山楂叶中总黄酮含量测定方法探究

●郭延红 陈江 夏忠玉

山楂叶中总黄酮含量测定方法探究

●郭延红 陈江 夏忠玉

目的：测定山楂叶提取物中总黄酮的含量，为建构质量标准提供参考依据。方法：通过索氏提取法进行山楂叶内黄铜化合物的提取，以芦丁作标准品，对其实施络合显色，于最大吸收峰500nm处进行提取物内总黄酮含量测定。结果：山楂叶里总黄酮含量以芦丁计算达9.15%。同时，平均加样回收率为98.44%。结论：该法操作简单，准确性高，是山楂叶内总黄酮含量测定的有效可行手段。

山楂叶；总黄酮含量测定方法；探究

黄酮类为山楂叶的主要成分，能降压，提高冠脉血流量，降血脂，耐缺氧，强心，促血流流变学改变，还可抗心肌缺血，心律失常等，多被临床用作心绞痛、冠心病的治疗。在我国，已推出了山楂叶总黄酮制剂——益心酮片、复心片、心安胶囊、益心酮滴丸、山楂叶总黄酮胶囊等产品。山楂叶里黄酮类化合物分析方法较多，如高效液相色谱（HPLC）法、比色法等，而本文则以芦丁作标准品，对分光光度法测量山楂叶中总黄酮含量的临床资料进行总结，报告如下∶

1 材料与方法

1.1 仪器与材料

UV1901紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器公司生产）、超声波清洗器、电子天平、芦丁对照品（由中国生物制品检定所提供）、甲醇、无水乙醇、三氯甲烷均属于分析纯，实验用水（二次去离子水）。样品∶山楂叶，于自然环境下晾晒干，备用。

1.2 对照品溶液制备

使用电子天平精密测出0.0100g芦丁对照品（120℃干燥到恒重）放于50ml容量瓶里，添加适量的70%的乙醇，水浴加溶解，放冷，并用65%甲醇稀释到刻度，摇至均匀，配作0.2mg/mL，作对照品储备液。

1.3 供试品溶液制备

先称取1.0克山楂叶细粉，搁置索氏提取器里，加三氯甲烷加热回流提取直至提取液无色，弃去三氯甲烷液，清除药渣中的三氯甲烷，向其中加入适量甲醇再提取至无色，得到的提取液搁置鼓风干燥箱里蒸干，剩余物质用50%乙醇水稀释，再倒入50ml容量瓶，并加50%乙醇至刻度，摇匀，作供试品储备液I，过滤。另量取5ml续滤液，倒入25ml容量瓶，加入充分稀释至刻度，摇匀，作供试品储备液II。

2 结果

2.1 校准曲线和线性范围

先量得1、2、3、4、5、6mL对照品储备液，依次放于25ml容量瓶里，均添水稀释至6ml，加入5%1ml亚硝酸钠溶液，充分摇匀，静置6min，向其中增添10%1ml硝酸铝溶液，摇匀，静置时间与前面相同，再增添4%10ml氢氧化钠试剂，依旧稀释至刻度，摇匀后静置15min，以对应试剂为空白，500nm波长处时借助分光光度法完成吸光度测定，横坐标为浓度、纵坐标为吸光度，求线性方程，结果分析，在0.0085-51.27μmL范围内线性关系良好，线性回归方程∶A=0.01305C+0.00119，相关系数为0.9999。

2.2 样品测定

从供试品储备液II中量取2mL，搁置25ml容量瓶，结合校准曲线制备项下的方式，依法显色，完成吸光度测量，根据线性回归方程准确测量供试品溶液里芦丁浓度，通过干燥品计算，含总黄酮（以无水芦丁算）为9.15%。

2.3 精密度实验

测量5份山楂叶样品，参照供试品溶液制作流程准确的提取再测量总黄酮含量，每个样品均给予5次测量，取平均值，所测结果如表1∶

表1 方法精密度分析

2.4 加标回收率实验

朝已测出总黄酮含量的山楂叶样品内，分别加入适量芦丁标准品，结合供试品溶液制备流程提取，测量实际含量，进行回收率计算。所测结果如表2∶

表2 方法回收率

3 讨论

山楂叶属蔷薇科植物山里红或野山楂等的叶，在心血管疾病防治中效果显著，能扩张血管，改善心脏活力，使得中枢神经系统兴奋，达到软化血管与利尿、镇静之效；山楂叶还能开胃消食，尤其在消肉食积滞上效果更佳，不少可促消化的药内均用到了山楂叶[1]。山楂叶还可活血化瘀，利于解除局部淤血状态，在铁打损伤治疗上有辅助功效。山楂叶的成分有黄酮类、聚合黄烷类、酚酸类与一些三萜类，而又以黄酮类为主要成分[2]。山楂叶中的黄酮类可阻断且减少自由基生成，提高机体免疫力，还能防衰老、抗癌。而山楂叶里的总黄酮含量测定始终是研究热点。

本文里通过索氏提取法进行山楂叶里总黄酮含量的测定，所测总黄酮含量达9.15%。同时，平均加样回收率为98.44%，且测量的过程中山楂叶采集后则即刻进行暴晒、晾干，避免了黄酮类成分的分解，提高了测量准确性。可见，索氏提取法结果准确、重现性好，是山楂叶里总黄酮含量检测的可行方法。

（作者单位：贵阳护理职业学院）

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典.一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：30.

[2]郭琦丽，昌武清.山碴叶的研究进展[J].中国药业，2007，16（22）：60.

（通讯作者：夏忠玉）