不同沙棘果渣添加水平对公绵羊睾丸和附睾抗氧化性的影响
2017-10-10韩晓强张春香张文佳项斌伟张建新
韩晓强,张春香,张文佳,项斌伟,张建新*
(1.山西农业大学 动物科技学院,山西 太谷 030801;2.山西省右玉县畜牧局,山西 右玉 037200)
不同沙棘果渣添加水平对公绵羊睾丸和附睾抗氧化性的影响
韩晓强1,张春香1,张文佳2,项斌伟2,张建新1*
(1.山西农业大学 动物科技学院,山西 太谷 030801;2.山西省右玉县畜牧局,山西 右玉 037200)
[目的]研究饲喂不同沙棘果渣添加水平的日粮对公绵羊睾丸与附睾抗氧化性的影响。[方法]选用24只5月龄,体重(25.00±1.00) kg健康的杜泊×小尾寒羊杂交公羔,随机分为4组,按照分组依次饲喂添加不同水平沙棘果渣(0%、10%、20%、30%)的日粮,试验期65 d。试验结束后采集公绵羊的睾丸和附睾组织,并对组织抗氧化相关基因mRNA和蛋白的表达进行研究。[结果]睾丸组织中,30%沙棘果渣添加组GPx4 mRNA的相对表达量相较于10%添加组以及对照组显著降低(P<0.05)。附睾头组织中,30%沙棘果渣添加组Cu-ZnSODmRNA的相对表达量显著低于10%和20%沙棘果渣添加组(P<0.05);30%沙棘果渣添加组GPx4 mRNA的相对表达量相较于对照组显著降低(P<0.05)。附睾体组织中,30%沙棘果渣添加组CATmRNA的相对表达量相较于10%添加组显著降低(P<0.05)。附睾尾组织中,20%沙棘果渣添加组Cu-ZnSODmRNA的相对表达量相较于30%添加组与对照组显著升高(P<0.05);30%沙棘果渣添加组Cu-ZnSODmRNA的相对表达量相较于10%添加组显著降低(P<0.05)。20%沙棘果渣添加组附睾头Nrf2与附睾尾Cu-ZnSOD蛋白表达量显著高于10%和30%沙棘果渣添加组。[结论]日粮中添加10%和20%沙棘果渣可以不同程度促进公绵羊睾丸和附睾抗氧化相关基因mRNA的表达,而添加30%沙棘果渣会降低睾丸GPx4、附睾头Cu-ZnSOD和GPx4、附睾体CAT、附睾尾Cu-ZnSODmRNA以及附睾头Nrf2和附睾尾Cu-ZnSOD蛋白的表达量。因此,25 kg杜泊×小尾寒羊杂交公羔日粮中添加30%沙棘果渣为过量添加水平。
沙棘果渣;睾丸;附睾;抗氧化;绵羊;mRNA
Abstract:[Objective]The purpose of this study was to investigate the effects of dietary Sea buckthorn Pomace on antioxidation in testis and epididymis of ram.[Methods]A total of 24 Dopor×Small Tail Han Sheep ram lambs (5 month old, 25.00±1.00 kg)were randomly selected and equally divided into 4 groups, and received diet containing different level of sea buckthorn pomace (0%, 10%, 20%, 30%). At the end of the trial (65 d), the samples of testis and epididymis were collected and the mRNA and protein expression were detected.[Results]The results were as follows: The mRNA expression ofGPx4 in testis was significantly lower in 30% group than that in control group and 10% supplementation group (P< 0.05). Compared with the 10% and 20% groups, the mRNA expression ofCu-ZnSODin 30% group was significantly lower in caput epididymidis (P<0.05). The mRNA expression ofGPx4 in caput epididymidis was significantly lower in 30% supplementation group than this in control group (P<0.05). Compared with the group with 10% sea buckthorn pomace, the mRNA expression ofCATin 30% group was significantly lower in corpus epididymidis (P<0.05). The mRNA expression ofCu-ZnSODin cauda epididymidis was significantly lower in control group and 30% group than that in 20% sea buckthorn pomace supplementation group (P<0.05). In addition, compared with 10% sea buckthorn pomace addition group, the mRNA expression ofCu-ZnSODin 30% group was significantly lower in cauda epididymidis (P<0.05). The protein expression of Nrf2 in caput epididymal and Cu-ZnSOD in the cauda epididymal were significantly higher in 20% group than that in 10% group and 30% group (P<0.05).[Conclusion]The results indicated that supplementation of 10% and 20% of dietary sea buckthorn pomace could improve the mRNA expression of antioxidation related genes expression in testis and epididymis of ram, whereas supplementation of 30% sea buckthorn pomace reduced the mRNA expression ofGPx4 in testis,Cu-ZnSODandGPx4 in caput epididymidis,CATin corpus epididymidis andCu-ZnSODin cauda epididymidisa and the protein expression of Nrf2 in caput epididymidis and Cu-ZnSOD in cauda epididymidisa. Therefore, dietary 30% sea buckthorn pomace is not optimal.
