饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌组合使用对仔猪生长性能影响初探

王志祥，白华毅，王桂瑛，杨保和，袁明凤，陈朝勇，廖国周，王雪峰，邹建华，程志斌*

（ 1.云南省禄劝县畜牧兽医总站，云南 禄劝 651500；2.云南农业大学，昆明 650201；3.云南快大多畜牧科技有限公司，云南 玉溪 650201；4.昆明三正生物科技（集团）有限公司，昆明 650217；5.云南省西双版纳州勐腊县畜牧兽医站，云南 勐腊 666300）

饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌组合使用对仔猪生长性能影响初探

王志祥1，白华毅2，王桂瑛2，杨保和3，袁明凤3，陈朝勇4，廖国周2，王雪峰2，邹建华5，程志斌2*

（ 1.云南省禄劝县畜牧兽医总站，云南 禄劝 651500；2.云南农业大学，昆明 650201；3.云南快大多畜牧科技有限公司，云南 玉溪 650201；4.昆明三正生物科技（集团）有限公司，昆明 650217；5.云南省西双版纳州勐腊县畜牧兽医站，云南 勐腊 666300）

将28日龄断奶仔猪32头（杜×长×大）分为4个处理组：对照组（抗生素组）、试验组1（凝结芽孢杆菌组）、试验组2（枯草芽孢杆菌组）、试验组3（同时添加凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌组），研究凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌组合使用对仔猪生长性能和饲料养分消化率的影响。试验结果表明，平均日增重指标，试验组1和试验组3差异不显著（P>0.05），均显著高于对照组和试验组2（P<0.05）。料肉比指标，试验组1显著低于其他3个处理组（P<0.05）。试验组1仔猪对饲料的干物质表观消化率与对照组差异不显著（P>0.05），均显著高于试验组2（P<0.05）。试验结果表明，仔猪商业饲料在组合使用多种常规饲用抗生素的基础上，单一添加饲用凝结芽孢杆菌能够进一步改善断奶仔猪的生产性能，然而单一添加枯草芽孢杆菌或凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌组合使用均没有获得显著的正效应。

凝结芽孢杆菌；枯草芽孢杆菌；仔猪；生长性能

凝结芽孢杆菌自2013年12月列入我国农业部《饲料添加剂品种目录》以来，动物营养学家与饲料企业配方师一直在研究饲用凝结芽孢杆菌在畜禽饲料中的应用技术[1-2]。尤其在减少断奶仔猪饲用抗生素使用领域取得一定成果与进展[3-6]。充分肯定饲用凝结芽孢杆菌的应用效果与商业价值[7-9]。

我国农业部《饲料添加剂品种目录》规范使用的饲用微生态制剂有34种，除了凝结芽孢杆菌外，市场常见的饲用微生态制剂种类还包括：酵母菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、屎肠球菌、粪肠球菌、丁酸梭菌等6种，且当前商业推广的饲用微生态产品，多为多种菌种的复合制剂产品。这一趋势提示，在确定单一饲用凝结芽孢杆菌使用效果的基础上，进一步研究凝结芽孢杆菌与其他饲用微生态制剂的组合效果，以支持商业复合微生态制剂产品的研发与推广，具有现实意义[3-7]。鉴于当前这方面的研究报道极少，本试验探索性开展饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌组合使用对仔猪生长性能影响的研究，为“无抗、减抗”仔猪饲料的研发及复合饲用微生态制剂的推广奠定科学基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

饲用凝结芽孢杆菌制剂1×1010cfu·g-1，饲用枯草芽孢杆菌制剂2×1010cfu·g-1，均由昆明三正生物科技（集团）有限公司提供。

1.2 试验动物与试验设计

按照日龄一致、体重相近的原则，选择28日龄断奶健康商品阉公猪（杜×长×大）32只，分为4个处理组，每组8只，开展试验，所有试验猪代谢笼饲养。对照组（抗生素组），添加吉他霉素50 mg· kg-1、土霉素50 mg· kg-1、金霉素75 mg·kg-1。在对照组日粮及预混合饲料基础上，试验组1添

加饲用凝结芽孢杆菌500 g·t-1；试验组2添加饲用枯草芽孢杆菌500 g·t-1；试验组3同时添加饲用凝结芽孢杆菌500 g·t-1和饲用枯草芽孢杆菌500 g·t-1。

1.3 试验饲粮

试验采用“玉米-豆粕-鱼粉”型基础日粮，参照NRC（1998）猪营养需要标准并结合云南省市场实际情况配制试验日粮，见表1。试验饲料由云南快大多畜牧科技有限公司生产。

1.4 饲养管理

饲养试验在云南省禄劝县畜牧兽医总站猪场进行，在试验期每天8:00、12:30、18:00定时饲喂，自由饮水，免疫、消毒、卫生等饲养管理按常规进行。试验期为28 d。

1.5 测定指标

1.5.1 生长性能

测定猪体重、采食量，计算平均日增重、平均日采食量、料肉比等指标。

1.5.2 饲料表观消化率试验

采用内源指示剂法测定仔猪对饲料主要营养组分的表观消化率[10]。试验从第14天开始，连续4 d收集粪样，-20℃保存。待试验结束后，粪样统一解冻，于60±3℃烘干，粉碎后待检测。实验室分析测定干物质、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维等表观消化率，由云南农业大学完成。

