顶空毛细管气相色谱法测定硫酸特布他林有机溶剂残留

李伟强，李 继，王荪璇，李 霞

（1．兵器工业卫生研究所521医院，陕西 西安 710065； 2．陕西省食品药品检验所，陕西 西安 710065）

顶空毛细管气相色谱法测定硫酸特布他林有机溶剂残留

李伟强1，李 继2，王荪璇2，李 霞2

（1．兵器工业卫生研究所521医院，陕西 西安 710065； 2．陕西省食品药品检验所，陕西 西安 710065）

目的建立测定硫酸特布他林原料药中3种有机溶剂残留量的气相色谱法。方法 采用顶空毛细管气相色谱法，以1%二甲亚砜水溶液为溶剂，DB－624型毛细管柱（30．0m×320 m，1．8 m），氮气为载气，氢火焰离子化检测器（FID），柱温采用程序升温。结果 甲醇、异丙醇与甲苯3种有机溶剂均达到了完全分离，在考察的质量浓度范围内线性关系均良好，最低检测限分别为2．4，2．6，0．8 g／m L，高、中、低3种质量浓度的回收率均大于98%。结论 该方法灵敏度、准确度均达到有机溶剂残留量的检测要求，可用于硫酸特布他林中甲醇、异丙醇与甲苯残留的检测和分析。

硫酸特布他林；有机溶剂残留；顶空毛细管气相色谱法；质量控制

Abstract：Ob jective To establish a headspace capillary gas chromatography method for simultaneously determining the residual organic solvents in terbutaline sulfate．M ethods The headspace capillary gas chromatography method was adopted with 1% aqueous solution of DMSO as the solvent．The DB－624 capillary column（30．0 m×320μm，1．8μm）was adopted with N2used as the carrier gas．Temperature programming was used for column temperature by FID detector．Resu lts The 3 residual organic solvents（methanol，isopropanol，methylbenzene）were completely separated．A good linearity in the experimental concentration was shown．The limit of detection was 2．4，2．6 and 0．8μg／mL．The average recoveries of 3 kinds of high，medium and low concentrations were all more than 98%．Conclusion The sensitivity and accuracy of this method are up to the requirement for the detection of residual organic solvents，which can be used for the detection and analysis of 3 residual solvents（methanol，isopropanol and toluene）in terbutaline sulfate．

Key words：terbutaline sulfate；residual organic solvent；headspace capillary gas chromatography；quality control

硫酸特布他林的化学名为（±）α－[（叔丁氨基）甲基]－3，5－二羟基苯甲醇硫酸盐（2∶1），为选择性 β2受体激动剂。因其能舒张支气管平滑肌并解除其痉挛，且对心脏兴奋作用较小，临床广泛用于治疗支气管哮喘、慢性支气管炎、肺气肿和其他肺部疾病引起的支气管痉挛[1－3]。目前，国内外文献报道大多为硫酸特布他林的合成[4]、含量测定[5]、有关物质测定[6]等，对其合成中使用的有机溶剂残留的控制尚未见报道。本研究中的硫酸特布他林在药品合成过程中使用了甲醇、异丙醇和甲苯等有机溶剂。根据国际人用药品注册技术协调会（ICH）对有机溶剂残留量测定的指导原则[7]，遵循2015年版《中国药典（四部）》“残留溶剂测定法”[8]及相关研究[9－15]，结合企业提供的生产工艺，采用顶空气相色谱法，以1%二甲亚砜水溶液溶解样品，同时测定工艺合成中涉及的甲醇、异丙醇和甲苯等3种有机溶剂残留，效果满意。现报道如下。

1 仪器与试药

1．1 仪器

Agilent6890N型气相色谱仪，氢火焰离子化检测器（FID），ChemStation色谱工作站(美国 Agilent公司)；SPB－3型全自动空气源（北京中惠普分析技术研究所）；赛多利斯BS－224s型电子分析天平（精度为0．1mg）；Millipore超纯水机(美同Millipore公司)。

1．2 试药

硫酸特布他林（印度Shimoga Chemicals公司，批号分 别 为 TBS／051／13－14，TBS／052／13－14，TBS／053／13－14）；甲醇、异丙醇、甲苯（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）；二甲基亚砜（DMSO，色谱纯，德国Merck公司）；水（自制高纯水）。

2 方法与结果

2．1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：Agilent DB－624型毛细管柱（30．0 m×320μm，1．8μm）；载气：高纯氮；流速：1．5 m L／min；分流比：10∶1；程序升温：起始柱温40℃，保持2min后，以5℃ ／min升温至70℃，再以20℃ ／min升温至200℃，保持10min；进样口温度：200℃，检测器温度：220℃；顶空平衡温度：85℃，平衡时间：30min，顶空定量环体积：1m L，定量环温度：95℃，传输线温度：105℃。

2．2 溶液制备

称取甲醇、异丙醇和甲苯各适量，精密称定，置同一25 m L容量瓶中，以1%DMSO水溶液为溶剂制成每1mL中含甲醇30．04mg、异丙醇50．50mg、甲苯8．94mg的溶液，作为混合对照品贮备液Ⅰ；精密移取该溶液5mL至50mL容量瓶中，加1%DMSO水溶液稀释至刻度，制成每1mL中含甲醇3．004mg、异丙醇5．050mg、甲苯0．894mg的混合对照品贮备液Ⅱ。精密量取对照品贮备液Ⅱ5mL至50mL容量瓶中，加1%DMSO水溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

