临床病理技术在胸腔积液细胞块中的应用探讨

2017-11-20郑样贞

中外医学研究 2017年24期

郑样贞

【摘要】目的：分析探讨临床病理技术在胸腔积液细胞块中的应用效果。方法：随机抽取2015年10月-2016年10月在笔者所在医院治疗胸腔积液的患者92例进行研究，随机平均分为观察组与对照组各46例，对照组的患者使用常规细胞涂片方法进行检测，观察组的患者使用细胞块免疫组化法进行检测，比较两种检测方法的临床诊断效果。结果：观察组胸腔积液阳性率显著高于对照组（P<0.05）。腺癌细胞与间皮性肿瘤细胞中CK7、CEA、TTF-1抗体、CK5/6、WT-1、Calretinin抗体的表达情况比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：临床病理技术能为胸腔积液诊断提供有力的依据，检测指标中CK7、CEA和TTF-1抗体在腺癌中具有显著的特异性，CK5/6、WT-1以及Calretinin抗体在间皮性肿瘤细胞中具有显著的特异性，使用细胞块免疫组化法检测可以有效鉴别区分肺腺癌与和间皮癌，值得推广。

【关键词】临床病理技术；胸腔积液细胞块；细胞块免疫组化法

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.24.027 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2017）24-0052-02

胸腔积液又叫胸水，主要是指胸膜腔内的浆液不正常地积聚到一起的一种临床综合征[1]。胸腔积液的诱因主要是感染性疾病、循环系统疾病以及肿瘤等，肿瘤类型主要是非小细胞肺癌、肺腺癌和恶性间皮癌，必须尽早进行诊断和治疗。临床上常用临床病理技术对胸腔积液进行诊断，常用的诊断方式是细胞涂片，其诊断敏感度可达到78%，但对转移性癌和原发性间皮肿瘤的灵敏度较低，容易出现漏诊和误诊的情况，影响治疗和预后[2]。随着我国医疗技术的发展，细胞块切片与免疫组化染色法被广泛应用于各种疾病的病理诊断中，让诊断准确率大大提升，为疾病的治疗提供更科学的依据。本研究主要选择在笔者所在医院治疗胸腔积液的患者92例进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

抽取2015年10月-2016年10月在笔者所在医院治疗胸腔积液的患者92例，抽取的患者均自愿参与研究，病情症状均符合相关文献对于胸腔积液的诊断标准，癌细胞均确诊为阳性，随机平均分为观察组与对照组，各46例，观察组中男25例，女21例，年龄14～75岁，平均（41.3±5.7）岁。对照组中男24例，女22例，年龄13～76岁，平均（40.4±5.3）岁。两组患者的年龄、性别、病情等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），有可比性。

1.2 检测方法

对照组的患者使用常规细胞涂片方法进行检测，于早晨采集所有患者新鲜胸腔积液约50 ml，置于4～5个试管实施离心操作，转速设置3000 r/min，离心时间设置为10～15 min。离心完毕后使用移液枪吸出上清液，取沉淀物涂片。取其中的沉渣部分用显微镜试镜纸包裹分离，随后固定在10%的中性福尔马林中。固定时间不少于30 min，放入脱水机中脱水，采用石蜡包埋法包埋，至形成细胞块后连续切片，厚度在3～4 ?m，最后以HE染色[3]。观察组的患者使用细胞块免疫组化法进行检测，DAB显色试剂盒等均购于武汉博士德生物工程有限公司，CK7、CEA以及WT-1等抗体均购于武汉博欧特生物科技有限公司，染色方法按照试剂盒说明书进行。

1.3 评价指标及判定标准

根据两种检测方法的阳性率检出结果对其诊断价值进行分析，阳性判定标准：（1）CK7、CEA和CK5/6在胞浆或是胞浆胞膜中同时有棕黄色出现。（2）TTF-1、WT-1的细胞核中有棕黄色出现。（3）Calretinin在细胞浆、胞浆胞膜以及细胞核中出现黄色颗粒。（4）间皮细胞或腺癌细胞的数量占据总量的10%以上[4]。

1.4 统计学处理

本文选用软件版本SPSS 13.0对数据进行分析，计量资料用（x±s）表示，比较用t检验，计数资料以率（%）表示，比较用字2检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者胸腔积液检测结果比较

观察组癌细胞检测结果呈阳性的患者有46例，阳性率达到100%；对照组检测结果呈阳性的患者有30例，阳性率为65.22%，观察组检测阳性率明显高于对照组（P<0.05），见表1。

2.2 不同抗体在腺癌细胞和间皮细胞中的表达情况比较

观察组46例患者中，共26例患者確诊为腺癌，20例患者确诊为间皮癌，两种癌细胞中CK7、CEA、TTF-1抗体、CK5/6、WT-1、Calretinin抗体的表达情况比较，差异均有统计学意义（P<0.05），见表2。

