MACC1及c-met在卵巢癌中的表达及临床意义

娄淑清，熊向前

MACC1及c-met在卵巢癌中的表达及临床意义

娄淑清，熊向前

目的 分析结肠癌转移相关基因1（MACC1）及c-met在卵巢癌中的表达及临床意义。方法 采用免疫组织化学法检测MACC1及c-met蛋白在卵巢癌中的表达情况，并分析其与临床病理特征的相关性。对78例卵巢癌患者采用电话、信件及门诊检查随访，进行生存分析。结果 MACC1及c-met蛋白在卵巢癌中的阳性表达率分别为78.21%和70.51%，MACC1及 c-met的表达呈正相关（r＝0.468，P＜0.01）。随访结果提示 MACC1和 c-met阳性患者生存率显著低于阴性患者（P＜0.05）。结论 MACC1及c-met蛋白可能参与了卵巢癌的发生和进展。

卵巢癌；结肠癌转移相关基因1；c-met；生存分析

Abstract：Objective To analyze expression and its clinical significance of metastasis associated in colon cancer 1（MACC1）and c-met in ovarian cancer. Methods Expression of MACC1 and c-met in ovarian cancer were detected by using immunohistochemical method，and its correlation with clinicopathological features were analyzed.Follow-up and survival analysis were carried out for 78 patients. Results Expression rate of MACC1 and c-met in ovarian cancer were 78.21%and 70.51%，respectively.Expression of MACC1 and c-met protein were positively correlated with ovarian cancer（r＝0.468，P＜0.01）.The follow-up results showed that positive patients survival rate of MACC1 and c-met were significantly lower than that of negative patients（P＜0.05）.Conclusion MACC1 and c-met proteins might be involved in the development and progression of ovarian cancer.

Key words：ovarian cancer；metastasis associated in colon cancer 1；c-met；survival analysis

卵巢癌为死亡率最高的恶性肿瘤，一般就诊时70%患者已处于晚期，而卵巢癌侵袭、转移和复发是导致患者生存率较低的重要原因［1］。目前其发病机制还不明确，可能与内分泌、遗传、环境相关。研究显示，结肠癌转移相关基因1（metastasis associated in colon cancer 1，MACC1）在结肠癌、肺癌、肝癌等恶性肿瘤中高表达，与肿瘤多种生物学行为密切相关［2］。而c-met为肝细胞生长因子酪氨酸激酶受体蛋白，与MAPK信号通路和 PI3K信号通路相关，可通过级联反应调节肿瘤细胞的增殖和凋亡［3］。卵巢癌MACC1蛋白、c-met蛋白与卵巢癌发生和进展的具体机制不明确［4］。为了探讨 MACC1及 c-met与卵巢癌的临床、病理及分子机制，本研究采用免疫组织化学方法检测卵巢癌组织中的MACC1及c-met蛋白水平，分析其与临床病理特征的相关性，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 临床治疗 收集2010年1月至2016年1月我院病理科存档的卵巢癌石蜡标本78例，年龄25～65（41.6±5.2）岁。术前均未接受激素治疗，且无其他肿瘤疾病。其中，淋巴结转移25例，无淋巴结转移53例；组织学分级：Ⅰ级16例，Ⅱ级29例，Ⅲ级33例；临床分期：Ⅰ期 42例，Ⅱ期 24例，Ⅲ期 12例。另收集35例术后标本的边缘，病理确诊为正常的卵巢组织。

1.2 主要试剂 兔抗人MACC1多克隆抗体（美国Sigma公司）；兔抗人c-met多克隆抗体（北京博奧森生物技术有限公司）；DAB显色试剂盒、SP免疫组化试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司）。

1.3 方法 标本均采用10%甲醛固定，常规脱水和石蜡包埋，连续切片，微波进行常规修复，采用常规免疫组织化学法进行染色，同时PBS液代替一抗制作阴性对照切片。

1.4 结果判定 MACC1和c-met均为胞质染色，部分胞膜染色，其中呈棕黄色颗粒状或片状为阳性细胞。双盲法读片，随机选取10个高倍视野，每个视野计数100个细胞。其中染色强度：无着色0分，浅黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分；阳性细胞百分比：阴性 0分，阳性细胞 ＜25%1分，25% ～50%2分，51%～75%3分，＞75%4分；两项指标积分相乘，乘积＞3为阳性。

1.5 随访情况 采用电话、信件及门诊检查进行随访，以手术治疗日期为随访起点，随访0.5～6 a。

1.6 统计学分析 采用SPSS 18.0统计学软件进行分析。MACC1和 c-met的阳性表达率比较采用 χ2检验，相关分析采用Spearman相关性检验，随访数据采用 log rank test检验，检验水准 α＝0.05。

2 结果

2.1 MACC1和 c-met在卵巢癌组织的表达MACC1在卵巢癌组织中的阳性表达率（78.21%，61／78）明显高于正常卵巢组织阳性表达率（5.71%，2／35）（χ2＝51.463，P＜0.01）。c-met在在卵巢癌组织中的阳性表达率（70.51%，55／78）明显高于正常卵巢组织阳性表达率（8.57%，3／35）（χ2＝48.253，P＜0.01）。