Keywords:Sea buckthorn pomace, Testis, Epididymis, Antioxidation, Ram, mRNA
沙棘作为一种胡颓子科的植物,含有丰富的生物活性物质,如维生素、多不饱和脂肪酸、类胡萝卜素、植物甾醇、有机酸、黄酮类以及一些必需氨基酸等,具有调节心血管、抗氧化、增强免疫、抗肿瘤及抗衰老等众多积极功能[1,2]。其中,黄酮类物质与沙棘的抗氧化功能密切相关。Geetha等[3]以铬诱导氧化损伤的雄性白鼠为模型动物,证明了100和250 mg·kg-1BW浓度的沙棘叶提取物对其具有显著的保护作用。杜鹃等[4]研究表明对于由酒精造成的小鼠急性睾丸组织损伤,灌服沙棘匀浆可以起到保护作用。
山西省沙棘的种植量大,广泛制造沙棘果汁及其他沙棘产品的同时,势必会产生大量的沙棘果渣等下脚料。已有研究中,沙棘果渣主要在蛋鸡[5]、肉鸡[6]及育肥猪[7]的日粮中添加,研究对动物机体生长性能、肉质、血清生化指标及肌肉脂肪酸等指标的影响。另有研究指出,沙棘果渣中提取的总黄酮具有良好的抗氧化性[8,9]。因此,本试验使用添加不同水平沙棘果渣的饲料来饲喂杜泊×小尾寒羊杂交公羔,观察其对公绵羊睾丸与附睾组织抗氧化相关基因mRNA和蛋白表达量的影响,为今后沙棘果渣作为绵羊非常规饲料潜能的发掘提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验日粮
沙棘果渣购自山西省朔州市右玉县沙棘厂,自然晾干后使用。以NRC(2007)中体重25 kg,日增重200 g公羔羊营养需要为基础,设计本试验所需的基础日粮;再分别按照10%、20%、30%的沙棘果渣等比例替代谷秸设计试验组日粮,4种试验日粮均制备为颗粒饲料,表1为其相应组成成分。
1.2 试验设计
选取5月龄的杜泊×小尾寒羊杂交公羔24只,其体重为(25.00±1.00)kg。按照单因素完全随机的方法将选取的绵羊分为4组,各组均为混合饲养,严格按照对照组(0%)、试验组(10%、20%、30%)的分组设计饲喂对应日粮。
1.3 动物管理
2015年5-8月期间进行为期65 d的动物饲养试验,包括15 d预试期与50 d正试期。由山西省右玉县宏宇牧业有限公司提供试验基地。试验前将羊舍清扫并进行严格消毒,同时对选取的试验羊严格检疫,之后使用小反刍兽疫、羊痘以及口蹄疫疫苗对检疫合格的试验羊进行免疫接种。
在预试期对选取的试验绵羊进行明确的编号并随机分组,与此同时对绵羊进行驱虫。正试期所有试验羊均为自由采食和饮水,每日分别于8:00与18:00严格按照分组饲喂相对应的日粮2次,并对每只羊每天的采食量进行记录。
1.4 睾丸及附睾组织的采集
于饲养试验完成当天16:00禁食禁水,次日屠宰时采集睾丸组织,去除睾丸周围结缔组织并分离附睾后取一侧睾丸组织和附睾组织剪成小块,其中附睾按附睾头、体、尾3部分进行采集,锡纸包裹后做好标记并投入液氮,之后-80 ℃存放以便使用。
1.5 测定指标与方法
1.5.1 抗氧化相关基因选取
对采集的睾丸和附睾组织中过氧化氢酶(CAT)、核转录因子Nrf2、铜锌超氧化物歧化酶(Cu-ZnSOD)以及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)等基因mRNA和蛋白的表达量进行研究。并选取RPL13和β-actin分别作为mRNA和蛋白测定的内参基因。
1.5.2 抗氧化基因mRNA表达量检测
液氮中分别研磨睾丸与附睾头、体、尾组织后,按照Trizol法对各个组织的总RNA进行提取,测定其完整性,并检测浓度。然后按照反转录试剂盒PrimeScriptTM RT reagent Kit With gDNA Eraser 的方法合成 cDNA,检测并调整cDNA浓度一致后,再通过实时荧光定量PCR,以cDNA为模板进行扩增,所得结果按照2-ΔΔCT法计算。表2为试验所需目的基因与内参基因的引物参数。
表1 日粮成分及其营养水平Table 1 The compositions and nutrient levels of experiment diets