1.6 统计分析

试验数据采用SPSS 20.0软件One Way ANOVA进行统计分析，并进行Duncan's多重比较，结果以“平均值±标准误”表示。

2 试验结果

2.1 饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌组合使用对仔猪生长性能的影响

饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌组合使用对仔猪生长性能的影响见表2。

由表2可知，试验结束仔猪56日龄的末体重，单一添加凝结芽孢杆菌的试验组1仔猪体重显著高于对照组（抗生素组）（P<0.05），而单一添加枯草芽孢杆菌的试验组2仔猪体重与对照组差异不显著（P>0.05），同时使用凝结芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的试验组3仔猪体重虽然大于对照组，但差异不显著（P>0.05）。平均日增重指标：试验组1和试验组3差异不显著（P>0.05），均显著高于对照组和试验组2（P<0.05），且对照组和试验组2差异不显著（P>0.05）。料肉比指标：试验组1显著低于其他3个处理组（P<0.05）。此外，试验全期4个处理组仔猪腹泻率均在实际养殖合理的范围内。

表1 试验基础日粮配方及营养水平

表2 饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌组合使用对仔猪生长性能的影响

2.2 饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌组合使用对饲料养分表观消化率的影响

饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌组合使用对饲料养分表观消化率的影响见表3。

由表3可知，试验组1仔猪对饲料的干物质表观消化率与对照组差异不显著（P>0.05），均显著高于试验组2（P<0.05）。试验组3干物质表观消化率与对照组相比差异不显著（P>0.05）。粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维等表观消化率指标，4个处理组之间差异不显著（P>0.05）。

表3 饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌组合使用对饲料养分表观消化率的影响%

3 讨论

2016年7月26 日，我国农业部公告第2428号公布于2017年4月30日全面禁止使用硫酸黏菌素。2017年9月8日，我国农业部针对高铜、高锌发布了《饲料添加剂安全使用规范》的修订意见征求稿，将<25 kg仔猪日粮铜的最高添加限量从200 mg·kg-1下调为125 mg·kg-1，同时将<25 kg仔猪日粮锌的最高添加限量从2 250 mg·kg-1下调为150 mg·kg-1。这一修订意见提示，我国广大饲料企业配方师广泛采用降低仔猪腹泻的“三大”传统组合方案：以硫酸黏菌素为主的组合饲用抗生素、高铜配方、高锌配方，即将退出我国饲料工业与养猪业。这也催促广大饲料企业及配方师，尽快完善“替抗”方案和选用优质“替抗”产品，以保障断奶仔猪生产性能。据此，本文初步探索了饲用微生态制剂凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌在断奶仔猪饲料中的组合使用技术及效果。

本试验对照组参考当前饲料企业预防断奶仔猪腹泻的实际生产配方，添加了吉他霉素、土霉素、金霉素。鉴于当前我国饲料工业与养猪业水平处于从“减抗”到“无抗”的过渡期，并没有全面禁止饲用抗生素，因此为了使试验结果更接近于真实生产情况，在对照组日粮及预混合饲料基础上，试验组1添加饲用凝结芽孢杆菌500 g·t-1；试验组2添加饲用枯草芽孢杆菌500 g·t-1；试验组3同时添加饲用凝结芽孢杆菌500 g·t-1和饲用枯草芽孢杆菌500 g·t-1。表3结果表明，4个处理组仔猪腹泻率（2%~4%）均在合理的实际养殖生产水平范围内，研究表明试验日粮配方符合实际生产情况，试验数据能够满足广大饲料企业配方师逐步实施“减抗”的需求[11-14]。

添加了饲用凝结芽孢杆菌（5×106cfu·g-1）的试验组1和试验组3两组仔猪的平均日增重差异不显著，均显著高于对照组（抗生素组）和试验组2（枯草芽孢杆菌组）。这一结果表明，在所有试验仔猪腹泻率正常、健康状况良好的条件下，添加饲用凝结芽孢杆菌能够进一步提高28~56日龄仔猪的生长速度。高书锋等研究了3个剂量（5×106、7.5×106、1×107cfu·g-1）凝结芽孢杆菌对28日龄断奶仔猪（7 kg）生长性能的影响，结果表明，与对照组（金霉素50 mg·kg-1）相比，3个添加了饲用凝结芽孢杆菌的试验组仔猪平均日增重均显著提高[4]。本试验结果与高书锋等的报道一致。

试验4个处理组的试验仔猪在平均日采食量差异不显著的条件下，试验组1料肉比优于其他3个处理组。结果表明，在日粮含有规范使用的抗生素基础上，饲用凝结芽孢杆菌能够进一步改善仔猪的饲料转化效率[3-6]。表4分析仔猪对饲料的表观消化率表明，试验组1的干物质消化率最高，印证了表3生产性能的结果。在日粮含有抗生素的基础上，使用较高剂量（1×107cfu·g-1）的饲用枯草芽孢杆菌降低了饲料转化效率。

