食管鳞癌组织中P53、Caspase-3蛋白的表达及其临床意义

冯怡锟(郑州大学第二附属医院病理科，河南 郑州 450014)

食管鳞癌组织中P53、Caspase-3蛋白的表达及其临床意义

冯怡锟
(郑州大学第二附属医院病理科，河南 郑州 450014)

目的探讨P53、Caspase-3在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化S-P法检测80例食管鳞癌组织及其癌旁正常食管黏膜组织中P53、Caspase-3蛋白表达。结果食管鳞癌组织中P53蛋白阳性表达率为75.00%(60/80)，明显高于癌旁正常食管黏膜组织的12.50%(10/80)，比较差异有统计学意义(P<0.05)。食管鳞癌组织中Caspase-3蛋白阳性表达率为40.00%(32/80)，明显低于癌旁正常食管黏膜组织的91.25%(73/80)，比较差异有统计学意义(P<0.05)。P53蛋白的阳性表达率与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移均有关(P均<0.05)，Caspase-3蛋白的阳性表达率与肿瘤分化程度、淋巴结转移均有关(P均<0.05)。结论P53的高表达及Caspase-3蛋白的低表达与食管鳞癌发生、发展有关，两者异常表达可能与食管癌的发生、发展关系密切，两者的联合检测可能在食管鳞癌的诊断中具有重要价值。

食管鳞癌；P53；Caspase-3；免疫组化；原位杂交

食管癌是我国高发的消化系统恶性肿瘤之一，其在河南地区的发病率居全国前列，且有逐年增加的趋势，食管癌治疗的关键是早诊早治，因此，探讨临床可以推广应用的创伤轻、方法简单且费用较低的确诊食管癌的检测手段一直是目前关于食管癌临床诊断的热点问题。P53是在多种肿瘤组织中均可发现的抑癌基因，现已被证实在多种肿瘤的发生、发展中发挥重要作用，也已经被用于多种肿瘤的定期检查[1]。Caspase-3是Caspase家族中被研究较多，且功能较为广泛的一种成员[2]。本研究采用免疫组化S-P法检测80例食管鳞癌组织及其癌旁正常食管黏膜组织中P53、Caspase-3蛋白的表达，探讨两者的具体表达情况及其与食管癌临床病理学参数之间的关系，并分析两者在食管鳞癌发生、发展中的具体作用。

1 材料与方法

1.1材料入组郑州大学第二附属医院病理科2017年1月至2016年6月收集的手术切除的食管鳞癌组织及其癌旁正常食管黏膜组织(手术切缘/距癌组织边缘4 cm以外的组织)标本80对，所有80例入组食管鳞癌患者术前均未接受过放疗、化疗、靶向治疗、免疫治疗等治疗，临床数据完整，并由2名高年资病理科医生复审病理切片证实为食管鳞癌。手术切除标本取出后均经质量分数4%多聚甲醛固定，经常规脱水、石蜡包埋等制成石蜡块，并进行5 μm的连续切片。80例食管鳞癌患者中，男53例，女27例；年龄29～73岁，中位年龄56岁，其中≥60岁者30例，<60岁者50例；肿瘤浸润程度：浸润到黏膜下层或浅肌层者23例，浸润到深肌层者26例，浸润至全层或外膜者31例；有淋巴结转移者47例，无淋巴结转移者33例。

1.2主要药品与试剂P53、Caspase-3蛋白鼠抗人多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司，S-P免疫组化试剂盒及显色试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.3免疫组化步骤按照S-P免疫组化试剂盒说明进行各组织的免疫组化染色，并经高压抗原修复，DAB显色,苏木素复染等程序后，进行结果判定，其中采用已知阳性切片作阳性对照；用PBS代替一抗作阴性对照。

1.4免疫组化结果判断P53阳性产物定位于细胞核，而Caspase-3阳性产物定位于细胞质，阳性染色均为黄色或棕黄色，根据组织标本中阳性细胞百分比以及其染色程度来进行综合判定。每张切片随机选取10个高倍镜视野，分别计数100个细胞，阳性细胞计数：≤10%为0分，>10%～25%为1分，>25%～50%为2分，>50%～100%为3分。阳性细胞染色程度：无色为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，黄褐色为3分。两者乘积作为该切片的积分，≤2分为阴性，>2分为阳性。

1.5统计学处理采用SPSS 17.0处理实验数据，P53、Caspase-3蛋白等阳性表达率的比较采用χ2检验，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1P53、Caspase-3蛋白在不同食管组织中的表达食管鳞癌组织中P53蛋白阳性表达率为75.00%(60/80)，明显高于癌旁正常食管黏膜组织的12.5%(10/80)，比较差异有统计学意义(P<0.05)。食管鳞癌组织中Caspase-3蛋白阳性表达率为40.00%(32/80)，明显低于癌旁正常食管黏膜组织的91.25%(73/80)，比较差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2P53、Caspase-3蛋白的表达与食管鳞癌患者临床病理参数的关系P53蛋白的阳性表达率与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移均有关(P均<0.05)，Caspase-3蛋白的阳性表达率与肿瘤分化程度、淋巴结转移均有关(P均<0.05)。见表1、2。