注:每千克日粮中维生素以及微量元素的含量依次为:维生素A 20000 IU; 维生素D 4000 IU; 维生素E 400 IU; 铜 14 mg; 铁 50 mg; 锰 40 mg; 硒 0.3 mg; 碘 0.5 mg; 钴 0.2 mg。表中日粮各营养成分除消化能以外都是实测值。
Note: The contents of vitamins and trace elements per kilogram of diet: VA 20000 IU; VD 4000 IU; VE 400 IU; Cu 14 mg; Fe 50 mg; Mn 40 mg; Se 0.3 mg; I 0.5 mg; Co 0.2 mg; Beside DE, the compositions of diets were calculated values.
1.5.3 抗氧化相关蛋白表达量检测
分别称取研磨好的睾丸及附睾样品,根据实际所取组织样品重量按1∶10加入相应体积的蛋白裂解液来提取总蛋白。取分装的蛋白样品进行SDS-PAGE电泳后,利用考马斯亮蓝染色确认成功提取蛋白。
通过以下步骤进行目的和内参蛋白的检测:按顺序配制分离胶和沉积胶,凝固后按顺序点样,进行SDS-PAGE电泳,利用电泳后的分离胶转膜1 h。之后封闭1 h,再加入相应一抗孵育,4 ℃过夜。次日漂洗后加入相对应的二抗室温孵育1 h,漂洗之后使用ECL显色液进行蛋白免疫印迹曝光,获取结果图像并保存。使用Image Lab软件分析曝光图像中目的蛋白与β-actin蛋白含量,根据公式(目的蛋白的相对表达量=目的蛋白含量/β-actin蛋白含量)计算结果。
1.6 数据处理与统计分析
将试验所得数据在Excel 2007中进行初步的整理并按照公式计算,之后把计算获得的数据通过SPSS 17.0的单因素方差分析,同时采用LSD法进行多重比较,P<0.05为判断差异显著的标准。
表2引物参数
Table2 Parameters of Primer
基因Genename引物序列(5'-3')Primersequence(5'-3')产物大小/bpProductsizeRPL13F:GCAAAAAGGGCCAAGGAAGCR:CAAAGGTCAGACACACCCCA155Nrf2F:TGTGGAGGAGTTCAACGAGCR:CGCCGCCATCTTGTTCTTG88GPx4F:TCGCTGCTGGCTATAACGTCR:GACCATACCGCTTCACCACA189CatalaseF:GAGCCCACCTGCAAAGTTCTR:CTCCTACTGGATTACCGGCG148Cu-ZnSODF:GGAGACCTGGGCAATGTGAAR:CCTCCAGCGTTTCCAGTCTT182
2 结果与分析
2.1日粮添加沙棘果渣对绵羊睾丸和附睾抗氧化相关基因mRNA表达量的影响
2.1.1 日粮添加沙棘果渣对绵羊睾丸抗氧化相关基因mRNA表达量的影响
图1 A、1 B和1 C中,10%与20%沙棘果渣添加组中CAT、Nrf2、Cu-ZnSODmRNA的相对表达量相较于对照组具有升高趋势(P>0.05),而沙棘果渣添加量达到30%时睾丸CAT和Nrf2 mRNA的相对表达量均降低(P>0.05);图1 D中30%沙棘果渣添加组睾丸中GPx4 mRNA的相对表达量低于10%添加组和对照组(P<0.05),而10%与20%沙棘果渣添加组睾丸中GPx4 mRNA的相对表达量相较于对照组无明显变化(P>0.05)。
图1 各试验组绵羊睾丸中抗氧化相关基因mRNA的表达量Fig.1 The mRNA expression of antioxidant related gene in ram testis from each group注:柱状图上标的小写字母不同表明其差异显著(P<0.05),上标相同字母表明差异不显著(P>0.05)。图2~图8同。Note: In the histogram, different lowercase letter susperscripts indicate significant difference(P<0.05), the same lowercase letter susperscripts indicate no significant difference(P>0.05). Figure 2 to Figure 8 were as the same.
