高效液相色谱法测定罗红霉素颗粒含量

李慧

哈药集团制药六厂 150000

高效液相色谱法测定罗红霉素颗粒含量

李慧

哈药集团制药六厂 150000

目的：探讨使用高效液相色谱法来测定罗红霉素颗粒含量的可行性与可靠性，为罗红霉素颗粒含量测定找寻最佳的测定方法。方法：通过高效液相色谱法进行测定，多次测定确定其稳定性和回收率。结果：通过测定试验可以得知，当罗红霉素颗粒浓度位于0.5-0.7mg·ml-1范围时，其样品会呈现很好的线性关系，回收率很高。结论：从试验结果可以看出，在对罗红霉素颗粒的含量进行测定时采用高效液相色谱法是十分可行的，并且测定方法简单可靠，可以作为标准测定方法大力推广。

高效液相色谱法；罗红霉素颗粒；含量；测定

作为一种常见的西药抗菌药物，罗红霉素的群众基础较大，市场需求自然也很大。而为了方便儿童服用，罗红霉素除了片剂和胶囊剂以外，也开始生产颗粒制剂。与片剂和胶囊制剂相比，颗粒剂更容易被人体吸收，效果更佳。为了能够进一步优化罗红霉素颗粒的生产工艺，需要在生产中对其含量进行测定，以确定生产工艺的稳定性是否符合要求。而高效液相色谱法作为一种较为成熟的测定方法，在罗红霉素颗粒的含量测定中也发挥了非常积极的作用。在此本文就将高效液相色谱法测定罗红霉素颗粒含量的试验过程和结果报道如下：

1、仪器与试药

1.1 仪器

JASCO高效液相色谱仪，JASCO-875-UV检测器，JASCO807IT积分仪，JASCOAS-950自动进样器。

1.2 试药

乙腈、甲醇为色谱纯，醋酸铵为分析纯；罗红霉素对照品（96%，天津药品检定所），罗红霉素颗粒剂（规格每袋为50mg，天津市儿童医院批号970601，970602，970603）。

2、方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱LichrosorbRPC187μm（244mm×4.0mm），流动相为乙腈-0.083mol·L-1醋酸铵水溶液-甲醇（55∶23∶28）用醋酸调节pH值为6.8，流速1.0ml·min-1，柱温40℃，检测波长215nm。

2.2 标准曲线的制作

精密称取罗红霉素对照品约260mg，置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度；分别精密吸取上述溶液0.5，1，2，3，4，5，6，7ml置于10ml量瓶中，用流动相定容，使浓度分别为0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0mg·ml-1，分别吸取20μl进样测定峰面积，每种浓度重复进样 3次，以峰面积 Y对浓度 X回归，得线性方程Y=444083X-7714.6，r=0.9995，说明在0.5～7mg·ml-1范围内线性关系良好。

2.3 稳定性试验

每隔1h测同一浓度对照品溶液1次，连续6h，结果峰面积基本不变，平均RSD为0.42%。

2.4 回收率试验

精密称取罗红霉素对照品适量，按处方配制罗红霉素颗粒剂，以下按“样品测定”项下操作，精取溶液20μl进样，测定峰面积，按外标峰面积法计算回收率，结果见表1。

表1 回收率实验结果（n＝6）

2.5 样品测定

取罗红霉素颗粒剂混匀、研细，精密称取适量（约相当于罗红霉素100mg）置25ml量瓶中，加入流动相适量，经超声波处理10min，使罗红霉素溶解，加流动相稀释至刻度，过滤，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另精密称取罗红霉素对照品50mg，加流动相溶解并定容，制成每ml中含2mg的溶液作为对照品溶液。分别精密量取对照品溶液和样品溶液各20μl注入液相色谱仪，测定峰面积，按外标法计算。结果见表2，色谱图1。

表2 样品含量测定结果

图1 色谱图

3、讨论

从专业角度上讲，高效液相色谱法也被称之为高分离度液相色谱法。该方法是色谱法中一种，也是应用最为广泛的一种。化学、医学、工学领域都有涉及。高效液相色谱法与其他色谱法相比，拥有独特的优势：

第一，高压。高效液相色谱法中的流动相是液体，该液体在经过色谱柱时，需要抵挡非常大的阻力，为此载液务必要加高压；第二，高速。高效液相色谱法能够进行快速分析，液体流速也非常快，一般情况下，样品在15min左右就能够分析出来，最长时间不会超过半个小时，还有些样品在5min之内就可以完成分析；第三，高效。高效液相色谱法分离效能非常高，应用固定相与流动相，样品的分离效果非常好；第四，高灵敏度，高效液相色谱法中的紫外检测器能够达到0.01ng；第五，使用范围非常广，据统计现实生活中有接近70%的有机化合物可以利用此种方法，尤其是高沸点、强极性的样品分析效果最佳。另外，高效液相色谱法还具有容易回收、样品不容易损坏的特点。但是此种方法也存在着一定的劣势，突出的就是“柱外效应”。如果在分离的过程中，流动相流行出现了变化，色谱峰会非常容易出现加宽情况，柱效率会因此大大降低。

而罗红霉素颗粒属于抗生素，主要用来治疗敏感菌株引发的各类感染，比如皮肤软组织感染、上下呼吸道感染等。颗粒颜色为白色或者与白色十分相近的颜色，拥有芳香，味道甜中带苦。罗红霉素颗粒服用会出现不良反应，比较常见的有恶心、腹痛等，如果患者对罗红霉素过敏，或者存在着肝、肾不全，就要禁止复用。罗红霉素颗粒口服之后，患者都会比较快的吸收，而且具有非常高的峰浓度，大量的实验研究证明，患者如果空腹复用该药品，会有良好的吸收效果。但是需要注意控制服用量。这也是为什么要在生产中控制罗红霉素颗粒的含量并对其进行精密测定的原因。

通过本次试验可以看出，运用高效液相色谱法，将罗红霉素浓度控制在一定范围内，就会拥有良好的线性关系，而且罗红霉素的回收率非常高，没有任何的辅助材料的干扰。因此高效液相色谱法可以用来进行测定罗红霉素颗粒含量。高效液相色谱法与其他测定方法相比，简单、快速、容易控制，将其用来进行罗红霉素颗粒生产控制，可以确保产品质量。因此可以积极将高效液相色谱法推广到罗红霉素颗粒的含量测定中去。

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1672-5018（2017）02-281-1