图1 MACC1及c-met蛋白在卵巢癌的表达 （SP，×200）

2.2 MACC1及c-met蛋白与卵巢癌临床病理特征MACC1及c-met蛋白表达与年龄、月经、组织类型均无明显相关性 （P＞0.05），而与组织学分级、临床分期、淋巴结转移、浸润程度有相关性（P＜0.05），见表 1。

表1 MACC1及c-met蛋白在卵巢癌中的表达与临床病理特征的关系 例（%）

2.3 MACC1与c-met相关性分析 卵巢癌组织中MACC1与c-met的表达具有明显的正相关性（rs＝0.468，P＝0.000 1），见表 2。

表2 MACC1与c-met相关性分析 例（%）

2.4 MACC1与卵巢癌预后 78例卵巢癌患者，5例失访，随访患者中，MACC1阳性患者生存率低于阴性者（χ2＝11.191，P＝0.001），生存曲线见图 2。

图2 卵巢癌MACC1蛋白表达生存曲线

2.4.2 c-met与卵巢癌预后的关系 78例卵巢癌患者，5例失访，随访患者中，c-met阳性患者生存率低于阴性者（χ2＝17.388，P＝0.000），生存曲线见图 3。

图3 卵巢癌c-met蛋白表达生存曲线

3 讨论

MACC1为HGF／c-met信号通路的调节因子，与结肠癌细胞的增殖、侵袭和转移关系密切，而且有报道MACC1与胃癌、肺癌和肝癌细胞的转移和预后相关［5-6］，说明MACC1可以作为评价恶性肿瘤转移和预后的标志物［7］。而 c-met为肝细胞生长因子的受体，对肿瘤组织生物学行为存在一定的影响，参与了肿瘤细胞的有丝分裂、迁移和形态的发生［8］。通过和部分癌基因产物和调节蛋白作用，降解肿瘤组织周围基质，促进肿瘤组织内血管的生成，影响肿瘤细胞增殖、分化［9］。通过 RNA干扰下调肿瘤细胞中MACC1蛋白水平，结果显示肿瘤细胞增殖及侵袭能力明显降低，这也提示卵巢癌的发生和进展与MACC1以及 c-met基因的激活相关［10］。

本研究结果，卵巢癌组织的MACC1和c-met表达率明显高于正常卵巢组织，与患者年龄、月经以及组织类型无相关性，而与组织学分级、临床分期、淋巴结转移以及浸润程度显著相关，提示两者可能参与了卵巢肿瘤的发生和进展。肿瘤组织学分级越低、临床分期越晚、浸润程度越高，且发生淋巴结转移，则MACC1和c-met蛋白表达性率越高［11］。而且MACC1和c-met阳性率较高的肿瘤患者生存时间短，并伴有预后不良，本研究结果中生存期越短的卵巢癌患者，MACC1和c-met蛋白表达明显增加。

研究显示，MACC1参与了肿瘤的侵袭和转移，可通过下游的HGF／c-met信号通路上调 c-met蛋白水平，调节肿瘤相关基因参与凋亡、侵袭以及血管的发生和卵巢癌的侵袭和转移［12］。而c-met位于细胞膜，为生长因子酪氨酸激酶跨膜受体家族［13］。HGF／c-met对其下游Grb2-Ras-MAPK信号通路具有一定的调节作用，高表达MACC1蛋白可激活 Grb2-Ras-MAPK信号通路，Grb2-Ras-MAPK信号通路又可以反馈上调MACC1基因的表达水平，这也提示HGF／c-met信号通路和Grb2-Ras-MAPK信号通路存在正反馈环路调节通路，对侵袭和转移具有一定的影响［14］。本研究结果显示，卵巢癌组织中的 MACC1蛋白和 c-met蛋白表达存在明显的相关性，提示MACC1基因可能通过c-met途径促进肿瘤细胞侵袭和转移，其中MACC1蛋白可以有效地激活HGF，有活性的HGF与 c-met结合，激活 HGF／c-met信号通路［15］，并导致磷酸化的c-met激活酪氨酸激酶，级联激活 P13K／Akt、Wnt／β-catenin以及 MAPK信号多条信号通路，调节卵巢癌组织细胞的增殖、分化和侵袭。

综述以上，MACC1及 c-met蛋白在卵巢癌中阳性表达明显高于正常卵巢组织，而且 MACC1及 cmet在卵巢癌中的表达呈正相关。随访结果显示MACC1和c-met阳性患者生存率显著低于阴性患者，因此MACC1及c-met蛋白可能参与了卵巢癌的发生和进展。

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Expression and Its Clinical Significance of MACC1 and c-met in Ovarian Cancer

LOU Shu-qing，XIONG Xiang-qian
（Obstetrics and Gynecology，People′s Hospital of Shaoling，Luohe 462000，China）

R363.1；R737.31

A

1672-688X（2017）03-0175-04

10.15926／j.cnki.issn1672-688x.2017.03.005

2017-04-11

漯河市召陵区人民医院妇产科，河南漯河462000

娄淑清（1980—），女，河南漯河人，主治医师，从事妇产科临床工作。

熊向前，女，副主任医师，E-mail：125020175＠qq.com