图2 各试验组绵羊附睾头中抗氧化相关基因mRNA的表达量Fig.2 The mRNA expression of antioxidant related gene in ram caput epididymidis from each group
图3 各试验组绵羊附睾体中抗氧化相关基因mRNA的表达量Fig.3 The mRNA expression of antioxidant related gene in ram corpus epididymidis from each group
2.1.2 日粮添加沙棘果渣对绵羊附睾头抗氧化相关基因mRNA表达量的影响
图2 A和图2 B中,沙棘果渣的不同添加水平下CAT和Nrf2 mRNA的相对表达量在各组别间均无显著差异(P>0.05)。图2 C中30%沙棘果渣添加组Cu-ZnSODmRNA的相对表达量显著低于10%和20%沙棘果渣添加组(P<0.05);相对于对照组,10%和20%沙棘果渣添加组均有升高趋势,但没有显著差异(P>0.05),沙棘果渣添加量达到30%反而下降(P>0.05)。图2 D中,30%沙棘果渣添加组GPx4 mRNA的相对表达量相较于对照组显著降低(P<0.05),而其余各组别无显著差异(P>0.05)。
2.1.3 日粮添加沙棘果渣对绵羊附睾体抗氧化相关基因mRNA表达量的影响
图3 A中30%沙棘果渣添加组CATmRNA的相对表达量显著低于10%添加组(P<0.05);相较于对照组,10%和20%沙棘果渣添加组CATmRNA的相对表达量有不同程度的上升趋势,30%添加组CATmRNA表达量反而降低,但均无明显差异(P>0.05)。而图3 B、3 C和3 D中,10%沙棘果渣添加组Nrf2、Cu-ZnSOD和GPx4 mRNA的相对表达量相较于对照组具有升高趋势(P>0.05),20%沙棘果渣添加组中Nrf2和GPx4 mRNA的相对表达量相较于对照组均有所上升(P>0.05);而沙棘果渣添加量达到30%时附睾体Nrf2、Cu-ZnSOD和GPx4 mRNA的相对表达量均降低(P>0.05)。
2.1.4 日粮添加沙棘果渣对绵羊附睾尾抗氧化相关基因mRNA表达量的影响
图4 A、4 B和4 D中,沙棘果渣的不同添加水平下CAT、Nrf2和GPx4 mRNA的相对表达量在各组别间均无显著差异(P>0.05)。图4 C中20%沙棘果渣添加组中Cu-ZnSODmRNA的相对表达量相较于对照组显著升高(P<0.05);10%和20%添加组Cu-ZnSODmRNA的相对表达量显著高于30%添加组(P<0.05),而30%添加组相较于对照组Cu-ZnSODmRNA的相对表达量仅有降低趋势 (P>0.05)。
图4 各试验组绵羊附睾尾中抗氧化相关基因mRNA的表达量Fig.4 The mRNA expression of antioxidant related gene in ram cauda epididymidis from each group
2.2日粮添加沙棘果渣对绵羊睾丸和附睾抗氧化相关蛋白表达量的影响
2.2.1 日粮添加沙棘果渣对绵羊睾丸抗氧化相关蛋白表达量的影响
图5 A、5 B、5 C和5 D中,沙棘果渣的不同添加水平下各组别间CAT、Nrf2、Cu-ZnSOD及GPx4 蛋白的相对表达量均无显著差异(P>0.05)。
2.2.2 日粮添加沙棘果渣对绵羊附睾头抗氧化相关蛋白表达量的影响
图6 A、6 C和6 D中,沙棘果渣的不同添加水平下CAT、Cu-ZnSOD和GPx4蛋白的相对表达量在各组别间均无显著差异(P>0.05)。图6 B中20%沙棘果渣添加中Nrf2 蛋白的相对表达量显著高于10%和30%添加组(P<0.05),与对照组相比有升高趋势却无显著差异(P>0.05)。
2.2.3 日粮添加沙棘果渣对绵羊附睾体抗氧化相关蛋白表达量的影响
图7 A、7 B、7 C和7 D中,沙棘果渣的不同添加水平下CAT、Nrf2、Cu-ZnSOD、GPx4蛋白的相对表达量在各组别间均无显著差异(P>0.05)。
