高效液相色谱—示差折光测定口香糖中山梨糖醇和麦芽糖醇的含量

何红春+李红梅

摘 要：目的：建立一种高效液相色谱-示差折光测定口香糖中山梨糖醇和麦芽糖醇含量的实验方法。方法：色谱柱采用Waters NH2柱（250mm×4.6mm，5μm），以乙腈∶水=70∶30为流动相，采用示差折光检测器测定口香糖中山梨糖醇和麦芽糖醇的含量。结果：采用本实验检测方法，山梨糖醇和麦芽糖醇的线性范围为1.6～6.4mg/mL，该方法的最小检出限0.1mg/mL，加标回收率为92.46%～101.08%，方法的相对标准偏差0.88%～1.96%。结论：该方法精密度好、回收率和准确度高，适用于口香糖中山梨糖醇和木糖醇的定量分析。

关键词：口香糖；山梨糖醇；麦芽糖醇；高效液相色谱；示差折光检测

中图分类号 TS247 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2017）17-0127-03

Abstract：[Objective]A high performance liquid chromatography method for separation and determination of sorbitol and maltitol in chewing gum with sticky rice was established. [Method] The analytical column was Waters NH2 （ 250mm×4.6mm，5μm），the mobile phase was acentonitrile-water （70∶30，V/V），the samples were determined by an refractive index detector detector. [Result]The calibration curves had good linearity in the range of 1.6～6.4mg/mL for sorbitol and maltitol，the detection limit for sorbitol and maltitol was 0.1mg/mL，the average recoveries of sorbitol and maltitol were 92.46%～101.08% ，RSD = 0.88%～1.96%.[Conclusion] The method was a convenient，rapid and effective method for qualitatively analysis of sorbitol and maltitol in chewing gum.

Key words：Chewing gum；Sorbitol；Maltitol；HPLC；Refractive index detector

糖醇[1-11]是一种多元醇，含有2个以上的羟基，糖醇虽然不是糖但具有某些糖的属性。木糖醇与蔗糖的甜度相当，麦芽糖醇与蔗糖的甜度接近，这2种糖醇是蔗糖最好的替代品，可以简单的替代蔗糖。木糖醇的生产原料是富含半纤维素的农林废弃物玉米芯等，资源较为丰富，且不会造成与食粮争原料的现象，发展潜力较大。所以糖醇一直是各个国家研究的对象，是国际食品和卫生组织批准的安全性食品之一。在我国GB2760-2014《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》中规定食品中糖醇类是按生产需要适量使用[12]。由于糖醇不含醛基，没有还原性，所以不能采用滴定法测定；在紫外区域也没有吸收峰，所以也不能用紫外测定其含量。为此，本实验利用高效液相色谱-示差折光方法对口香糖中山梨糖醇和麦芽糖醇含量的测定进行了研究。

1 材料与方法

1.1 材料和仪器 口香糖样品（超市购买）、山梨糖醇对照品（德国Dr.Ehrenstorfer）、麦芽糖醇对照品（德国Dr.Ehrenstorfer）；乙腈，默克化工技术（上海）有限公司。 E2695高效液相色谱仪，Waters公司；2414示差折光检测器，Waters公司；Synergy超纯水机，美国密理（MILLIPORE）公司。

1.2 实验方法

1.2.1 色谱条件选择 色谱柱：Waters NH2柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相：乙腈∶水=70∶30；檢测池温度：35℃；柱温：35℃；进样量10μL；流速1.0mL/min。

1.2.2 标准溶液配制 准确称取山梨糖醇和麦芽糖醇对照品，用流动相溶解配制成1.6，2.4，3.2，4.8，6.4mg/mL的混标溶液，摇匀，经0.45μm滤膜过滤，取滤液备用，作为对照品溶液。

1.2.3 样品溶液配制 准确称取2g左右切碎的样品，置于50mL离心管中，加入40mL水，漩涡混匀5min，置于80℃水浴锅中加热20min，取出后9000r/min离心10min，取上清液过0.22μm滤膜，上机测试。

2 结果与分析

2.1 线性关系的考察 精密吸取2种糖醇混合对照品溶液10μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。以对照品峰面积为纵坐标，以对照品溶液浓度（mg/mL）为横坐标，绘制标准曲线，得到回归方程跟相关系数见图1。由图1可知，2种糖醇在1.6～6.4mg/mL线性关系良好，并以信噪比等于3为标准，测得2种糖醇的检出限为0.1mg/mL。

2.2 精密度试验 精密吸取混合对照品溶液10μL重复进样6次，记录色谱图峰面积，并测定峰面积的平均值和相对标准偏差，测定结果见表1。连续6次实验结果显示，山梨糖醇和麦芽糖醇精密度实验相对标准偏差为1.26%、1.45%，本实验测定山梨糖醇和麦芽糖醇精密度良好，具有良好的准确度。

2.3 重复性实验 由表2可知，取同一样品，按照供试样品溶液制备方法重复测定6次，记录色谱图，测定结果见表2。重复性实验山梨糖醇相对标准偏差为1.20%，麦芽糖醇相对标准偏差为1.73%。用本方法测山梨糖醇和麦芽糖醇含量重复性良好。endprint

2.4 回收率实验 在上述优化好的条件下，分别在口香糖样品中添加标样，进行添加回收率和精密度实验。测定结果见表3，回收率在92.46%～101.08%，重复测定7次，计算各组分的相对标准偏差在0.88%～1.96%。表明高效液相色谱-示差折光法能够满足实际样品的测定需求。

2.5 样品测定 取6批口香糖按1.3.3方法制备样品溶液，精密吸取样品供试液10μL，对照品混合溶液10μL，分别注入高效液相色谱仪，以外标法计算含量，见表4，样品中山梨糖醇跟麦芽糖醇含量见表4。山梨糖醇和麦芽糖醇对照品及样品的HPLC色谱图见图2、图3，从图2和图3可知，通过上述条件对照品和样品都能够达到很好的基线分离，山梨糖醇和麦芽糖醇出峰时间分别在7.7min和10.8min，结果令人满意。

3 讨论

糖醇类易溶于水，所以前处理可以才用水提取的方法，但是复杂食品中糖醇类的测定前处理要去除蛋白质、脂肪等净化后才能上仪器测定，另外对照品的糖醇类吸湿性较高，所以在称量对照品时候需要注意快速准确，尽量减小误差。本实验针对口香糖中山梨糖醇和麦芽糖醇含量的测定具有良好的准确度、精密度和回收率，适用于口香糖中山梨糖醇和麦芽糖醇含量的测定。

参考文献

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[12]GB 2760-2014食品安全国家标准 食品添加剂使用标准[S].

（责编：张宏民）endprint