ER、PR、C-erbB-2、nm 23在67例乳腺癌中的表达及与临床病理的关系

李春成，谢月英，周旭丽，刘伟

（湘潭市妇幼保健院病理科，湖南 湘潭 411101）

ER、PR、C-erbB-2、nm 23在67例乳腺癌中的表达及与临床病理的关系

李春成，谢月英，周旭丽，刘伟

（湘潭市妇幼保健院病理科，湖南 湘潭 411101）

目的 探讨雌激素受体（estrogen receptor,ER）、孕激素受体（progesterone receptor,PR)、C-erbB-2、nm 23在乳腺癌中的表达情况及其与临床病理的关系。方法 采用免疫组化染色法检测ER、PR、C-erbB-2、nm 23在67例乳腺癌中的表达情况，然后进行统计学分析。结果 67例乳腺癌中，ER、PR、C-erbB-2、nm 23阳性率分别为61.2%（41/67），43.3%（33/67），61.2%（41/67），58.2%（39/67），各免疫指标阳性率表达均有显著统计学意义（P＜0.01）；它们的表达与淋巴结转移明显相关（P＜0.01），与患者年龄、临床分期无关（P＞0.05），C-erbB-2在乳腺癌中的表达与肿块大小明显相关（P＜0.05），ER、PR、nm 23在乳腺癌中的表达与肿块大小无关（P＞0.05）；ER、PR与C-erbB-2、nm 23在乳腺癌中的表达具有明显相关性（P＜0.001）。结论 联合检测ER、PR、C-erbB-2与nm 23指标对乳腺癌的治疗和预后判断具有重大临床指导意义。

乳腺癌；ER；PR；C-erbB-2；nm 23

乳腺癌是女性中最常见的恶性肿瘤之一，发病率明显上升，全球每年有120～140万新增乳腺癌病例，每年有50万左右的患者死于该病，严重威胁着女性生殖健康[1-2]。乳腺癌的发生是多阶段多因素影响发展而来的，起始于普通导管上皮增生，逐渐进展为导管原位癌、浸润癌，最后发展为转移。鉴于乳腺癌临床发展的不稳定性，确定乳腺癌的肿瘤标记物对临床治疗、临床分期、诊断以及复发和转移、预后的监测是非常重要的[3]。ER、PR、C-erbB-2、nm 23等标记物已经应用于临床实践中。复习相关文献[4-5]，发现它们在乳腺癌中的表达有所差异。虽然，以上生物分子标记物已分别在相关研究有所报道，但本研究通过联合检测以上标记物，分析其在乳腺癌的表达意义。因此，本研究通过收集湘潭市妇幼保健院病理科67例乳腺癌病例，采用免疫组化法联合检测ER、PR、C-erbB-2、nm 23肿瘤标记物在乳腺癌中的表达情况，统计学分析它们与临床病理特征的关系，目的在于探讨ER、PR、C-erbB-2和nm 23在乳腺癌发生、发展及靶向治疗与预后的临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集2015年9月～2017年3月在湘潭市妇幼保健院乳腺外科手术切除的乳腺癌病理资料67例，所有病例均为女性，年龄22～65岁，中位年龄42岁；所有病例均为I～Ⅲ期可手术切除的患者，均经病理诊断确诊，且在术前均未接受过放、化疗及内分泌治疗。

1.2 检测方法

1.2.1 试剂 ER、PR、C-erbB-2、nm 23受体相应的单克隆抗体购置北中杉金桥生物技术有限公司，DAB显色液、免疫组化试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司,乙醇PBS缓冲液,二甲苯等其他试剂购于丽欣生物有限公司。

1.2.2 S-P免疫染色法 石蜡标本连续4 μm切片，贴附于载玻片后烤片。常规脱蜡，高温修复抗原。按照免疫组化试剂盒操作步骤逐步进行。以PBS代替一抗作为阴性对照，癌灶旁正常乳腺组织作为阳性内对照。

1.2.3 结果判读 ER、PR阳性表达于胞核，呈棕黄色；nm 23表达于胞质。判断标准采用阳性细胞比例评定结果，阳性细胞数＜10%为阴性（-），10%～25%为弱阳性（+），26%～50%为阳性（++），＞50%为强阳性（+++）。阳性细胞数≥10%为阳性病例。C-erbB-2阳性判定根据肿瘤细胞膜着色强度和比例来确定，肿瘤细胞无着色为0分；任何比例的肿瘤细胞显示弱的不完整的细胞膜着色或＜10%的肿瘤细胞显示弱的完整的细胞膜着色为1分；≥10%的肿瘤细胞显示弱的或中度完整细胞膜着色，或＜30%的肿瘤细胞显示一致的强的完整的细胞膜着色为2分；≥30%的肿瘤细胞显示一致的强的完整的细胞膜着色为3分。

