常用中药丹参种植最佳采收期的确定及研究
2017-10-21刘海红
刘海红
【摘要】本文通过作者学习和实习阶段的理论知识和实际操作经验的积累,针对常用中药材丹参进行了研究,通过深入探讨丹参的资源分布、中医功效功能主治、丹参的药理作用、丹参化学成分的提取方法、丹参含量测定方法、丹参酮含量测定及曲线绘制、丹参种植技术等几个方面阐述了丹参的有效成分研究方法,确定了最佳采收期,为丹参的标准化种植采收技术提供了直接数据参考。
【关键词】中药;丹参;中药药理;总丹参酮;HPLC;最佳采收期
丹参(Salvia miltiorrhiza bunge)是我国传统常用中药,在“神农本草经”里首次被记载列为上品;在“本草纲目”中李时珍把同物异名现象加以整理并且扩充了其基本的中医功效、中药配伍及部分方剂;随着中药药理学、天然药物化学和生药学的快速发展,在“中国药典”(第一部)中已经收载丹参的鉴定标准以及部分丹参制剂的质量检验标准。
1丹参概述
1.1丹参的历史沿革
1.1.1丹参的资源分布
丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参的干燥根和根茎,丹参及其1050种同属植物遍布于全球温带地区,我国大部分地区河南、山东、陕西(或山西)、湖北、安徽、四川等省均有野生品,丹参的道地产区也随着生态环境的变化及人类的医药生产活动有所变化,“中国道地药材”中将我国四川省列为丹参的道地产区,除此而外山东省、河南省、陕西省、内蒙古自治区等地也多有栽培。
1.1.2丹参的中医功效功能主治
《本草纲目》中李时珍把丹参描述为:五参五色配五脏,丹参入心,日赤参。其苦参,则右肾命门之药也。时珍日:丹参色赤味苦,气平而降,阴中之阳也。入手少阴、厥阴之经,心与包络血分药也。按:《妇人明理论》云:四物汤治妇人病,不问产前、产后,经水多少,皆可通用。惟一味丹参散,主治与之相同。盖丹参能破宿血,补新血,安生胎,落死胎,止崩中带下,调经脉,其功大类当归、地黄、川芎、芍药故也。
丹参作为活血调经药,其味苦、微辛;性微寒;心、脾、肝、肾血分之药;具有活血祛瘀,养血安神,凉血消肿的功效;主治瘀血头、胸、胁、腹疼痛,積聚,月经不调,痛经经闭,产后瘀滞腹痛,关节痹痛,跌打瘀肿,温病心烦,血虚心悸,疮疡肿毒,丹疹疥癣。
1.1.3丹参的药理作用
丹参能扩张冠状动脉、增加冠状动脉血液流量,改善心脏缺血、梗塞,调整心律改善心脏功能,扩张外周血管改善微循环。
抗凝血、促进血纤溶解、抑制血小板聚集,抑制血栓形成。
能降血脂,抑制家兔实验性冠状动脉大分支粥样斑块的形成。
可以抑制或减轻肝细胞变性、坏死及炎症反应,促进肝细胞再生并有抗肝脏细胞纤维化作用。
能够提高机体的耐缺氧能力。
促进人体骨骼组织的自身修复,加速骨折愈合,缩短红细胞及红色素恢复期。
对多种细菌及结核杆菌有一定程度的抑制作用。
同时还具有抑制中枢神经系统、增强免疫、降低血糖及抗肿瘤等作用。
1.2丹参的化学成分及有效成分
1.2.1丹参化学成分的提取方法
十九世纪中后期,在西方自然科学飞速发展尤其是化学和生物学的跨越式发展带动之下,药学领域的天然药物研究开始迅速发展。日本正在经历明治维新改革,西方的天然药物的研究思想和研究手段被积极运用于药材。二十世纪三四十年代,此种方法正式被我国中药学者引入中国并产生了以中药为主要研究对象的天然药物化学和生药学及其相关学科,这些研究理论及成果是中国药典第一部的基础和重要内容。同样,丹参的研究也是由最初的脂溶性成分研究逐步转变为水溶性成分研究,我国工作者探讨了许多丹参脂溶性化学成分和水溶性化学成分的提取方法,醇提法、超声法、梯度渗漉法等,笔者比较推崇二氧化碳超临界萃取法。由于丹参中的主要有效成分丹参酮对光不稳定,丹酚酸受热易分解,所以无需加热的二氧化碳超临界萃取法明显优于其他方法。
1.2.2丹参的化学成分
国内外己报道丹参的化学成分有:丹参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡB、羟基丹参酮ⅡA、次甲丹参酮、1.2-二氢丹参酮、丹参二醇A、准丹参酮、3a.羟基丹参酮ⅡA、羟基次甲丹参酮、紫丹参甲素、紫丹参乙素、丙素、丁素、丹参醛、去氢丹参新酮、次甲丹参新酮、次甲二氢丹参酮、丹参内酯、丹酚酸B等具有水溶性和脂溶性的物质。相关丹参中药药理实验结论表明:大部分药理作用来自于丹参中的水溶性物质,但是由于丹参脂溶性成分研究技术比较成熟,所以现阶段我们仍采用脂溶性的丹参酮Ⅱ的含量来作为丹参质量主要评价物。
