免疫组化标记Stathmin-1与p16在宫颈上皮内瘤变分级中的作用

姚 晨，丁 岚，杨永国，梅 霞

（扬州市江都人民医院病理科，江苏 扬州 225200）

免疫组化标记Stathmin-1与p16在宫颈上皮内瘤变分级中的作用

姚 晨，丁 岚，杨永国，梅 霞

（扬州市江都人民医院病理科，江苏 扬州 225200）

目的分析Stathmin-1与p16在宫颈上皮内瘤变分级中的作用，为临床治疗提供帮助。方法采用免疫组织化学技术检测Stathmin-1与p16在正常宫颈组织及上皮内瘤变（CIN）中的表达，使CIN分级更加精确。结果Stathmin-1在正常宫颈组织、CINI、CINII、CINIII中的阳性表达率分别为6.7%、25%、42.2%、91.7%。P16在正常宫颈组织、CINI、CINII、CINIII中的阳性表达率分别为13.3%、70%、95.6%、100%。两者表达结果表明Stathmin-1在宫颈的鳞状上皮低度病变分类鉴别中，比p16具有更高的特异性。结论Stathmin-1在CINIII中呈过度表达，而在低级别病变中不表达或部分表达，有助于鉴别高级别、低级别CIN和良性反应性改变，进而为临床诊治采取哪种治疗手段提供帮助。

宫颈上皮内瘤变；Stathmin-1；p16

在各种恶性肿瘤中，宫颈癌的发生是可以预防及阻止的，在世界范围内，是女性好发的第三种恶性肿瘤[1]。采用免疫组化标记物鉴别宫颈的癌前病变，特别是高级别与低级别病变的特异性一直备受病理医生和妇科医生的关注。本文通过检测CIN中Stathmin-1和p16的表达，对宫颈癌前病变的低级别和高级别的分级更加明确，为妇科医生对病人的诊治提供帮助。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2014年1月至2016年12月于本院确诊的正常宫颈组织30例为研究对象，年龄25～60岁；CINⅠ级60例，年龄27～65岁；CINⅡ级45例，平均54岁；CINⅢ级48例，年龄28～75岁，所有子宫颈组织均为子宫颈活组织检查。

1.2 方法

应用免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法（SP法）检测Stathmin-1与p16在宫颈上皮内瘤变分级中的作用。免疫组化所用抗体Stathmin-1与p16即用型抗体，购自福州迈新生物技术开发有限公司。用PBS代替一抗作阴性对照，用已知阳性组织作为阳性对照。

1.3 结果判定

Stathmin-1以胞质棕黄色为阳性表达；p16以胞核着色或胞核和胞浆同时着色为阳性，棕黄色为阳性表达。根据肿瘤细胞阳性数进行判断，将阳性细胞按数量和染色强度分为4级。染色强度与背景无明显差别为阴性（-）；弱表达（+）；中等表达（++）；强表达（+++）。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0统计学软件对数据进行分析处理，计数资料以百分数（%）表示，采用x2检验，以P＜0.05表示有统计学意义。

2 结 果

2.1 stathmin-1蛋白表达情况

stathmin-1的表达定位在细胞质，stathmin-1在正常的宫颈组织中的阳性表达率为6.7%（2/30），在CINⅠ级中为25%（15/60），在CINⅡ级中为42.2%（19/45），在CINⅢ级中为91.7%（44/48）（图1A）。Stathmin-1在正常的宫颈组织中、CINⅠ级、CINⅡ级和CINⅢ级中的表达，差异有统计学意义（x2=75.55，P＜0.05）。在CINⅢ级中的阳性表达较正常的宫颈组织、CINⅠ级、CINⅡ级是逐渐增高的。

2.2 p16蛋白表达情况

p16蛋白的表达定位在细胞核和（或）细胞质，其阳性表达率随CIN级别增加而增高。p16在正常的宫颈组织中的阳性表达率为13.3%（4/30），在CINⅠ级中为70%（42/60），在CINⅡ级中为95.6%（43/45），在CINⅢ级中为100%（48/48）（图1B）。在正常的宫颈组织中、CINⅠ级、CINⅡ级和CINⅢ级中的其表达，差异有统计学意义（x2=87.47，P＜0.05）。