表3结果表明，试验组2添加枯草芽孢杆菌的仔猪料肉比最高，表4进一步分析表观消化率表明，试验组2的干物质消化率最低。在日粮含有抗生素的基础上，试验组3同时添加饲用凝结芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌，仔猪综合生产性能反而略低于单一使用凝结芽孢杆菌的试验组1。造成以上结果的原因包括：选用优质的饲用凝结芽孢杆菌制剂产品是获得断奶仔猪良好生产性能的关键。因为按照细菌功能划分，凝结芽孢杆菌在仔猪肠道内增殖、增生过程中产生L-乳酸，因此凝结芽孢杆菌属于乳酸菌类细菌，具有直接杀菌抑菌功效[7,15]。研究表明采用牛津杯法实验表明，凝结芽孢杆菌体外强效抑制致病大肠杆菌[16-19]。周映华等饲养试验表明，饲喂凝结芽孢杆菌能够显著降低断奶仔猪粪便中的致病大肠杆菌数量[6]。枯草芽孢杆菌抑制猪肠道大肠杆菌的试验一直没有确证。现有的一些综述只是假设为枯草芽孢杆菌的“肠道占位”理论[13]。但在实际生产的复杂养殖条件下，这一假设不足以保障仔猪肠道菌群平衡，因为没有枯草芽孢杆菌的直接抑菌证据，这也是枯草芽孢杆菌在仔猪断奶料中使用效果不稳定的根本原因[13]。不同微生态制剂之间是协同、还是颉颃效应决定了复合饲用微生态制剂的实际效果[20]。姚晓红等和赵钰等采用牛津杯法试验表明，凝结芽孢杆菌体外对枯草芽孢杆菌具有一定抑制作用[17-18]。与本试验的结果吻合，与对照组添加多种抗生素相比，单一添加饲用凝结芽孢杆菌能够进一步改善断奶仔猪的生产性能，但是凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌组合使用时没有获得显著的正效应。这一结果进一步表明，当前市场大量销售的凝结芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌复合产品，其作用效果与机理有待进一步研究。

4 小结

试验结果表明，在组合使用多种常规饲用抗生素的基础上，单一添加饲用凝结芽孢杆菌能够进一步改善断奶仔猪的生产性能，表现在腹泻率和料肉比降低、生长速度提高方面。然而，单一添加枯草芽孢杆菌或凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌组合使用均没有获得显著的正效应。

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Effects of Combined Use of Bacillus Coagulans and Bacillus Subtilis on Growth Performance of Piglets

WANG Zhixiang1,BAI Huayi2,WANG Guiying2,YANG Baohe3,YUAN Mingfeng3,CHEN Chaoyong4,LIAO Guozhou2,WANG Xuefeng2,ZOU Jianhua5,CHENG Zhibin2*

（1.Animal Husbandry and Veterinary Station of Luquan County,Luquan 651500,Yunnan China;2.Yunnan Agricultural University,Kunming 650201,Yunnan China;3.Yunnan Kuaidaduo Animal Husbandry Technology Co.,Ltd.,Yuxi 653100,Yunnan China;4.Kunming Sanzheng Biotechnology Co.,Ltd.,Kunming 650217,Yunnan China;5.Animal Husbandry and Veterinary Station of Mengla County,Mengla 666300,Yunnan China）

The objective of this experiment was to study the effects of Bacillus coagulans and Bacillus subtilis on the growth performance and the nutrient utilization in weaned piglets.Thirty two Duroc×Landrance×York piglets at the age of 28 d were devided into four treatment groups,including the control group(antibiotic treatment),group 1(addition of Bacillus coagulans),group 2(addition of Bacillus subtilis),and group 3(combination use of Bacillus coagulans and Bacillus subtilis).The results showed that in the aspect of the average daily gain index,the difference between the experimental group 1 and the test group 3 was not significant(P>0.05),which was significantly higher than that of the control group and the experimental group 2(P<0.05).In the aspect of feed to meat ratio,the experimental group 1 was significantly lower than the other three treatment groups(P<0.05).The dry matter apparent digestibility of the piglets in the test group 1 was not significantly different from that of the control group(P>0.05),which was significantly higher than that of the control group(P<0.05),and the experimental group 2 was significantly higher than that of the control group.These findings suggested the Bacillus coagulans additive in weaned piglet diets could enhance the growth performance and nutrient utilization,but the addition of Bacillus subtilis or the combination use of Bacillus subtilis and Bacillus coagulans could not achieve the further improvement of the growth performance on the base of the conventional antibiotic diet.

Bacillus coagulans;Bacillus subtilis;weaned piglet;growth performance

S816.7；S828

A

1001-0084（2017）11-0008-05

2017-09-10

云南省省院省校科技合作专项（2015IB011）；昆明三正生物科技（集团）有限公司云南省创新型企业试点项目、昆明市科技计划项目（昆科计字：2013-02-06-A-G-02-3053）

王志祥（1965-），男，云南禄劝人，高级畜牧师，主要从事畜牧学研究。

*

E-mail:chengzb99@163.com。