取硫酸特布他林样品1．0 g，精密称定，置10mL容量瓶中，用1%DMSO水溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

2．3 方法学考察

专属性试验：精密量取对照品溶液、空白溶剂及供试品溶液各5 m L，分别置20 m L顶空瓶中，密封，按拟订色谱条件进样分析，记录色谱图，见图1。可知，所建方法的专属性良好，各组分均完全分离，相邻色谱峰的分离度均大于1．5，理论板数均不低于5 000。

线性关系考察：精密量取对照品贮备液Ⅰ0．1，0．5，1．0，1．5，2．0 m L，分别置100m L容量瓶，用1%DMSO水溶液为溶剂稀释至刻度，摇匀，得标准曲线系列溶液。取上述溶液各5m L，分别置20 m L顶空瓶中，密封。按拟订色谱条件进样分析，记录色谱图，以各组分峰面积（Y）为纵坐标、质量浓度（X）为横坐标进行线性回归。结果见表1。

精密度试验：量取同一对照品溶液5m L，置20m L顶空瓶中，加盖，密封，按拟订色谱条件，连续进样5次，测定，记录色谱图。结果甲醇、异丙醇及甲苯峰面积的RSD分别为1．72%，2．75%和1．43%（n＝5），表明仪器精密度良好。

重复性试验：取同一批号的样品（批号TBS／051／13－14），依法制备6份供试品溶液，按拟订条件进样分析。结果异丙醇的平均含量为0．066%，RSD为3．80%（n＝6），其他溶剂均未检出，表明方法重复性良好。

稳定性试验：取同一对照品溶液，分别于0，2，4，8，12，16，20，24 h时进样测定。结果甲醇、异丙醇及甲苯峰面积的 RSD值分别为0．91%，1．52%和2．46%（n＝8），表明供试品溶液在24 h内稳定。

图1 气相色谱图

表1 回归方程及线性范围（n＝6）

定量限与检测限确定：逐步稀释对照品溶液，以信噪比（S／N）≥3确定检测限，以 S／N≥10确定定量限。结果甲醇、异丙醇及甲苯的检测限分别为2．4，2．6，0．8μg／m L，定量限分别为7．2，7．8，2．4μg／m L。

加样回收试验：称取已知残留溶剂含量的供试品（批号为TBS／051／13－14）约0．5 g，精密称定，共9份，置10 mL容量瓶中，分别精密加入混合对照品贮备液Ⅱ0．8，1．0，1．2 m L，各3份，以1%DMSO水溶液稀释至刻度，摇匀，制得低、中、高 3种质量浓度的样品溶液。再精密量取上述溶液各5mL分别置20mL顶空瓶中，密封，按拟订色谱条件进样测定，计算回收率。结果见表2。

2．4 样品测定

依法制备供试品溶液，按拟订色谱条件进样分析，按外标法计算各有机溶剂残留量。结果见表3。

表2 甲醇、异丙醇和甲苯加样回收试验结果

表3 样品中残留溶剂测定结果（n＝3）

3 讨论

试验中比较了 DMSO和 N，N－二甲基甲酰胺（DMF）2种有机溶剂，结果DMSO无论对样品还是对照品的溶解性均良好，且对主成分的测定无干扰。同时，优化了DMSO的浓度，结果1%DMSO水溶液效果最好。

试验中考察了DB－1型与DB－624型2种不同极性的毛细管柱，结果在非极性的DB－1型毛细管柱中甲醇和异丙醇的分离效果差，且峰形拖尾较严重。当使用中极性的DB－624型色谱柱时，各组分峰形良好，分离度满足检测需要。故最终选择DB－624型毛细管色谱柱，顶空进样法，10∶1的分流比测定，结果各待测组分均能达到有效分离，峰形良好。

药品中有机溶剂的残留量虽有较多报道，但不同药品测定的种类和方法各异。甲醇、异丙酯和甲苯等3种有机溶剂均为硫酸特布他林合成中使用并且2015年版《中国药典》要求检查的对人体有害的有机溶剂。本研究中建立的检测方法灵敏度、准确度均达到有机溶剂残留量的检测要求，可用于硫酸特布他林中甲醇、异丙醇与甲苯残留的检测和分析，且对于硫酸特布他林的质量控制和安全使用有重要意义。

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Determ ination of Three Residual Solvents in Terbutaline Sulfate by Headspace Capillary Gas Chrom atography

Li Weiqiang1，Li Ji2，Wang Sunxuan2，Li Xia2
(1．Weapon Sanitation Institute 521 Hospital，Xi′an，Shaanxi，China 710065；2．Shaanxi Provincial Institute for Food and Drug Control，Xi′an，Shaanxi，China 710065）

R927．11；R974

A

1006－4931(2017)18－0022－03

10．3969／j．issn．1006－4931．2017．18．007

2017－04－10；

2017－06－08)

李伟强（1976－），男，大学本科，主管药师，研究方向为临床药学，（电子信箱）2675611626＠qq．com。

李霞（1974－），女，硕士研究生，主任药师，研究方向为药品质量分析和质量标准，（电话）029－62288429（电子信箱）1012575910＠qq．com。