牙周基础治疗对口腔扁平苔藓伴慢性牙周炎患者外周血MMP-3及IFN-γ水平的影响

宫惠敏 张弘驰 张瑞敏

牙周基础治疗对口腔扁平苔藓伴慢性牙周炎患者外周血MMP-3及IFN-γ水平的影响

宫惠敏 张弘驰 张瑞敏

目的观察牙周基础治疗前后口腔扁平苔藓伴慢性牙周炎患者血清中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和干扰素-γ(IFN-γ)浓度的变化。方法选取60 例诊断为伴有牙周炎的糜烂型口腔扁平苔藓患者，随机分为2 组，其中实验组30 例进行牙周基础治疗联合药物治疗，治疗前后，检测牙周指数PD、AL、BI和PLI。对照组30 例采取药物治疗。用ELLSA检测治疗前后2 组患者血清中MMP-3及IFN-γ的表达水平，分析各组细胞因子浓度的差异。结果治疗后实验组牙周指数明显下降(P<0.05)；2 组患者血清中的MMP-3及IFN-γ表达水平与治疗前相比下降(P<0.05)；经过治疗后，实验组MMP-3及IFN-γ表达水平下降趋势较对照组明显(P<0.05)。结论牙周基础治疗在口腔扁平苔藓治疗中起到了积极作用，可有效降低炎症水平。

口腔扁平苔藓(OLP)； 慢性牙周炎(CP)； 干扰素-γ； 基质金属蛋白酶-3； 牙周基础治疗

口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)是一种常见的口腔黏膜炎性疾病，病因尚不明确。局部免疫反应在OLP的发生发展中具有重要作用，其炎症情况由局部细胞因子网络决定[1]。牙周病的发生涉及一系列免疫炎症反应。干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)作为最典型的Th1型细胞因子，在免疫应答过程中能激活巨噬细胞，提高吞噬作用，增加炎性细胞因子(如IL-12)的分泌[2]。MMP-3作为基质金属蛋白酶家族(matrix metalloproteinases,MMPs)中的一员，其主要作用是降解IV型胶原和层黏连蛋白，还能激活基质中的proMMP-1和proMMP-9[3]。

本研究通过检测OLP伴慢性牙周炎(chronic periodontitis, CP)患者在牙周基础治疗前后，血清中MMP-3及IFN-γ的表达水平，观察比较其变化，探讨牙周干预对OLP患者治疗的意义。

1 材料与方法

1.1 研究对象

选取2013～2014 年在哈尔滨医科大学附属第二医院牙周黏膜科诊断为糜烂型OLP伴有CP患者60 例作为研究对象，其中男性23 例，女性37 例。将其随机分为实验组30 例和对照组30 例，2 组患者在年龄、性别上无统计学差异，具有可比性。所有患者均知情同意并有良好的依从性。

纳入标准：①符合《口腔黏膜病学》第4版提出的OLP诊断标准[4]；②符合1999 年国际牙周病新分类CP诊断标准[5]，全口余留牙数大于20 颗。排除标准：①有糖尿病、类风湿或心血管等全身系统性疾病；②有传染性疾病或感染性疾病；③6 个月内采用抗生素及免疫调节药物治疗；④1 年内接受过牙周治疗；⑤有长期吸烟史；⑥妊娠期及哺乳期女性。

1.2 牙周临床检查

牙周检查均由同一名口腔医师完成，检查包括使用牙周探针在每颗牙齿的6 个位点(颊、舌面的近中、中央、远中)测量其探诊深度(probing depth, PD),附着丧失(attachment loss,AL)，出血指数(bleeding index,BI)和菌斑指数(plaque index,PLI)。其中出血指数采用Mazzad 的记分标准0，1，2，3，4，5；菌斑指数采用 Silness和Löe的记分方法，记分标准分为0，1，2，3。

1.3 治疗方法

对照组患者采用地塞米松局部应用联合口服羟氯喹及白芍总苷胶囊的药物治疗。实验组患者在同对照组治疗的基础上接受牙周基础治疗，包括口腔卫生宣教，全口龈上洁治术、龈下刮治术等。治疗4周后复查，记录治疗前及治疗4 周后牙周临床指标。

1.4 MMP-3及IFN-γ的检测

分别采集2 组患者治疗前和治疗4 周后清晨空腹外周静脉血5 ml，离心后取上清液，保存于-80 ℃冰箱备用。采用双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组血清中MMP-3及IFN-γ的表达水平，操作严格按照ELISA试剂盒说明书进行。

1.5 统计学处理

2 结 果

实验组经牙周基础治疗后，牙周指标PD，AL，BI，PLI显著低于治疗前水平，差异均具有统计学意义(P<0.05)(表 1)。

实验组经牙周基础治疗后，血清中MMP-3及IFN-γ表达水平与治疗前相比下降，差异具有统计学意义(P<0.05)；与对照组单纯药物治疗后相比，血清中MMP-3及IFN-γ表达水平下降明显，差异具有统计学意义(P<0.05)(表 2)。