2丹参种植过程中根及根茎有效成分的含量表格制定
2.1丹参酮ⅡA的含量测定仪器与材料
TBE-300A高速逆流色谱仪(岛津),配有聚四氟乙烯管(PTFE)分离柱;HX-1050型横流泵(北京康博实验仪器有限公司),Water600高效液相色谱仪;样品通过流动注射泵进样,流速0.2ml/min,干燥器温度350℃,干燥器流量9.0L/min;实验前仪器经过校正。
丹参药材采自内蒙古通辽地区某公司经过认证的丹参规范化种植基地,经内蒙古通辽市药品检验所安文泉研究员鉴定为唇形科鼠尾草属植物丹参的干燥根及根茎。石油醚、乙酸乙酯、氯仿等均为分析纯,均来自北京化学试剂公司,HPLC分析用甲醇为色谱纯(北京化学试剂公司),硅胶(200-300目)及硅胶板均采购于北京哲成科技有限公司,实验用水为过滤蒸馏水。
2.2实验方法
2.2.1总丹参酮的提取
取丹参鲜药材SKg,粉碎,过40目筛,依次用石油醚、甲醇过滤,甲醇渗漉液浓缩后得浸膏205.4g,将此浸膏分散于1L蒸馏水中,用等体积氯仿萃取3次,合并萃取液,浓缩得到氯仿萃取物63.1g。
2.2.2硅胶色谱柱分离
取氯仿萃取物50g经硅胶色谱柱分离,洗脱液为氯仿,每100ml流出液收集为一个馏分,硅胶薄层色谱跟踪,波曾色谱展开剂为石油醚4:乙酸乙酯1,得到组分F1和F2,用于进一步的高速逆流色谱分离。
2.2.3 HPLC预分离条件
经过以上操作过程,借鉴相关文献,考察了石油醚乙酸乙酯、石油醚丙酮、氯仿、氯仿 甲醇等多个硅胶住色谱洗脱条件,本实验采用氯仿洗脱,分离条件比较好,经过HPLC分析计算峰面积以确定丹参酮ⅡA的含量。此外,可以用紫外分光光光度法测量总丹参酮的含量。
3丹参含量测定曲线绘制
3.1丹参酮含量最高既最佳采收期的确定
如表格所示,2014与2015年度丹参有效成分浓度最高是9月下旬和10月上旬,内蒙古东部地区以及东北三省气候条件和土壤条件比较类似,既我国东北地区每年的人工种植丹参最佳采收时间为每年的九月下旬至十月上旬,可以作为经验性指导。
3.2丹参的种植
丹参药材种植基地位于我国共北地区,可以进行扦插繁殖,华北、江浙地区也采用此种方法。一般东北于6-7月,江、浙于4-5月,取丹参地上茎,剪成10-15厘米的小段,剪除下部叶片,上部叶片剪去1/2,随剪随插。在己作好的畦上,按行距20厘米,株距10厘米开浅沟,然后将插条顺沟斜插,插条埋土6厘米。扦插后要进行浇水、遮荫。待再生根长至3厘米左右,即可移植于田间。也有的将劈下带根的株条直接栽种,注意浇水,也能成活。
种子繁植育苗移植:东北地区于4月中旬,进行条播,覆土0.3厘米,播后浇水,加盖塑料薄膜,保持土壤湿润,约15天左右出苗;江浙地区于6月种子成熟时,采收后立即播种,复土以盖上种子为度,播后盖草保湿,10月移植于大田。直播:华北地区于4月中旬播种,条播或穴播。穴播行株距同分根法,每穴播种子5-10粒;条播沟深1厘米左右,覆土0.6-1厘米,亩播种量0.5公斤左右。如遇干旱。播前先浇透水再播种。播后半月出苗。苗高6厘米时进行间苗定苗。
田间管理中的中耕除草。主要处理方法为分根繁殖地,因覆土稍厚,出苗慢。一般在4月幼苗开始出土时,要进行查苗,发现土板结或复土较厚,影响出苗时,要及时将穴的复土扒开,促其出苗。生育期中耕除草3次,第1次于5月,苗高10-12厘米时进行,第2次于6月进行,第3次于8月进行。施肥方法为生育期结合中耕除草,追肥2-3次,亩用腐熟粪肥1000-2000公斤,过磷酸钙10-15公斤,或饼肥25-50公斤均可。排灌方法是兩季注意排水,防止水涝。出苗期及幼苗期如土壤干旱,及时灌水或浇水。出蕾期主要工作是摘蕾,除留做种子的植株外,必须分次摘除花蕾,以利根部生长。
4结论
经过研究,本次论文明确了丹参的来源、中医功效、药理作用,更为重要的是,通过实验手段明确测定出丹参成分含量的测定方法,确定我国东北地区人工栽培丹参最佳适宜采收期为每年的9月下旬至10月上旬。
参考文献
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