新型生物农药棘孢木霉菌防治辣椒疫病应用研究

徐沛东，朱植银，黄加诚，肖永良，谢远芳，魏方林



新型生物农药棘孢木霉菌防治辣椒疫病应用研究

徐沛东1,2，朱植银1，黄加诚1，肖永良2，谢远芳2，魏方林2

(1. 江西劲农化工有限公司，江西九江 332500；2. 江西省农药工程技术研究中心，江西南昌 330096）

通过室内盆栽试验和大田试验验证3亿CFU/g棘孢木霉菌WP对辣椒疫病的防控效果。盆栽试验结果：3亿CFU/g棘孢木霉菌WP用量2 000倍液、3 000倍液灌根处理防治辣椒疫病，药后7~21 d防效分别为91%~100%、87%~93%，同类竞品3亿CFU/g哈茨木霉菌制剂2 000倍液防效80%~93%。大田试验结果：药后15 d、30 d，3亿CFU/g棘孢木霉菌WP灌根施药的防效均显著高于喷雾施药，相同用药方式下3亿CFU/g棘孢木霉菌WP用量2 000倍液防效（97%、89%）高于3亿CFU/g哈茨木霉菌WP 2 000倍液的防效（91%、85%），3亿CFU/g哈茨木霉菌WP灌根处理药后30 d的防效高于化学药剂烯酰吗啉效果（90%），表明该生物药剂持效期较长。

生物农药；棘孢木霉菌；辣椒疫病；防效

辣椒疫病是由辣椒疫霉菌（L.）引起的，它是世界范围内的一种毁灭性病害[1]。辣椒疫病在辣椒的整个生育期均可发生，根、茎、叶、果实均可发病，发病周期短、传播速度快，是造成辣椒严重减产的重要土传性病害[2]。疫病高发期，3~5 d即可造成辣椒全株死亡，发生严重的田块死秧率达30%以上，甚至全田死亡，极大的损害了农民的收益[3]。目前，辣椒疫病的防治主要采用种植抗病品种和化学防治等方法。化学防治是控制辣椒疫霉菌的重要技术，且见效最快。但是，化学杀菌剂的大量使用严重影响了环境安全和食品安全。同时，辣椒疫霉菌对化学杀菌剂的抗性发展迅速[4]。因此，生物防治已经慢慢发展成为防治辣椒疫病的重要措施。

木霉菌（spp.）是一类被研究和应用较早的生防菌。木霉菌可以有效防治子囊菌、担子菌、卵菌纲等多种植物真菌，例如齐整核菌() ,腐霉菌(spp)、立枯丝核菌()、镰刀菌(spp.)等病原菌引起的瓜类枯萎病、水稻纹枯病、棉花立枯病、辣椒的白绢病以及番茄的碎倒病等植物病害[5]。目前木霉菌类形成商品且销售最多的是哈茨木霉菌（），产品商标为美国“拜沃”[4]。据报道，棘孢木霉菌（）对辣椒疫病有很高的拮抗作用，可以通过重寄生、代谢产物抑制孢子囊产生和游动孢子释放来抑制疫霉菌活性，达到防控辣椒疫病的目的[6-7]。目前，棘孢木霉菌在国内尚未形成正规产品。笔者开展本次试验，旨在研究3亿CFU/g棘孢木霉菌WP对辣椒疫病的防治效果及其应用技术，为辣椒疫病的生物防治提供新的优秀产品。

1 材料与方法

1.1 室内盆栽试验

1.1.1 供试药剂、菌种及作物 辣椒疫霉由浙江农林大学农业与食品科学院惠赠；供试药剂3亿CFU/g棘孢木霉菌WP，由江西正邦生物化工有限责任公司研究所配制[8]，对照药剂3亿CFU/g哈茨木霉菌WP（美国“拜沃”）和50%烯酰吗啉WG为市购；供试辣椒市购幼苗，品种为常规感病品种“新育22号尖椒”。

