上杭县居民MCV、MCH与地贫基因检测结果之分析与研究

华敦洪，莫晓云，黄锦坤，孔春英，胡荣兴，谢万招，赖新连

(福建省上杭县医院，福建 龙岩 364200)

上杭县居民MCV、MCH与地贫基因检测结果之分析与研究

华敦洪，莫晓云，黄锦坤，孔春英，胡荣兴，谢万招，赖新连

(福建省上杭县医院，福建 龙岩 364200)

目的 调查本县居民MCV、MCH同时降低的阳性率与地中海贫血的基因分型情况，并对不同年龄、性别对MCV、MCH在地中海贫血筛查中的影响进行研究。方法 通过对二年来在本院住院、门诊、健康体检者108 722例血液分析结果的统计分析，比较不同人群小细胞、低色素性贫血的发病率；对其中1 054例进行地中海贫血基因检测，并将此结果作为参考标准计算并观察MCV和MCH联合检测对地中海贫血筛查的准确度、特异度、灵敏度、阳性预测值和阴性预测值。计算出本县居民地中海贫血各基因型的构成比。结果 小细胞、低色素性贫血的发病率,在不同的年龄段有较大的差别，婴幼儿最高，其次是青少年，老年人最低。在15岁前男性高于女性，15岁以后至50岁女性高于男性。MCV和MCH系列联合检测对地贫筛查的灵敏度和阴性预测值在不同的人群中都高达95%以上，特异性和阳性预测值却相对较差，而且在不同的人群具有较大的差别。结论 小细胞、低色素性贫血的发病率,在不同的年龄段有较大的差别，MCV、MCH正常者几乎可以排除地中海贫血的诊断。但作为诊断指标特异性和阳性预测值却相对较差，而且在不同的人群具有较大的差别。本县居民地中海贫血总发病率约为10.19%；α-地中海贫血基因携带率为6.59%；β地中海贫血基因携带率为3.60%。子女和其父母的MCV、MCH检测结果综合分析是地中海贫血筛查经济而有效的方法。

地中海贫血；MCV；MCH；临床筛查；基因检测

地中海贫血，是由于基因缺陷导致血红蛋白中至少一种珠蛋白合成缺乏或不足，引起贫血或病理状态，是一组常染色体不完全显性遗传性疾病[1]。地中海贫血的防治最有效的措施就是全面进行产前筛查，防止中重型患者的出生。基因检测是地中海贫血诊断的金标准，但技术要求较高，在近期内无法普及至基层，且因费用较高，难以被推广。近年来随着先进的血液分析仪的普及，平均红细胞体积（MCV）、平均血红蛋白含量（MCH）测定已成为各类医疗机构的常规检验项目。MCV、MCH降低（又称小细胞、低色素性贫血）在地中海贫血筛查中的应用得到普遍重视。本文在对不同年龄、性别人群小细胞、低色素性贫血发病率进行调查分析的基础上，结合基因检测结果，对MCV、MCH在不同年龄、性别人群中筛查地中海贫血的应用价值等方面进行分析与研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 MCV、MCH检测对象为2015年1月～2016年12月到本院住院、门诊、健康体检者108 722例。其中男46 636例，女62 086例。年龄1 d～102岁。地贫基因检测者来自同期、同类人员1 054例，其中男461例，女593例。年龄3 d～82岁。

1.2 MCV、MCH检测 采用SYSMEX XN-1000血液分析仪及其试剂。随机采集静脉血2 mL，EDTA-K2抗凝。30分钟内完成检测。

1.3 基因分析 在本院采集EDTA-K2抗凝全血2 mL，由福州金域医学检验所员工到本院检验科收集后送到其实验室检测。采用深圳益生堂生产的试剂、PTC-200基因扩增仪，PCR+反向点杂交法检测。

1.4 收集、保存所有基因检测者的相关信息，包括基因检测和MCV、MCH检测结果，以及受检者的年龄、性别。对15岁以下小孩则尽可能地收集其父母MCV、MCH的检测结果。

MCV、MCH对地中海贫血诊断的真实性评价以基因检测结果为参比标准，以同时出现MCH＜27 pg、MCV＜82 fL者为筛查阳性。采用儿童及其父母MCV、MCH联合检测结果筛查地中海贫血时则以儿童MCH＜27 pg、MCV＜82 fL加上父母中有一人或二人MCH＜27 pg、MCV＜82 fL为筛查阳性。按四格表法计算灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值。1.5 统计学方法 采用SPSS 18.0统计软件,进行二样本率差别的显著性检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 小细胞、低色素性贫血的发病率,在不同的年龄段有较大的差别，婴幼儿最高，其次是青少年，老年人最低。在15岁前男性高于女性，15岁以后至50岁女性高于男性。经二样本间率的显著性检验上述三种数据比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。50岁以上男女间的阳性率的差异无统计学意义。各年龄段小细胞、低色素性贫血的阳性率见图1；二样本间率的显著性检验结果见表1。20岁以上的男性小细胞低色素性贫血的总阳性率为11.31%（3 887/34 372）。