3 讨 论

研究表明，T淋巴细胞介导的免疫反应与OLP的发生密切相关。T细胞被激活产生的多种细胞因子(如IL-2，IFN-γ等)促进了T细胞介导的免疫反应。IFN-γ是Th1 细胞的特征型细胞因子,能促进巨噬细胞的活化和Th1细胞的分化。在OLP患者的血清和口腔黏膜中检测到高水平表达的IFN-γ，浸润的T淋巴细胞中也含有IFN-γ mRNA[6]。Zhu等[7]通过检测3 种不同类型扁平苔藓患者和对照组人群唾液和血清中IFN-γ浓度，得出IFN-γ在OLP的发展中具有重要作用的结论。多年前已有报道表明T细胞在慢性牙龈炎症中扮演了重要角色，T细胞及其分泌的一些细胞因子也是牙周炎发展过程的关键因素。Takashi研究团队选取23 名牙周病患者(包括牙周炎和牙龈炎)，经过基础治疗后行牙龈活组织检查及免疫组化，发现生成IFN-γ的细胞广泛存在于牙龈结缔组织中，且其数量随着炎症的严重程度和探诊深度的增加而增加，并得出IFN-γ与严重牙周组织损害相关的结论[8]。之后Giovanna等[9]进一步发现与健康对照组相比，IFN-γ在患有慢性牙周炎的实验组牙龈标本中高表达，再次证明了IFN-γ与慢性牙周炎的密切联系。

MMPs是一系列能降解结缔组织基质蛋白的酶类，其中MMP-3能降解细胞外基质成分，还能降解基底膜的主要成分Ⅳ型胶原及层粘连蛋白等。OLP病理变化之一是基底细胞液化变形、基底膜发生改变，基底膜的改变可能引起角化细胞凋亡，角化细胞的凋亡又加快了基底膜的损伤，如此机制造成了疾病的慢性过程[10]。Farzneh等[11]通过ELISA在OLP患者和口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者的唾液和血清中均检测到MMP-3的存在，且OSCC患者组的MMP-3浓度是OLP患者组的2 倍之多，表明了MMP-3浓度与OLP及OSCC相关。Mazzarella等[12]通过RT-PCR检测发现糜烂型OLP 患者中MMP-3的表达高于斑纹型OLP患者，MMP-3和MMP-9在糜烂型OLP中呈有意义的正相关关联。作为口腔免疫炎症性疾病的牙周炎，有学者实验数据表明MMP-3和MMP-8在慢性牙周炎患者中的浓度高于健康对照组，且在非手术治疗后，高浓度的MMP-3和MMP-8显著降低，提示MMP-3参与了慢性牙周炎发展过程中组织破坏环节[13]。还有学者选取美国青少年局限性侵袭性牙周炎患者，经过牙周基础治疗、刮治术、根面平整术及药物治疗后，证明牙周治疗可有效减少患者MMPs表达水平[14]。以上都表明了MMP-3可能作为OLP患者严重程度和牙周炎患者预后的动态检测指标之一。

本研究选择MMP-3及IFN-γ作为检测指标，对照OLP患者在药物治疗基础上进行牙周治疗前后血清浓度及临床疗效。口服羟氯喹和白芍总苷的药物治疗，不仅可以降低羟氯喹的副作用，而且对于糜烂型损害的疗效较佳[15]。本研究结果显示，实验组血清中MMP-3及IFN-γ下降趋势较对照组显著，充血糜烂面积明显缩小，疼痛减轻，在一定程度上表明牙周干预能降低炎症水平，与Daniela S等相关研究结果一致[16]。由于OLP伴牙龈病损通常持久而痛苦,从而限制有效刷牙，这将导致菌斑堆积,牙龈炎症水平上升，可能会增加慢性牙周炎的可能性[17]。OLP引起的炎性浸润可能加重牙周组织的破坏，而牙周组织状况作为局部刺激因素同样会加重OLP的症状[18]。本课题组前期发现OLP患者经牙周治疗后，血清中TNF-α、OPN及IL-17显著降低，IL-6有降低趋势[19-20]。提示了牙周炎症可能是OLP危险因素之一，去除局部刺激因素可降低炎症水平。以上都间接表明了OLP和牙周炎的密切联系，因此OLP患者在药物治疗的同时，辅助牙周基础治疗不可忽视。而牙周感染与OLP相互影响的具体机制仍需更大的样本量和远期疗效观察进行深入研究。

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TheimpactofinitialperiodontaltherapyontheperipheralbloodMMP-3andIFN-γlevelsinpatientswithorallichenplanusandchronicperiodontitis

GONGHuimin,ZHANGHongchi,ZHANGRuimin.

150086，DepartmentofOralMedicineandPeriodontics,TheSecondClinicalCollege,HarbinMedicalUniversity,China

Objective: To investigate the significance of periodontal treatment on the levels of MMP-3 and IFN-γ in the serum of patients with oral lichen planus(OLP) and chronic periodontitis(CP) before and after treatment.Methods60 patients with erosion OLP and CP were divided into 2 groups randomly(n=30). The patients in experimental group

basic periodontal treatment combined with drug therapy, those in control group received drug therapy only. Before and after treatment the periodontal indexes of PD, AL, BI and PLI were measured in the experimental group, the levels of MMP-3 and IFN-γ in serum were tested by ELISA in the 2 groups, the differences of the data between 2 groups were statistically analysed.ResultsAfter treatment the periodontol indexes were decreased in the experimental group(P<0.05), the serum MMP-3 and IFN-γ levels were lower than those before treatment in 2 groups(P<0.05),and the decline of MMP-3 and IFN-γ in experimental group was more obvious than those in the control group(P<0.05).ConclusionPeriodontal initial therapy has positive influence on the treatment of OLP and can reduce the level of inflammation.

Orallichenplanus(OLP);Chronicperiodontitis(CP);IFN-gamma;MMP-3;Periodontalinitialtherapy

150086, 哈尔滨医科大学附属第二医院口腔牙周黏膜科

张瑞敏 E-mail: yzzhangrm@126.com

R781.5

A

10.3969/j.issn.1001-3733.2017.04.025

(收稿： 2016-12-03 修回： 2017-04-29)