1.1.2 试验设计 试验设4个药剂处理，1个清水对照，每个处理做4次重复，小区面积8棵辣椒/盆。具体处理，处理1-5分别为：3亿CFU/g棘孢木霉菌WP 3 000倍液、3亿CFU/g棘孢木霉菌WP 2 000倍液、3亿CFU/g哈茨木霉菌WP 2 000倍液、50%烯酰吗啉WG 1 500倍液、清水对照，施药方法每株灌根50 mL药液。

1.1.3 接种体制备 辣椒疫霉菌接种到V8培养基[9]上放置在人工气候培养箱内，25 ℃黑暗培养3 d，光照培养3 d，产生孢子囊后用无菌水冲洗平板，将孢子囊液放置4 ℃、30 min诱导游动孢子产生，无菌水稀释孢子液至1×105个/mL，待用[10]。

1.1.4 盆栽试验方法及病情调查 2016年4月20日将购买的辣椒苗栽种在36 cm×58 cm的盆栽盆内，8棵苗/盆，本次试验栽种40盆。5月1日根据试验设计进行施药。5 d后在辣椒主根处接种辣椒疫霉菌，每株接种1×105个/mL游动孢子悬浮液3 mL[11]。接种辣椒疫霉菌后7 d、14 d、21 d调查辣椒疫病的病情指数，分级标准如下[5]：0级，无病；1级，仅有1~2片叶片萎蔫或水浸状；3级，50%以下的叶片萎蔫，或1~2片叶萎蔫但茎变黑褐色而不溢缩；5级，50%以上的叶片全萎蔫，或茎基部变色乃至轻微溢缩但不倒伏；7级，叶片全萎蔫，茎基部褐变，溢缩而直立或倒伏而不枯死；9级，植株枯死而呈细线状。药效计算方法：病情指数/%=∑(各级病株数×相对级值)/(调查总株数×9)×100；防效/%=(空白对照区病指-处理区病指)/(空白对照区病指)×100。

1.2 田间药效试验

1.2.1 试验材料及环境 试验安排在江西省南昌县武阳镇蔬菜基地的塑料大棚进行。试验地为辣椒疫病常发田块。2016年5月6日进行移植，移栽时辣椒苗龄50 d，667 m2移栽3 000棵。各试验小区的土壤类型、栽培条件及水肥管理等均匀一致。

1.2.2 试验方法 辣椒定植后15 d进行施药处理，试验设7个药剂处理，1个清水对照，每个处理作4次重复，小区面积25 m2，小区随机排列。具体处理如下[12]，处理1-4分别为：3亿CFU/g棘孢木霉菌WP 3 000倍液、3亿CFU/g棘孢木霉菌WP 2 000倍液、3亿CFU/g哈茨木霉菌WP 2 000倍液、50%烯酰吗啉WG 1 500倍液，进行灌根处理，每株灌窝200 mL；处理5-7分别为：3亿CFU/g棘孢木霉菌WP 600倍液、3亿CFU/g棘孢木霉菌WP 300倍液、50%烯酰吗啉WG 800液，进行茎叶喷雾。药后15 d、30 d对各个小区辣椒疫病的发生情况进行调查，并计算病情指数和防效。

1.2.3 田间试验调查及计算方法 调查方法参照农药药效试验准则[13]。小区内随机选取5点，每点调查5株辣椒，记录病株数、死株数或明显枯萎的植株数。分级方法（按症状类型分级）：0级为健康无病；1级为地上部仅叶果有病斑；3级为地上茎枝有褐腐斑；5级为茎基部有褐腐斑；7级为地上茎、枝与茎基部均有褐腐斑，并且部分枝条枯死；9级为全株枯死。药效计算方法同上。

2 试验结果与分析

2.1 室内盆栽试验

由表1可知，棘孢木霉菌制剂对辣椒疫病有很好的防控作用，预防效果显著，棘孢木霉制剂药后7~14 d防效与对照哈茨木霉和烯酰吗啉相比无显著性差异；药后21 d，棘孢木霉制剂的防效显著高于烯酰吗啉，且同剂量下棘孢木霉制剂效果优于哈茨木霉制剂。