2.2 基因检测结果 648例地中海贫血患者的基因检测结果见表2。

2.3 不同年龄、性别人群用MCV、MCH联合检测地中海贫血的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及准确性比较。见表3。

图1 不同年龄人群小细胞、低色素性贫血的阳性率

表1 不同人群间小细胞、低色素性贫血的阳性率比较

表2 648例地中海贫血患者的基因分型

表3 不同人群用MCV、MCH联合检测地贫的真实性比较

2.4 62例同时出现MCH＜27 pg、MCV＜82f，年龄小于15岁的儿童，其父母双方MCV、MCH正常者27例，只1例基因检测异常，阳性率为3.70%；父母中有一人或二人同时出现MCH＜27 pg、MCV＜82 fL者35例，地贫基因异常者29例，阳性率达82.86%。；经两样本率差别的显著性检验显示两者差异有统计学意义（u=6.18，P＜0.01）。

3 讨论

3.1 MCH、MCV同时降低，又称小细胞、低色素性贫血，主要见于缺铁性贫血、慢性失血性贫血、地中海贫血等。该指标用于地中海贫血筛查的研究已有众多报告[2-5]。但是，不同性别、年龄的人群小细胞、低色素性贫血的发病率比较却尚未见报道，本文通过对108 722例检测结果的分析研究，发现男性与女性人群不仅小细胞、低色素性贫血的发病率不同，而且随着年龄的增长呈现的变化趋势也不同。在婴幼儿期男性的发病率明显高于女性，而在青春期开始至50岁这一年龄虽然二者发病率都有下降，但女性发病率却高于男性。50岁以后两性的发病率开始趋于一致。男女两性小细胞、低色素性贫血发病率的变化曲线在15岁时出现一个明显的交叉。15～50岁的女性小细胞、低色素性发病率较高应该是月经所致，15岁前的小孩发病率高于成人也可能是因其铁摄入量难以满足生长发育的需要而导致缺铁性贫血发病率高于成人。但男孩为何明显高于女孩，以及除地中海贫血和缺铁性贫血外是否还有其他原因导致小孩小细胞、低色素性贫血阳性率高达50%以上，却有待进一步研究。

3.2 近年来，随着对地中海贫血防治工作的开展，MCV、MCH检测在地中海贫血筛查中的应用研究也日益增加。普遍认为MCV、MCH对地中海贫血的筛查具有很高的灵敏度（90%～96%）[2-3]，但特异度却相对较差，MCV和MCH系列联合检测相对单项检测和平行联合检测具有较高的特异性。本文采用系列联合检测（两项指标均出现阳性结果时才判断为阳性）比较不同人群的差异。

从表3可看出，MCV和MCH系列联合检测对地贫筛查的灵敏度和阴性预测值在不同的人群中都高达95%以上，说明该指标用于地贫筛查具有极高的灵敏度。MCV、和MCH正常者几乎可以排除地中海贫血的诊断。但作为诊断指标特异性和阳性预测值却相对较差，而且在不同的人群具有较大的差别。在15岁前的小孩低于成年人，其中男孩比女孩更低；15岁以后女性却低于男性。总体结果与各类人群的小细胞低色性性贫血的阳性率密切相关，阳性率越高用于地中海贫血筛查的特异度和阳性预测值就越低，反之亦然。在所有人群中20岁以上的男性特异性、阳性预测值和准确度最高，分别为88.89%，90.10%，93.44%；而且其灵敏度和阴性预测值分别高达97.84%，97.56%。也就是说对于这一人群采用该指标筛查地中海贫血具有灵敏、准确等优点。

地中海贫血是一组常染色体遗传性疾病，死亡率极低，在同一族群中，如果没有进行医学干预措施，在不同的性别、年龄的人群中发病率几乎是相同的。20岁以上的男性发病率与其同一族群的总发病率是基本相同的。因此，可用20岁以上男性MCV和MCH系列联合检测的阳性率及其对地中海贫血诊断的阳性预测值粗略推算出其所在族群地中海贫血的发病率。据此，采用本文资料可以推算出上杭县居民地中海贫血的发病率约为11.31%×90.10%=10.19%。