2.2.4 日粮添加沙棘果渣对绵羊附睾尾抗氧化相关蛋白表达量的影响
图8 A、8 B和8 D中,沙棘果渣的不同添加水平下CAT、Nrf2和GPx4蛋白的相对表达量在各组别间均无显著差异(P>0.05);图8 C中20%沙棘果渣添加组Cu-ZnSOD 蛋白的相对表达量显著高于10%和30%添加组(P<0.05),与对照组相比有升高趋势却无显著差异(P>0.05)。
3 讨论
沙棘拥有丰富的营养物质,并有多种药理作用,其不同部位及提取物均能有效提高动物组织器官及机体的抗氧化能力。有研究表明,沙棘可以有效缓解由于急性酒精摄入造成的小鼠肝脏和脑组织的氧化应激[10];沙棘籽渣以及大果沙棘中提取的黄酮可以分别提高更年期大鼠和糖尿病小鼠机体的抗氧化能力[11,12]。
调控动物机体的抗氧化性能一般通过改变抗氧化相关酶的活性、数量以及其他抗氧化物质实现。动物机体中存在CAT、SOD及GPx等多种抗氧化酶,可以有效的清除动物机体产生的活性氧以及氧化产物。机体产生的O2-首先需要SOD催化生成H2O2,而其产生的H2O2同机体代谢产生的H2O2均通过CAT和GPx催化转化为对机体无负面影响的H2O,从而保护细胞及机体免受氧化损伤。SOD和GPx基因家族在不同组织器官中的含量各不相同,而睾丸组织中含量较多的为Cu-ZnSOD和GPx4[13,14],并且其在附睾中亦有表达。
图5 各试验组绵羊睾丸中抗氧化相关蛋白的表达量Fig.5 The expression of antioxidant related protein in ram testis from each group
图6 各试验组绵羊附睾头中抗氧化相关蛋白的表达量Fig.6 The expression of antioxidant related protein in ram caput epididymis from each group
图7 各试验组绵羊附睾体中抗氧化相关蛋白的表达量Fig.7 The expression of antioxidant related protein in ram corpus epididymis from each group
图8 各试验组绵羊附睾尾中抗氧化相关蛋白的表达量Fig.8 The expression of antioxidant related protein in ram cauda epididymis from each group
国内外均有研究表明,沙棘果渣提取的总黄酮具有良好的抗氧化性[8,9],但其对动物睾丸和附睾mRNA的影响研究却很少见。在日粮中添加有抗氧化性能的物质,可以影响动物睾丸mRNA的表达量。葡多酚和槲皮素的抗氧化性能已经得到广泛的认识,前者是葡萄皮渣中的一种有效成分,公绵羊饲喂添加适量葡萄皮渣的日粮,能够有效提高其睾丸中Cu-ZnSODmRNA的相对表达量,以缓解活动空间造成的氧化应激[15]。后者为一种黄酮类化合物,可以增强大鼠睾丸支持细胞中GSH-Px、GR、GST和SOD-1 mRNA的表达量[16]。本研究中,相较于对照组,日粮中添加20%的沙棘果渣,显著增强了附睾尾Cu-ZnSODmRNA的表达量,结果与以上研究基本一致。
不同添加水平的抗氧化物质对动物机体产生的影响程度不同。动物静脉注射不同剂量的外源性抗氧化剂可以提高血液中CAT、GSH-Px基因表达水平,其效果随剂量增大而提高[17]。黄晶等研究也表明,仅中、高水平的沙棘提取物可以增强小鼠心肌组织SODmRNA的表达量,并且表现为高水平组表达量高于中水平组[18]。而沙棘在不同动物中的添加水平是有很大差别的,并且沙棘果渣成分复杂,不同的添加水平对动物机体的影响也会有所不同。本试验中,公绵羊睾丸和附睾组织中抗氧化相关基因表达量并未与沙棘果渣添加剂量呈正相关变化,20%沙棘果渣添加组附睾尾中Cu-ZnSOD mRNA的表达量有效提高,而其余10%与20%沙棘果渣添加组中睾丸和附睾抗氧化相关mRNA表达量仅有不同程度的升高趋势;然而,30%沙棘果渣添加组中附睾头与睾丸中GPx4 mRNA的相对表达量、附睾头与附睾尾中的Cu-ZnSODmRNA相对表达量以及附睾体中CATmRNA的相对表达量反而显著降低。其中,睾丸与附睾头GPx4 mRNA的相对表达量相较于对照组显著降低。由此看出,绵羊日粮中添加适宜的沙棘果渣可以不同程度的提高睾丸和附睾组织抗氧化相关基因mRNA的表达量,而沙棘果渣的添加水平过量反而会降低其表达量。