表1 棘孢木霉制剂对防治辣椒疫病盆栽试验结果

同列数据后不同小写字母表示<0.05水平下差异显著，下同。

2.2 田间药效试验防效

由表2可知，灌根处理时，药后15 d，棘孢木霉制剂对辣椒疫病的防治效果达90%以上，与同类生物农药哈茨木霉菌和化学药剂烯酰吗啉无显著性差异；药后30 d，棘孢木霉菌对辣椒疫病的防效仍达85%以上，持效期较长，且显著优于对照药剂烯酰吗啉。

喷雾处理时，棘孢木霉菌对辣椒疫病药后15 d的防效略低于烯酰吗啉，但无显著性差异；药后30 d，棘孢木霉菌的防效显著高于烯酰吗啉，表明棘孢木霉菌的持效期优于烯酰吗啉。

综上所述，棘孢木霉菌对防治辣椒疫病效果优异，且持效期较长。施药方式灌根优于喷雾。

表2 棘孢木霉制剂防治辣椒疫病田间效果结果

3 讨 论

木霉菌是一种对作物安全、对病原菌高效拮抗的生防菌株，它能通过重寄生、产生溶解酶、激发免疫反应等一系列拮抗作用，抑制或杀死病原菌[14]。木霉菌分生孢子可以在自然界中大量增殖因而达到对病原菌长期控制的效果[8]。棘孢木霉菌同样具有极高的存活潜力和适应各种生态环境的能力，可以广泛存在于土壤、植物根际和叶面[15]。表2可以看出，3亿CFU/g棘孢木霉菌WP在同等剂量下对辣椒疫病的防治效果优于3亿CFU/g哈茨木霉菌WP（美国“拜沃”）。因此，试验测定的3亿CFU/g棘孢木霉菌WP具有很大的应用价值和市场推广潜力。

3亿CFU/g棘孢木霉菌WP对辣椒疫病的防控效果显著，且持效期长达30 d以上，优于对照药剂烯酰吗啉。该生物药剂的施药方式以灌根或喷淋茎基部为主，施药量2 000~3 000倍液。同时，棘孢木霉菌具有分生孢子萌发和侵染受外界环境因素的影响较大、对病害控制的速效性较差的缺点，棘孢木霉菌和化学药剂复配以提高速效性有待进一步深入的研究。

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Application ofto Control Pepper Blight

XU Pei-dong1, 2, ZHU Zhi-geng1, HUANG Jia-cheng1,XIAO Yong-liang2, XIE Yuan-fang2, WEI Fang-lin2

(1. Jinnong Chemical Co., Ltd of Jiangxi, Jiujiang 332500, Jiangxi, China; 2. Jiangxi Research Centre for Pesticide Engineering Technology, Nanchang 330096, China)

Indoor potting experiments and field trails were conducted to study the control effects of 300 million cfu/g ofWP on Pepper blight. Results from potting tests indicated the control efficiency had no significant difference between root-irrigating the liquid of 300 million cfu/gWP diluted to 2 000-3 000 times after 7-21 d and the competing producton Pepper blight. On the other hand, field trails revealed that the control efficiency of root-irrigating was significant better than spaying of 300 million cfu/gWP after 15 and 30 days. And under the same circumstances,performed slightly better thanthe control effect of 30 d of 300 million cfu/g ofWP was equivalent to that of irrigating dimethomorph, and the duration of efficacy was better than dimethomorph.

biological pesticide;; pepper blight; control efficiency

S436.418.1

A

2095-3704（2017）03-0172-04

2017-07-25

江西省重点研发计划项目（20161BBF60020）

徐沛东，硕士，主要从事生物农药及化学杀菌剂产品开发、生测试验工作，xupeidong@zheng bang.com。

徐沛东, 朱植银, 黄加诚, 等. 新型生物农药棘孢木霉菌防治辣椒疫病应用研究[J]. 生物灾害科学, 2017, 40(3): 172-175.