3.3 从表2可见，本县居民地中海贫血α型较多，占64.66%；其中又以α-地贫1基因杂合子（--/2α）最多，占总数的51.39%；β型地中海贫血占35.34%，其中以Ivs-Ⅱ-654位点突变基因杂合子最多，占总数的19.75%。结合前文推算出的地中海贫血发病率可计算出上杭县居民α-地中海贫血基因携带率为64.66×10.19%＝6.59%；β地中海贫血基因携带率为35.34%×10.19%＝3.60%。徐两蒲[6]根据949例样本调查得出的福建省龙岩市地中海贫血的发病率、α-地中海贫血基因携带率、β地中海贫血基因携带率分别为9.38%、7.06%、2.32%。与本文结果略有差别，可能是抽样误差所致。也可能本县居民都是客家人，而所在的龙岩市还有其他民系居民，两者的地中海贫血发病率确实存在差异。3.3 MCV和MCH系列联合检测阳性儿童，如果其父母双方均为正常者27例，只1例基因检测异常。阳性率为3.70%；父母中有一人或二人同时出现阳性者MCH＜27 pg、MCV＜82 fL者35例，地贫基因异常者29例，阳性率达82.85%。；说明对于MCV、MCH降低的儿童，只要再检测其父母双方的MCV、MCH就能对其是否患有地中海贫血作出较准确的判断。特别是对于父母双方均为阴性者，几乎可以排除地中海贫血的诊断。相对于基因检测而言，MCV、MCH检测费用极其低廉，而且简单快速。建义在对儿童进行地中海贫血筛查时同时对其父母进行MCV、MCH检测。对于成年人如果能获得其父母这二项指标的检测结果，同样也有助于是否患有地中海贫血的判断[7-8]。

MCV、MCH同时降低的检出率,在不同的年龄段有较大的差别，婴幼儿最高，其次是青少年，老年人最低。在15岁前男性高于女性，15岁以后至50岁女性高于男性。50岁以后男女两性的检出率开始趋于一致。

MCV和MCH系列联合检测对地贫筛查的灵敏度和阴性预测值在不同的人群中都高达95%以上，用于地贫筛查具有极高的灵敏度。MCV和MCH正常者几乎可以排除地中海贫血的诊断。但作为诊断指标特异性和阳性预测值却相对较差，而且在不同的人群具有较大的差别。在15岁前的小孩低于成年人，其中男孩比女孩更低；15岁以后女性却低于男性。在所有人群中20岁以上的男性特异性、阳性预测值和准确度最高，分别为88.89%，90.10%，93.44%；而且其灵敏度和阴性预测值分别高达97.84%，97.56%。

本县居民地中海贫血总发病率约为10.19%；α-地中海贫血基因携带率为6.59%；β地中海贫血基因携带率为3.60%。

对于MCV、MCH降低的儿童，只要再检测其父母双方的MCV、MCH就可对其是否患有地中海贫血作出较准确的判断[9]。特别是对于父母双方均为阴性者，几乎可以排除地中海贫血的诊断。子女和其父母的MCV、MCH检测结果综合分析是地中海贫血筛查经济而有效的方法。

[1] 王惠民，王清涛.临床实验室管理学[M].北京：高等教育出版社，2012：289-290.

[2] 李光梅.MCV、MCH检测在地中海贫血筛查中的应用研究[J].临床医学工程，2016，23(3):335-336.

[3] 梁栋伟，李荣川，何健，等.MCV、MCH检测在地中海贫血筛查中的应用研究[J].国际检验医学杂志，2014，35（8）：960-961.

[4] 罗景荷.MCV、MCH及血红蛋白A2检测在地中海贫血筛查中的价值[J].蛇志，2015，27（3）：276-277.

[5] 黄英.平均红细胞体积和血红蛋白量在筛查地中海贫血中的价值[J].现代诊断与治疗，2013，24（15）：3371-3372.

[6] 徐两蒲.福建省籍各地市人群地中海贫血的分子流行病学研究[J].中华医学遗传学杂志，2013，30（4）：403-406.

[7] 骆明勇，胡听听，王继成，等.干血斑标本珠蛋白生成障碍性贫血基因检测方法的建立[J].国际检验医学杂志，2015（19）：2784-2786.

[8] 李兵.广东省地中海贫血流行及防控现状评价[D].南方医科大学，2015.

[9] 何蓉，甘建玲，邓思媛，等.联合检验对地中海贫血与缺铁性贫血的诊断价值评价[J].当代医学，2014，20（33）：143-144.

10.3969/j.issn.1009-4393.2017.30.053

莫晓云，E-mail：Moxiaoyun1965@163.com