转录因子Nrf2在细胞、组织、器官中起重要的抗氧化作用,其对下游靶基因的调控是通过信号通路Keap1-Nrf2-ARE来实现。Nrf2激活后可以调控下游基因CAT、Cu-ZnSOD、GPx4的表达[19,20]。研究表明,沙棘提取物预处理的细胞,可以激活Nrf2 mRNA的表达,经百草枯处理后可有效诱导其靶基因GPx1、CAT、GST等表达[21]。此外,抗氧化剂可以抑制Nrf2与Keap1的正常解离,从而降低Nrf2 mRNA的表达量[22]。本试验中,睾丸与附睾各组别间Nrf2 mRNA相对表达量均没有显著变化,但30%沙棘果渣添加组睾丸与附睾中Nrf2 mRNA表达量均有降低的趋势,可能与其他抗氧化基因表达量降低有关,而其具体的机制需要更深层次的研究。
有报道指出,添加具有抗氧化性的物质可以提高睾丸抗氧化相关蛋白的表达。在滩羊日粮中添加不同剂量的维生素E可以显著增加GPx3和GSTα1 mRNA和蛋白的表达[23]。而日粮中添加不同水平的葡萄皮渣可以不同程度的提高单栏饲养条件下公绵羊睾丸和附睾中CAT、Cu-ZnSOD、GPx4以及Nrf2蛋白的表达量[15]。本研究中,20%沙棘果渣添加组附睾头Nrf2与附睾尾Cu-ZnSOD蛋白表达量显著高于10%和30%沙棘果渣添加组,并且附睾尾中20%沙棘果渣添加组Cu-ZnSODmRNA的表达量显著高于对照组和30%添加组,相较于10%沙棘果渣添加组有升高趋势,与附睾尾中Cu-ZnSOD蛋白表达量变化基本一致。而其他蛋白表达量的变化并未与mRNA的表达量相一致,可能是由于在mRNA翻译为蛋白的过程中存在转录后调控等调控机制,其可能会促进蛋白的表达,也可能会抑制蛋白的表达,从而导致蛋白的表达量并不一定与mRNA的表达量相一致。综合沙棘果渣对绵羊睾丸和附睾mRNA和蛋白表达量的影响,可以得出30%添加水平为过量添加。
4 结论
日粮中添加10%和20%沙棘果渣可以不同程度促进公绵羊睾丸和附睾组织中抗氧化相关基因mRNA的表达,而添加30%沙棘果渣会降低睾丸GPx4、附睾头Cu-ZnSOD和GPx4、附睾体CAT、附睾尾Cu-ZnSODmRNA以及附睾头Nrf2和附睾尾Cu-ZnSOD蛋白的表达量。因此,25 kg杜泊×小尾寒羊杂交公羔日粮中30%沙棘果渣为过量添加水平。
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(编辑:马荣博)
Effectsofsupplementationofdifferentseabuckthornpomacelevelsonantioxidationintestisandepididymisofram
Han Xiaoqiang1, Zhang Chunxiang1, Zhang Wenjia2, Xiang Binwei2, Zhang Jianxin1*
(1.CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine,ShanxiAgriculturalUniversity,Taigu030801,China; 2.AnimalHusbandryBureauofYouyuCounty,Youyu037200,China)
S826
A
1671-8151(2017)10-0733-10
2017-05-04
2017-06-29
韩晓强(1991-),男(汉),山西交城人,硕士研究生,研究方向:营养对繁殖性能影响
*通信作者:张建新,教授,博士生导师,Tel:13935439778;E-mail: ypzjx@126.com
国家现代肉羊技术体系专项(CARS-39)