蓝莓组培苗耐高pH值培养基鉴定

周双，梁文卫，王明洁，孙兰英，崔玉志

(黑龙江省农业科学院浆果研究所，黑龙江 绥棱 152204)

蓝莓组培苗耐高pH值培养基鉴定

周双，梁文卫，王明洁，孙兰英，崔玉志

(黑龙江省农业科学院浆果研究所，黑龙江 绥棱 152204)

以“美登”、“北陆”、“野生型”为试材，采用植物组织培养技术，在不同pH值的继代培养基中，研究蓝莓对高pH值培养基的适应性。结果表明：pH值为5.8条件下的增殖系数可以作为蓝莓继代培养期耐高pH培养基的鉴定的参考指标。最终鉴定出，“美登”的耐高pH值培养基能力较强,“北陆”次之，“野生型”最弱。

蓝莓；耐高pH培养基；鉴定

Abstract： In ‘Mei Deng’ ‘Bei Lu’ ‘Wile Type’ as experimental materials to study, used plant tissue culture technology, the adaptability ofVacciniumuliginosumto high pH resistant medium was studied in different pH of subculture medium. The resulte showed that the proliferation factor at pH 5.8 can be used as a reference for the identification of high-pH culture medium for blueberry subculture. Eventually identified ‘Mei Deng’ strong resistance, high pH medium, ‘Bei Lu’ middle , ‘Wile Type’ weak.

Keywords：Vacciniumuliginosum; High pH Culture Medium Tolerance; Identification

蓝莓(VacciniumuliginosumLinn.)系杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vacciniumspp．)，多年生落叶或常绿灌木或小灌木。因其在鲜食、加工、医疗和观赏等方面的应用，已被誉为21世纪范围内最具有发展前景的优良果树[1-2]。蓝莓对土壤条件要求严格，喜湿润、疏松、有机质含量高(8%～12%)的土壤，并且一般适宜栽培在pH值为4.0～5.0的土壤。我国只有少部分地区能够达到蓝莓正常生长需要的土壤要求，绝大部分地区需要改善土壤理化性状后才能进行蓝莓栽培。生产中常用施加硫磺粉调节土壤pH值[3]。但在施用硫磺粉过程中要控制用量，因其容易对蓝莓植株和生态造成迫害，同时增加生产成本，降低蓝莓收益[4]。

目前我国多位学者对玉米[5]等作物品种本身的耐酸碱性等逆境胁迫能力进行了广泛研究,并筛选和培育出许多耐逆境胁迫品种。我国对植物耐逆境胁迫研究具有良好的实践基础。梁文卫等[6]通过pH梯度驯化培养明显提高“美登”蓝莓对高pH值的适应性。徐呈祥[7]等通过嫁接的方法提高蓝莓对高pH土壤适应性的能力。但是这些方法，既增加了劳动成本，又降低了劳动效率。所以挖掘蓝莓品种本身的耐高pH值土壤能力,筛选和培育耐高pH值土壤品种,是现阶段开发利用蓝莓资源最为经济有效的途径。

本文采用植物组织培养技术，以“美登”“北陆”“野生型”为试材进行耐高pH值培养基的适应性分析，旨在筛选出蓝莓耐高pH培养基的评价指标以及耐高pH培养基的蓝莓品种，以期为耐高pH蓝莓品种的选育提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 材料

供试材料分别为东北地区代表品种矮丛蓝莓品种‘美登’无根组培苗、‘野生型’、半高丛蓝莓品种‘北陆’，均由黑龙江省农业科学院浆果研究所综合实验室提供。

1.2 方法

将上述蓝莓材料的无根组培苗剪成1cm大小带单芽的茎段接种在改良的WPM +ZT 0.5mg/L+IBA 0.1mg/L+蔗糖25g/L+琼脂10g/L的培养基中，用pH计进行测定，用1 mol/L HCl或1mol/L NaOH调节培养基的pH，pH分别调节为5.0、5.3、5.6、5.8、6.0、6.2、6.4和6.6共8个处理，每个pH处理接种10瓶，每瓶接种3个茎段。培养条件为温度25℃，空气相对湿度60%，光照强度3000 lx，光照周期16h/d。40d天后，调查其增殖系数、株高、叶色、去茎端愈伤组织的蓝莓鲜重和干重。用Excel应用软件制图做表，用SPSS 20.0统计分析软件进行方差分析，并用Duncan进行多重比较，显著水平P=0.05。