1.3 统计学方法 采用SPSS 17.0统计软件进行结果分析，计数资料采用c2检验,P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ER、PR、C-erbB-2、nm 23在乳腺癌中的表达情况 67例乳腺癌中，ER、PR、C-erbB-2、nm 23阳性表达情况明显不同。ER总阳性率为61.2%（41/67），PR总阳性率为43.3%（33/67），C-erbB-2总阳性率为 61.2%（41/67），nm 23总阳性率为58.2%（39/67）。各免疫指标阳性率表达均有显著统计学意义（P＜0.01），见图1，表1。

图1 癌组HEA、ERB、PRC、C-erbB-2D、nm 23E在乳腺癌中的阳性表达SPX20Figure 1 Positive expression of cancer group HEA,ERB,PRC,C-erbB-2D,nm 23E in breast cancer SP X20

表1 ER、PR、C-erbB-2、nm 23在乳腺癌中的表达情况Table 1 Expression of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 in breast cancer

2.2 ER、PR、C-erbB-2、nm 23在乳腺癌中的表达与临床病理特征的关系 在67例乳腺癌中的表达与淋巴结转移明显相关（P＜0.01），与患者年龄、临床分期无关（P＞0.05），C-erbB-2在乳腺癌中的表达与肿块大小明显相关，ER、PR、nm 23在乳腺癌中的表达与肿块大小无关（P＞0.05）。在淋巴结阳性转移病例中，ER、PR阳性表达率偏低，分别为22.6%（12/53）、24.5%（13/53），C-erbB-2明显呈高表达，C-erbB-2和 nm 23 阳性表达率分别为 54.7（29/53）、17%（9/53）（P＜0.01），见表2。

表2 ER、PR、C-erbB-2、nm 23在乳腺癌中的表达与临床病理特征的关系Table 2 Expression of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 in breast cancer and its relation with clinical pathology

2.3 ER、PR与C-erbB-2、nm 23相关性分析 ER、PR与C-erbB-2、nm 23在乳腺癌中的表达具有明显相关性（P＜0.001），见表3。

表3 ER、PR与C-erbB-2、nm 23相关性分析Table 3 Correlation analysis of between ER,PR and C-erbB-2,nm 23

3 讨论

乳腺癌是一组复杂和异质性的肿瘤，生物学行为相差大，其发生、发展与预后受多种因素影响[5]。Sotiriou和Pusztai指出基因表达模型研究结果改变了乳腺癌的观点,为乳腺癌提供了一种分子诊断新工具。譬如，ER、PR、C-erbB-2、nm 23等已经作为监测乳腺癌高风险和选择有效治疗的一种有效肿瘤标记物[6]。在这研究背景下，在乳腺癌靶向治疗和预后监测中，建立一种稳定、有效的肿瘤标记物是非常有临床价值意义。

乳腺癌是一种激素依赖性肿瘤，其生长、发育和细胞增殖均受ER、PR激素受体的影响[7]。ER和PR阳性表达率目前被临床作为激素治疗的真标准，广泛应用于乳腺癌的分子诊断、后续外科治疗、化疗和放疗中[8]。PR表达被认为是ER功能和乳腺癌预后的一个生物标记，同时PR也是调节ER功能的相关蛋白[9]。单独ER阳性对内分泌治疗反应占55%，ER、PR同时阳性对内分泌治疗反应占75%～80%。当乳腺组织细胞发生癌变时，ER、PR可能丢失也可能保留，若ER、PR丢失，肿瘤生长增殖不受内分泌调控，其内分泌治疗的有效率也不足10%[10]。已有研究结果提示浸润性乳腺癌阶段PR的阳性率约在50%～70%，基本上与ER接近[11]，郭少峰等报道ER、PR阳性表达率分别为58.1%、49.5%[12]。本组研究数据显示，ER、PR阳性表达率分别为61.2%，43.3%，两者表达率比较接近。此外，本研究在分析ER与PR相关性中，统计结果显示ER表达与PR表达呈正相关，以上事实都证实了ER、PR的表达具有协同性特点，而不是独立的乳腺癌疗效和预后因素，这也解释了在乳腺癌内分泌治疗中，临床为何要同时参考ER和PR在肿瘤的表达情况。总之，ER与PR可以作为乳腺癌诊断和治疗的一种肿瘤标记物，其阳性表达率越高，内分泌治疗效果可能越好。

