一例蛋鸭黄病毒病诊治

刘波刘娜孔令静张栋宦者威陈月锋谷桂平杨俊青

（1，山东汇众兽医技术服务有限公司 250022；2，山东省动物疫病预防与控制中心 250022）

一例蛋鸭黄病毒病诊治

刘波1刘娜1孔令静1张栋2宦者威1陈月锋1谷桂平1杨俊青1

（1，山东汇众兽医技术服务有限公司 250022；2，山东省动物疫病预防与控制中心 250022）

为摸清临邑某蛋鸭场出现产蛋下降和死亡的原因，对病死鸭进行剖检，采取病变脏器组织，应用RT-PCR方法对4种病原进行实验室检测。检测结果显示：所采样品中，A型流感病毒、新城疫病毒、鸭瘟病毒均为阴性，黄病毒为阳性。结合临床症状、剖检病变及检测结果表明，引起此次鸭场发病的主要病原是黄病毒。

蛋鸭；产蛋下降；黄病毒；PT-PCR

自2010年春季以来，浙江、山东、江苏、安徽等省份鸭饲养场爆发了一种以蛋鸭、种鸭产蛋急剧下降、采食减少或废绝为特征的传染病，产蛋率从90%降到10%以下[1]。我国研究人员对其病原进行分离、形态学观察、理化特性测定、RT-PCR检测及序列分析明确该病原为黄病毒科的一个新成员[2]。该病原属于黄病毒科黄病毒属蚊媒病毒的恩塔亚病毒群，与坦布苏病毒亲缘关系最近，暂定为该病毒的一个分离株，故该病又称为鸭坦布苏病毒病。本病流行范围广，发病急且发病率高，但死亡率较低，临床应用多种药物均不能有效控制，给养鸭业造成重大经济损失。下面就某蛋鸭场为例进行综合诊断及探讨，为兽医工作者诊断此病提供一定的依据。

1 发病情况及临床症状

2016年12月，临邑某蛋鸭场养殖蛋鸭39000只，日龄130d，该鸭群出现不同程度的发病，产蛋量下降约3成。病鸭精神沉郁，采食量及饮水量均减少，零星死亡。部分患鸭不愿走路，反应迟钝，排绿色水样稀粪。个别严重的病鸭出现神经症状，站立不稳，瘫痪。

2 剖检变化

对病死鸭剖检发现，病变主要为卵泡变性、出血、坏死（图1)，肺出血，肝脏肿大，表面有大量出血点 （图2)，脾脏肿大、出血、坏死 （图3)，小肠环状肿胀 （图4)，输卵管无明显眼观病变，其他脏器无明显的眼观病变。

图1 卵泡出血、变性、坏死图

图2 肺脏出血、卵泡出血、变性

3 实验室检测

3.1 材料与方法

3.1.1 试剂及仪器

A型流感病毒通用型荧光RT-PCR检测试剂盒和新城疫病毒荧光RT-PCR检测试剂盒购自凯杰生物工程有限公司；鸭瘟病毒荧光PCR检测试剂盒购自生科尚仪有限公司；禽黄病毒核酸检测试剂盒购自武汉科前生物股份有限公司；Thermo高速冷冻离心机、生物安全柜、全自动核酸提取仪、荧光PCR仪、PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、移液器。

3.1.2 检测方法及步骤

无菌采集病死鸭的卵泡、脾脏、肺脏和气管等器官[3]。将脏器剪碎后，研磨并匀浆，反复冻融4次，置于4℃，8000r/min离心5min，取上清液0.3ml于离心管中，将离心管架插入全自动核酸提取仪中，提取核酸，做模板备用。病毒核酸的扩增按试剂盒说明进行操作。将A型流感病毒、新城疫病毒检测管置于荧光PCR仪中，进行反转录和扩增；将鸭瘟病毒检测管置于荧光PCR仪中，进行扩增；将黄病毒检测管按说明书进行反转录和扩增，电泳，最后进行凝胶成像系统观察。

图3 脾脏肿大 (A:肿大B:正常)

图4 小肠肿胀 （箭头所指处）

3.2 结果与分析

3.2.1 A型流感病毒、新城疫病毒RT-PCR和鸭瘟病毒PCR检测结果分析

A型流感病毒、新城疫病毒、鸭瘟病毒阳性对照Ct值分别为9.54、14.81、18.55，均呈S型特异性曲线，阴性对照Ct值均为0，样品Ct值均为0，如图5、图6所示，A型禽流感病毒、新城疫病毒、鸭瘟病毒检测结果均呈阴性，表明样品未感染上述3种病毒。

图5 A型流感病毒和新城疫病毒荧光RT-PCR

图6 鸭瘟病毒荧光PCR

图7 黄病毒RT-PCR结果

3.2.2 黄病毒RT-PCR检测结果分析

如图7所示，样品扩增后在488bp处出现一条与阳性对照大小一致的电泳条带，这表明该样品感染了黄病毒。

3.2.3 结果

结合临床症状、剖检变化以及实验室病毒RT-PCR检测结果，可以明确该蛋鸭场的发病原因是由鸭黄病毒所引起的。

4 讨论

（1)造成蛋鸭产蛋异常除了饲养管理和环境因素等诱因外，疾病感染是一个十分重要的影响因素[4]。有关引起种鸭和蛋鸭出现产蛋异常的病原报道日渐增多[5]，但该蛋鸭群A型流感病毒、新城疫病毒和鸭瘟病毒检测均呈阴性，而黄病毒检测结果为阳性。

（2)本病目前尚无有效治疗方法和免疫预防制剂，对于发病鸭群可使用清热解毒、增强机体免疫力的的中草药 （板蓝根、穿心莲、黄芪多糖等)，同时添加抗菌药物控制继发感染。徐可树等报道，氧氟沙星配合干扰素对黄病毒增殖具有抑制作用[6]。

（3)在鸭群管理方面，改善鸭舍的饲养环境、降低饲养密度，保证鸭舍温度、湿度和合理通风，为其健康创造有利条件。加强生物安全措施，定期消毒，尤其是各种生产用具和运输车辆以及种蛋的消毒。做好鸭场的卫生管理，垫料的消毒及处理、病死鸭的无害化处理等工作[7]。

[1]李玉峰,马秀丽,于可响,等.一种从鸭新分离的黄病毒研究初报[J].畜牧兽医学报,2011,42(6):885-891.

[2]唐维国,施少华,傅光华,等.一例蛋鸭黄病毒病的诊疗[J].中国家禽,2012,34(2)：52-53.

[3]曹贞贞,张存,黄瑜,等.鸭出血性卵巢炎的初步研究[J].中国兽医杂志,2010,46(12):3-6.

[4]万春和,施少华,程龙飞,等.一种引起种(蛋)鸭产蛋骤降新病毒的分离与初步鉴定[J].福建农业学报,2010,25(6):663-666.

[5]黄瑜,李文杨,程龙飞,等.种（蛋）鸭产蛋异常研究[J].福建畜牧兽医,2001,23(3):8.

[6]徐可树,邹丽.氧氟沙星叠氮胸苷单独及与干扰素合用对黄病毒增殖的影响[J].中华实验和临床病毒学杂志,2000,14(9):300.

[7]李玉峰.鸭黄病毒感染研究进展[J].中国家禽,2011,33(17):30-32.