3 讨论

胸腔积液是肺部多种疾病的常见并发症，其中以恶性胸膜间皮瘤、非小细胞肺癌以及转移性腺癌等为主，肺腺癌最为多见。胸腔积液是验证疾病病因，判断其良恶性的重要媒介[5-6]。临床研究指出，大约有20%左右的胸腔积液是由恶性肿瘤引起的，而这其中大约有50%又为原发癌；而大约有30%左右的肺癌患者其最初的临床表现就是胸腔积液，因此对胸腔积液进行准确的检测具有重要的临床意义。胸腔积液一般采用临床病理诊断技术进行检测，病理诊断主要是指取肿瘤标本进行固定染色，然后在显微镜观察标本，以此诊断疾病。虽然目前影像学诊断技术飞速发展，但病理诊断技术仍然广泛应用于各种疾病诊断中[7-8]。本研究采用两种病理诊断法对胸腔积液进行诊断，常规细胞涂片法操作简单，能够维持细胞的形态特点，但由于原发性间皮性肿瘤与转移性癌细胞的细胞形态差别不明显，因此，当胸腔积液内的癌细胞异型性不明显或者是癌细胞数量较少的情况下，采取该方式进行检测就会出现与反应性间皮细胞相混淆的现象，导致临床上常常会出现对于一些高度怀疑为肺癌性胸腔积水的患者，经过反复的细胞学检测之后，且结果却仍然呈阴性，导致细胞涂片诊断的灵敏性较差。细胞块免疫组化法则可以利用具有特异性的抗体来检测细胞内部的未知抗原，还可以根据酶的着色反应来判断细胞的活性和分布情况[9-11]。细胞块免疫组化法还可以将细胞块保存起来，方便连续切片以进行多项检查。细胞块免疫组化法操作简单易于掌握，敏感度比常规涂片法更强，阳性检出率可达到理想标准。这主要是由于细胞块切片质量要远远高于细胞涂片，细胞块的分布十分均匀，并且能够很好地保持脱落细胞的原有形态结构；而细胞涂片则在实际操作中存在分布不均匀，重叠存在的情况较多，导致细胞的原有形态和结构比较模糊[12]。endprint

本研究结果显示，经过检测后，观察组患者胸腔积液阳性率为100%，对照组患者阳性率为65.22%，观察组显著高于对照组（P<0.05）。检测指标中CK7、CEA和TTF-1抗体在腺癌中具有显著的特异性，CK5/6、WT-1以及Calretinin抗体在间皮性肿瘤细胞中具有显著的特异性。

笔者在多年的临床实际操作中，通过对实践的总结分析，认为在应用细胞块免疫组化法对胸腔积液实施检测的过程中，需注意以下两点，方可有效提高，其一是采取3000 r/min的速度进行离心，大量的实践表明，这一离心速度能够收集制备数量丰富的细胞，且分布均匀，可使细胞保持最佳的结构形态；其二是细胞切片的厚度宜保持在4～5 ?m最佳，这个厚度的细胞不仅分布均匀，且能够很好地避免假阳性的出现。

临床病理技术能为胸腔积液诊断提供有力的依据，使用细胞块免疫组化法检测可以有效鉴别区分肺腺癌与间皮癌，值得推广。

参考文献

[1]高雪梅.细胞块切片免疫组化染色在胸腔积液病理诊断中的应用价值[EB/OL].临床医药文献电子杂志，2016，3（49）：9824.

[2]罗丽花，张婉仪，刘惠娟，等.细胞块联合免疫组化在胸腔积液诊断中的应用[J].临床与实验病理学杂志，2015，15（8）：904-907.

[3]杨红敏，李振芬.细胞块切片免疫组化染色在胸腔积液病理诊断中的应用价值[J].中外医疗，2014，33（1）：179，181.

[4]余卫东，蔡育波，刘琼茹，等.细胞块切片免疫组化染色在胸腔积液病理诊断中的应用[J].中国现代医生，2014，52（12）：127-129.

[5]唐应成，梁利斌，杨瑞仙，等.胸腔积液细胞块免疫组化染色的病理诊断价值[J].第三军医大学学报，2012，34（15）：1568-1571.

[6]尚士宣，赵晓丹，肖月英.细胞块切片免疫组化染色在肿瘤细胞学诊断中的应用[J].肿瘤基础与临床，2010，23（6）：514-515.

[7]郭以河，张闽峰，孟加榕，等.TTF-1，CK7在胸水细胞块中鉴别肺腺癌诊断的应用[J].临床肺科杂志，2010，15（12）：1713-1714.

[8]蘇学英，李甘地，唐应成.MOC-31在浆膜腔积液转移性腺癌、间皮瘤和增生间皮细胞中表达的检测价值[J].四川大学学报：医学版，2005，36（5）：734-735.

[9]谢深科，舒千玉，姚军.细胞块免疫标记在胸腹水细胞病理诊断与鉴别诊断中的价值[J].中国医疗前沿，2011，6（4）：73-74.

[10]熊盛道.白细胞介素-18和腺苷脱氨酶联合检测鉴别结核性与恶性胸腔积液的价值[J].中华结核和呼吸杂志，2007，30（10）：799-780.