C-erbB-2是EGFR家族成员之一，又称neu基因，位于染色体17q21。在15%～35%浸润性乳腺癌中，发现C-erbB-2的高表达，它的异常表达明显增加乳腺癌转移的风险，降低乳腺癌患者的生存率[13]。被认为是预后不良的一个肿瘤标记物，它的过表达与肿瘤细胞的侵袭性、抗激素治疗、细胞毒性疗法以及总体低生存率明显相关[14]。nm 23是由美国国立癌症研究所steeg等分离出的一种被认为与肿瘤转移抑制相关的基因。其蛋白表达水平与肿瘤的浸润转移能力有关，高表达者具有低转移性[15]。绝大多数学者认为，nm 23的表达率与腋窝淋巴结转移、肿瘤的复发呈负相关[16]。本研究中，分析C-erbB-2与nm 23两者相关性，结果显示两者关系明显呈负相关。同时，在淋巴结阳性转移中，C-erbB-2表达明显升高，nm 23的表达明显降低。此外，C-erbB-2的高表达还与乳腺癌肿块的增大呈正相关，以上结果均显示C-erbB-2有促进肿瘤转移的潜能，以及nm 23抑制乳腺癌的转移的生物活性。因此，C-erbB-2和nm 23可以作为乳腺癌转移和预后监测的一种有效肿瘤标记物。

有学者认为激素受体的表达情况决定了患者对内分泌治疗的反应性，是治疗方案选择的一个决定因素[17]。但也有研究报道，ER表达阳性的乳腺癌中，仍有40%的患者对内分泌治疗无效[18]。多数学者认为这可能与其它肿瘤基因表达相关,比如，C-erbB-2癌基因的过表达，nm 23抑癌基因的表达降低,从而导致肿瘤细胞的运动能力增强，促进肿瘤的侵袭和转移[19-20]。本研究结果显示，C-erbB-2、nm 23与ER、PR表达具有一致性。在淋巴结阳性转移病例中，ER、PR阳性表达率偏低，分别为 22.6%（12/53）、24.5%（13/53），C-erbB-2明显呈高表达，C-erbB-2和nm 23阳性表达率分别为54.7（29/53）、17%（9/53）。以上数据也说明了乳腺癌的发生发展及治疗受多种因素影响。因此，联合检测ER、PR、C-erbB-2与nm 23指标对指导乳腺癌的治疗以及转移和预后的监测具有重大临床意义。但本研究有待更深入探讨以上标记物与其它预后指标进行比较分析，以及从蛋白、基因表达水平上探讨其在乳腺癌和癌前病变中表达差异，更全面揭示乳腺癌的治疗和预后相关因素，从而使乳腺癌患者受益最大化。

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Expression of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 in 67 breast cancer and its relation with clinical pathology

Li Chun-cheng,Xie Yue-ying,Zhou Xu-li,Liu Wei
(Department of Pathology of Maternal and Child Health Hospital of XiangTan,XiangTan,Hunan,411101,China)

Objective To investigate expression information of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 in breast cancer and its relation with clinical pathology.Methods Using immunohistochenmical assay,the expression information of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 in breast cancer were detected.The correlation between expression information of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 and clinicopathological characteristics were retro-spectively analyzed.Results In the 67 breast cancer,the positive rates of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 were 61.2%(41/67),43.3%(33/67),61.2%(41/67),58.2%(39/67),which positive rates were striking statistical significance(P＜0.01).Their expression were correlated with lymph nodes metastasis(P＜0.01)and had nothing to do with age and clinical stage of patient(P＞0.05),Lump size was obviously correlated with expression of C-erbB-2(P＜0.05)and incorrelated with expression of ER,PR,nm 23 in breastcancer(P＞0.05).Expression between ER,PR and C-erbB-2,nm 23 were significantly correlated(P＜0.001).Conclusion Combined detection of ER,PR,C-erbB-2,nm 23 was importantly clinical guidance significance with treatment and prognosis of breast cancer.

Breast cancer;ER;PR;C-erbB-2;nm 23

10.3969/j.issn.1009-4393.2017.33.002

李春成，E-mail:493423161@qq.com