血，所以进行产前诊断的为0例。

云南省是一个地中海贫血高发省份，由于地处边疆、少数民族分布广、经济不发达，加之人们地中海贫血防控意识普遍偏低，所以地中海贫血的防控任重而道远。地中海贫血防控主要是对新婚夫妇及计划怀孕夫妇实行地中海贫血筛查、基因检测和产前诊断。对于孕前未接受地中海贫血筛查的夫妇最好在孕17周前动员其及早接受地中海贫血筛查，为产前诊断赢得时间，筑牢产前的最后一道防线。本次对我院产科门诊孕17周前孕妇及其丈夫地中海贫血流行病的分析研究，一方面搞清楚了我院产科门诊的地中海贫血流行情况，为优生优育提供指导，另一方面也填补了在产科门诊正常产检中实施地中海贫血筛查的空白，为我省地中海贫血的防控和诊断提供一定的指导。

〔1〕WEATHERALL D J．Thalassemia：the long road from bedside to genome〔J〕．Nat Rev Genet，2004，5（8）：625-631．

〔2〕杜传书．地中海贫血研究的现在与未来〔J〕．中华医学遗传杂志，1996，13（5）：257-258．

〔3〕丁雪梅，曾小红，朱宝生．5 450例云南省育龄人群地中海贫血筛查结果分析〔J〕．临床检验杂志，2014，32（9）：693-696．

〔4〕胡兰萍，王卫红，贺骏，等．长沙地区10 987例育龄人群地中海贫血筛查结果分析〔J〕．中国优生与遗传杂志，2014，22（3）：19-22．

〔5〕ZENG Y T，HUANG S Z．Disorders of haemoglobin in China Journal of Medical Genetics〔J〕．1987，24：578-583．

〔6〕ZHENG C G，LIU M，DU J，et al．Molecular spectrum of αand β-globin gene mutations detected in the population of Guangxi Zhuang Autonomous Region，People’s Republic of China〔J〕．Hemoglobin，2011，35（1）：28-29．

〔7〕文传芳，戴卓娅，陶才莉，等．重庆市璧山区孕期人群地中海贫血流行病学研究〔J〕．重庆医学，2015，44（9）：1201-1202．

〔8〕张瀚文，杨雯，贺静，等．云南省地中海贫血的血液学初筛与分析〔J〕．中国妇幼保健，2016，31（11）：2334-2337．

〔9〕胡绍梅，张宁．彭水地区孕妇地中海贫血流行病学研究〔J〕．深圳中西医结合杂志，2016，26（18）：12-13．

〔10〕杨艳秋，番云华．德宏州173例地中海贫血患者αβ复合型基因型检测〔J〕．大理学院学报，2010，9（6）：80-82．

（责任编辑 董 杰）

An Analysis of the Thalassemia Epidemiology of 17-Week Pregnant Spouse

Zou Tuanbiao,Wang Rong,Yao Liqin,Xie Miaojuan,Yang Yuan,Guo Guangping*
（Yunnan Province MCH Hospital,Kunming 650051,China）

Objective:To investigate the carrying status of thalassemia in 17-week pregnant women and their husbands in obstetric clinic of the MCH hospital,and to intervene in the same type of couples．Methods:Blood cell in venous blood of 300 outpatient couples in our hospital in 2016 was analyzed by the use of SYSMEX XT-1800 automatic blood cell analyzer．SEBIA Capiliary 2 hemoglobin was analyzed;suspected hemoglobin couples were given a gene diagnosis,and the statistical analysis of the results was conducted．Results:Demographic composition of the outpatient group was relatively complex,including 13 ethnic groups and 19 birth places．The positive rate of blood cells in screening of thalassemia was 11．00%,the positive rate of electrophoresis was 7．50%,and the positive rate of genes diagnosis was 2．33%．The positive rate of red blood cell parameters and screening of male and female was only HGB and HbA2 measurement data test was P＜0．05．The difference was not statistically significant with Genotype detection of αα∕-α3．7,αα∕--SEA,IVS-II∕-654 composite αα∕- α4．2，CD17,CD41-42, βE, βE composite αα∕- α3．7total of seven genotype,in which the majority had CD17 and αα∕--SEAthalassemia．The same type of thalassemia couples was not found．Conclusion:It is significantly meaningful to analyze the epidemic of thalassemia in gynecology clinic pregnancy before 17-week pregnancy,and to acquire the gynecology clinic diagnosis of epidemic situation,which can provide guidance for eugenics and prevention and diagnosis of thalassemia in our province．

thalassemia;the 17-week pregnant women;epidemiology

R715．5

A

2096-2266（2017）10-0058-05

10．3969 ∕j．issn．2096-2266．2017．10．015

2017-06-16

2017-08-31

邹团标，副主任检验师，主要从事地中海贫血的流行病学和分子诊断研究．

*通信作者：郭光萍，主任医师．