表1 P53蛋白的表达与食管鳞癌患者临床病理参数的关系

3 讨论

目前，食管癌的治疗，早期以手术切除为主，而晚期患者大多因周围严重浸润或淋巴结转移而丧失了手术机会，使得预后较差，生存期也明显缩短。因此，食管癌的早期诊断是非常重要的，而食管癌的活检确诊主要依靠病理切片，免疫组化的确诊意义非常重要。P53在多种肿瘤组织中均存在高表达，且已被证实与肿瘤的发生、发展关系密切，而且P53的检测也可用于多种肿瘤的预后和生存状况评估[3-4]。Caspase-3是Caspase家族中外界刺激因素启动细胞凋亡的关键因子，是细胞凋亡程序的主要执行者，是细胞凋亡蛋白酶级联反应的关键步骤[5-6]。食管鳞癌组织中P53蛋白阳性表达率为75.00%(60/80)，明显高于癌旁正常食管黏膜组织的12.50%(10/80)，比较差异有统计学意义(P<0.05)。食管鳞癌组织中Caspase-3蛋白阳性表达率为40.00%(32/80)，明显低于癌旁正常食管黏膜组织的91.25%(73/80)，比较差异有统计学意义(P<0.05)。P53蛋白的阳性表达率与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移均有关(P均<0.05)，Caspase-3蛋白的阳性表达率与肿瘤分化程度、淋巴结转移均有关(P均<0.05)。综上所述，P53的高表达及Caspase-3蛋白的低表达与食管鳞癌发生、发展有关，两者异常表达可能与食管癌的发生、发展关系密切，两者的联合检测可能在食管鳞癌的诊断中具有重要价值。

表2 Caspase-3蛋白的表达与食管鳞癌患者临床病理参数的关系

[1] 宋慧琴，李道明，金家岩.乳腺癌组织中HPA 蛋白的表达及其与ER、PR、HER-2、P53表达的相关性[J].肿瘤基础与临床,2016,29(1):15-17.

[2] 南振华，潘灵辉.吗啡对人食管癌细胞Ec109生长及p53、Caspase-3基因表达的影响[J].中国癌症防治杂志,2016,8(2):73-77.

[3] 李铁志，石彦涛，高少林, 等.VEGF、P53 的表达与食管癌临床特征及预后的关系[J].河北医药,2017,39(12):1833-1835.

[4] 杜兰宁，王丽娜，李淑萍.p53 和Bcl-2在食管鳞癌组织中的表达及与放化疗疗效的关系[J].兰州大学学报(医学版),2016,42(4):43-46.

[5] 马玉静,李道明, 朱俊兴,等.HIF-1α、Caspase-3、Survivin蛋白在食管鳞癌组织中的表达及相关性分析[J].肿瘤基础与临床,2008,21(2):96-98.

[6] 周正斌，周瑞，黄震，等.生存素和Caspase-3蛋白在食管癌前病变及癌组织中的表达及意义[J].江苏大学学报(医学版), 2014, 24(4): 342-345.

ExpressionsandSignficanceofP53andCaspase-3intheEsophagealSquamousCarcinomaTissues

FENG Yikun
(DepartmentofPathology,theSecondAffiliatedHospital,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450014,China)

ObjectiveTo investigate the expressions and clinical significances of P53 and Caspase-3 protein and mRNA in the esophageal squamous cell carcinoma tissues.MethodsThe expressions of P53 and Caspase-3 protein in the 80 cases of esophageal squamous cell carcinoma tissues and 80 cases of adjacent normal tissues were detected by immunohistochemistry.ResultsThe positive expression rate of P53 protein in the esophageal squamous carcinoma tissues was significantly higher than that of the adjacent normal tissues [(75.00%(60/80)vs12.50%(10/80),P<0.05].The positive expression rate of Caspase-3 protein in the esophageal squamous carcinoma tissues was significantly higher than that of the adjacent normal tissues [40.00%(32/80)vs91.25%(73/80),P<0.05].The P53 protein expression was associated with tumor differentiated degree, infiltration depth and lymph node metastasis (P<0.05); the Caspase-3 protein expression was associated with tumor differentiated degree and lymph node metastasis (P<0.05).ConclusionThe P53 high expression and Caspase-3 low expression may be related to the occurrence and development of esophageal squamous carcinoma.

esophageal squamous cell carcinoma; P53; Caspase-3; immunohistochemistry

冯怡锟(1983-)，女，硕士，主要从事肿瘤病理学相关研究。E-mail:13783566437@163.com

10.3969/j.issn.1673-5412.2017.05.005

R735.1；R730.23

A

1673-5412(2017)05-0382-03

2016-10-13)