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乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测及其意义

2017-11-01

临床医药文献杂志(电子版) 2017年53期
关键词:拷贝数乙肝病毒定量

李 莎

(河南省济源市中医院检验科,河南 济源 459000)

乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测及其意义

李 莎

(河南省济源市中医院检验科,河南 济源 459000)

目的探究乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测的结果及其意义。方法 选取我院2016年1月~2017年1月来我科检查的肝病变患者1500例,对其进行乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测,同时针对100例健康者血液样本实施相同检查,观察其病毒标记物情况并进行比较分析。结果 本次入选者均顺利实施检验,大三阳患者的阳性率明显较高,同时病毒拷贝数较高,健康者相关指标均明显较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测的特异性和灵敏性较高,能够对患者疾病做出准确的判断和分析,因此可以根据患者的乙肝病毒复制状态对其实施治疗,发挥临床检测的价值。

乙肝病毒DNA;荧光定量PCR检测;肝病变

肝炎是临床常见的传染性疾病,因此对于肝炎的相关检测也备受临床关注,本次我们积极针对乙肝病毒DNA的荧光定量PCR检测情况进行分析,目的在于总结临床经验,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2016年1月~2017年1月来我科检查的肝病变患者1500例,另外纳入100例健康者血液样本,均对其实施乙肝病毒DNA的荧光定量PCR检测;研究开始前我们均对相关科室和工作人员说明了研究概况,其均表示已经知晓本次研究概况且同意支持本次研究。

1.2 方法

针对受检者均进行乙肝病毒DNA的荧光定量PCR检测,检测所用设备为达安基因DA7600设备;首先收集100 uL血清,对其中的HBV-DNA进行提取,使用PCR的反应液加入到HBV模板中,然后将其混匀并置于毛细管中;此后设置阴性、空白管、阳性对照。各个反应管均放入Roche荧光定量检测仪实施PCR扩增,在50摄氏度的条件下激活其UNG,然后在93摄氏度下预变性2 min,同时在93摄氏度5sec,在60摄氏度35sec,一共40个循环[1]。同时应注意模板的工作温度范围应该控制在30~99摄氏度,电源电压控制在220±22 V。此后根据标准曲线,使用计算机对待测样本中的HBV-DNA含量进行测定,并针对扩增产物实施琼脂凝胶电泳,和阳性模板进行对照,如果其特异性条带的位置和阳性模板相同则为阳性,观察实验结果。

1.3 观察指标

观察检测情况,同时按照乙肝患者的病情将其分为小三阳(HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+),大三阳(HBsHg+、HBeAg+、HBcAb+),HBsAb单独阳性组,HBsAg单独阳性组。然后按照类别对其阳性率进行统计,并对比组间的病毒拷贝数(Log值)。

1.4 统计学方法

采用SPSS 21.0统计学软件对数据进行分析,计数资料用例数(n)、百分数(%)表示,采用x2检验;计量资料用“x± s表示,采用t检验;以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

本次入选者均顺利实施检验,大三阳患者的阳性率明显较高,同时病毒拷贝数较高,健康者相关指标均明显较低,其详细情况见下表1。

表1 乙肝病毒检测的详细情况(±s)

表1 乙肝病毒检测的详细情况(±s)

病毒拷贝数(Log值)大三阳 900 900 100.0 7.67±0.47小三阳 300 140 46.7 7.31±0.24 HBsAg 200 115 57.5 5.74±1.21 HBsAb 100 33 33.0 4.57±0.29健康者 100 5 5.0 3.44±0.14组别 例数 HBV-DNA阳性数HBV-DNA阳性率

3 讨 论

肝炎的发生主要是有肝炎并对感染引起,病发发生对患者的健康会产生严重影响,同时未经及时治疗的情况下,极有可能使得肝炎演变为肝硬化或肝癌,因此我们应该早期对患者做出诊断并给予治疗[2]。

目前临床多数研究认为,肝炎疾病的传染性尚不能完全明显,但是病情进展必然和患者的病毒复制存在密切关系,此时有效的检测方法就成为临床关注的重点所在[3]。荧光定量PCR检测是近年来临床中逐渐应用的一种检测方法,荧光技术在检测中的联合使用,使得PCR过程中的荧光信号能够被准确的反应,从而通过其变化和检测获得较高的灵敏度和准确性[4]。本次我们通过对相关的受检者样本进行分析发现,大三阳患者的阳性率明显较高,同时病毒拷贝数较高,健康者相关指标均明显较低,差异有统计学意义(P<0.05)。同时说明了乙肝病毒DNA对于患者病情程度的反应价值,临床可及时根据患者的检测结果对其实施干预和治疗。

综上所诉,乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测的特异性和灵敏性较高,能够对患者疾病做出准确的判断和分析,其临床实施的意义则在于,可以根据患者的乙肝病毒复制状态对其实施治疗,最终帮助患者改善其预后。

[1]翟秀英.荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的临床意义[J].临床合理用药杂志,2014,02(8):108-109.

[2]李秀义,高冬梅,潘继文,等.荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的临床价值[J].蚌埠医学院学报,2014,06(12):804-806.

[3]颜 敏.血清HBV-DNA荧光定量PCR检测与乙乙肝病毒标志物模式的相关因素探讨[J].中外医疗,2014,26(10):193-194.

R446.1

B

ISSN.2095-8242.2017.053.10427.01

本文编辑:赵小龙

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