图1 宫颈CINIII中Stathmin-1与p16的表达状况

3 讨 论

子宫颈癌是全世界妇女中最常见的癌症之一[2]，宫颈的癌前病变发展到宫颈癌需要10-20年的时间，如果发现并有效治疗这些病变，宫颈癌可以预防。由于所采取的治疗手段不同，明确鉴别CIN级别有助于减少因CIN分级过高而导致的过度治疗。联合运用高特异性的生物标记物对临床采取哪种治疗方式提供帮助，同时加强了检测和随访强度。

p16基因为多肿瘤抑癌基因。Polman等[3]提出联合高危型HPV，p16、Ki-67检测可能为高级别CIN患者的治疗及随访提供一个很有效的办法。本研究发现p16的阳性表达率在在CINⅢ级中为100%，CINII中为95.6%，其表达与Kolben等研究相符合。而p16在正常的宫颈组织中阳性表达率为13.3%，在CINⅠ级中为70%，差异统计学意义（x2=87.47，P＜0.05），可以看出运用P16可以很好的区分出良性病变。stathmin-1是微管不稳定蛋白，在细胞运动和迁移过程中的发挥着调节器的作用。本研究中，由于p16的表达在CINI中的表达高达70%，因此很难与CINII和CINIII区分出来。而stathmin-1对于宫颈低级别的病变敏感性比较弱，可以先运用p16筛查出有病变的宫颈低级别病变，再联合运用stathmin-1，可以较为精确的区分出宫颈低级别和高级别病变，为临床诊治提供帮助。

总之，联合检测stathmin-1及p16的表达，可以明确区分子宫颈病变中高级别与低级别病变和良性反应性改变，使CIN分级更加精确，减少过度治疗，为临床治疗提供确实有效的病理诊断依据。

[1] Possati-Resende JC, Fregnani JH, Kerr LM,et al.The Accuracy of p16/Ki-67 and HPV Test in the Detection of CIN2/3 in Women Diagnosed with ASC-US or LSIL[J].PLoS One,2015,10(7):445.

[2] 余 燕.子宫颈癌的防治与护理进展研究[J].家庭医药,2016, 34(7):169.

[3] Polman NJ, Uijterwaal MH, Witte BI, et al. Good performance of p16/ki-67 dual-stained cytology for survillance of women treated for high-grade CIN[J].Int J Cancer,2017,140(2):423-430.

Immunohistochemical labeling of Stathmin-1 and p16 in grading of cervical intraepithelial neoplasia

YAO Chen, DING Lan, YANG Yong-guo, MEI Xia
(Department of Pathology; Jiangdu people's Hospital of Yangzhou,Jiangsu Yangzhou 225200,China)

ObjectiveTo analyze the role of Stathmin-1 and p16 in grading of cervical intraepithelial neoplasia, and to provide information for clinical treatment.MethodsImmunohistochemistry was used to detect the expression of Stathmin-1 and p16 in normal cervical tissues and intraepithelial neoplasia (CIN), which made CIN grading more accurate.ResultsThe positive expression rates of Stathmin-1 in normal cervical tissues, CINI, CINII and CINIII were 6.7%, 25%, 42.2% and 91.7%, respectively. The positive expression rates of p16 in normal cervical tissues, CINI, CINII and CINIII were 13.3%, 70%, 100% and 93.8%, respectively. The results indicated that Stathmin-1 is more specific than p16 in classification and identification of squamous lesions of squamous epithelium of the cervix.ConclusionStathmin-1 was overexpressed in CINIII, and in the low grade lesions did not express or partial expression, is helpful in the differential diagnosis of high level and low level of CIN and benign changes, and for clinical diagnosis and treatment of what kind of treatment to help.

Cervical intraepithelial neoplasia;Stathmin-1;p16

R969.3

A

ISSN.2095-8242.2017.47.9111.02

本文编辑：刘帅帅