2 结果与分析

2.1 不同pH对蓝莓增殖系数的影响

图1 不同pH值对三种蓝莓增殖系数的影响

增殖系数是蓝莓继代培养增殖效果的重要评定指标。由图1可知，随着pH值的增加，“美登”、“北陆”的增殖系数呈现波动性增加在pH值为6.2达到最高后缓慢降低，而“野生型”的增殖系数在pH5.6时达到最高后急剧下降。说明随着pH升高，3种蓝莓的增殖能力存在差异。从单因素分析可以看出，在pH值为5.8时“美登”、“北陆” 、“野生型”的增殖系数达到差异显著水平，随着pH值的增加，“美登”、“北陆”与“野生型” 的增殖系数达到差异显著水平，但“美登”与“北陆”之间差异不显著。所以可以把pH值为5.8条件下的增殖系数作为蓝莓继代培养期耐高pH培养基的鉴定参考指标。“美登”、“北陆”与“野生型”的平均增殖系数分别为5.71、5.37、2.95，“美登”、“北陆”与“野生型”的增殖系数与pH值为5.0时的增殖系数相比，在pH值为5.8时分别增加了135.81%、42.32%、-21.53%；在pH值为6.0时分别增加了160.93%、65.54%、-23.01%；在pH值为6.2时分别增加了177.91%、95.36%、-36.64%；在pH值为6.4时分别增加了132.44%、76.5%、-41.04%；在pH值为6.6时分别增加了103.83%、27.5%、-47.00%。说明3种蓝莓对高pH值培养基的耐受力存在差异，其中“美登”的耐受力最高，“北陆”次之，“野生型”的耐受力最低。

2.2 不同pH对蓝莓叶色的影响蓝莓叶色的影响

叶色是植物生长状态的直观表现。3种蓝莓单芽茎段在不同pH值的继代培养基中的叶色(如表1所示)不同。“美登”在pH值为5.0、5.3、5.6、5.8、6.0时，叶色为绿色或浓绿，pH值在6.2后叶色开始变淡，变黄；“北陆”在pH值为5.0、5.3是叶色为淡绿，在pH值为5.6、5.8、6.0、6.2时，叶色为绿色或浓绿，当pH值为6.4、6.6时，叶色变淡，变黄；“野生型”在pH值为5.6、5.8时叶色开始变淡，在pH值为6.4时，叶色发红严重。说明“美登”、“北陆”与“野生型”叶色受高pH值培养基的影响存在差异，其中，“美登”的影响较小，“北陆”次之，“野生型”的影响最大。

表1 不同pH对三种蓝莓叶色的影响

3 讨论

增殖系数是蓝莓继代培养增殖效果的重要评定指标。增殖系数越大，蓝莓繁殖速度越快，短时间内就可增加苗木数量，从而形成规模化生产[5]。但是蓝莓喜疏松、有机质含量高的酸性土壤，一般适宜的土壤pH值为4.5～5.5，土壤pH值过低或过高都会对其生长造成影响。选育耐高pH值的蓝莓品种是解决蓝莓实际生产中不耐高pH土壤的重要手段。本研究在不同高pH值的继代培养基中，对3种蓝莓品种进行评价，结果表明当pH值为5.8时，更适合对蓝莓组培苗进行耐高pH值培养基判定。本研究发现，适当的提高培养基的pH值可以提高部分蓝莓组培苗的增殖系数，这与曹增强等[9]的研究相似。同时研究发现，不同品种的蓝莓组培苗耐高pH值培养基的能力存在差异，这与蓝莓进行露地栽培时呈现相似的结论[10-11]。

有研究表明，不同pH的培养基会影响蓝莓组培苗对元素的吸收[9]。植物缺素或多素都会直接影响叶色的变化。所以对叶色的观察是对蓝莓组培苗耐高pH值培养基差异的一项重要参考依据。本研究表明：随着培养基pH的升高，3种蓝莓的叶色均受到影响。“野生型”受影响最大，“北陆”次之，“美登”最小。但叶色的变化是由元素失调引起，是一种元素失调还是多种元素失调相互作用，未见报道。但由于叶色受人为因素较大，只能作为蓝莓耐高pH值培养基的辅助指标。

通过对3份蓝莓品种接种于不同高pH值培养基的方法进行耐高pH值培养基指标的鉴定及品种筛选，综合上述结果我们可以用pH值为5.8条件下的增殖系数可以作为蓝莓继代培养期耐高pH值培养基的鉴定的参考指标，方法简单易行，适宜于大量材料的耐高pH培养基的鉴定和筛选。试验最终鉴定出，“美登”的耐高pH值培养基能力较强,“北陆”次之，“野生型”最弱。

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IdentificationofHighpHCultureMediumToleranceforVacciniumuliginosumTissueCulture

Zhou Shuang,Liang Wenwei,Wang Mingjie,Sun Langying,Cui Yuzhi

(Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences Berries Institute,Suiling, Heilongjiang 152204)

2017-07-04

中央引导地方科技发展专项(ZY16C05-11)

周双(1989-)，女，硕士，研究实习员，从事小浆果生物技术研究，E-mail：fengzhongxu@163.com。

S663.9

A

DOI.∶10.13268/j.cnki.fbsic.2017.05.006