乙型肝炎病毒DNA定量检测与临床的关系

洪淑丹林佩飞

1.乐清市第二人民医院 浙江温州 325600；2.乐清市人民医院 浙江温州 325600

乙型肝炎病毒DNA定量检测与临床的关系

洪淑丹1林佩飞2

1.乐清市第二人民医院 浙江温州 325600；2.乐清市人民医院 浙江温州 325600

目的：探讨乙型肝炎病毒DNA定量检测与临床的关系。方法：选取我院2014年8月至 2016年8月收治的64例乙型肝炎患者的作为研究对象，所选取的患者均通过 ELISA（酶联免疫吸附试验）来检测乙型肝炎的病毒血清标志物，聚合酶链式反应（PCR）来检测 HBV-DNA的含量。结果：HBcAb、HBeAg、HBsAg的 HBV-DNA的阳性率为 96.6%，HBcAb、HBeAg、HBsAg为 14.3%，HBeAg、HBsAg为 100%，HBcAb、HBsAg为33.3%，HBeAb、HBcAb、HBsAb为 20%，HBcAb、HBeAb为 33.3%，HBsAb为12.5%。全阴的为0。结论：定量PCR可真实反映HBV感染、复制及病程变化，对乙型肝炎临床诊断及治疗均有较大的指导意义。

乙型肝炎病毒；DNA定量检测；临床关系

近年来随着分子生物学技术的发展及其在临床应用方面的推广，应用实时荧光定量聚合酶链反应检测 HBV 病毒载量已成为目前临床诊断 HBV 感染的常用指标，进一步提高了检测的质量【1】。同时采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测乙型肝炎病毒 HBV标志（HBV-M）简便易行，一直为许多临床科室使用。临床上有必要把此两种方法的检测结果联合起来进行分析，指导临床应用。为了探讨乙型肝炎病毒 DNA的定量检测和临床的关系，选取我院2014年8月至 2016年8月收治的64例乙型肝炎患者的作为研究对象，所选取的患者均通过 ELISA（酶联免疫吸附试验）来检测乙型肝炎的病毒血清标志物，聚合酶链式反应（PCR）来检测 HBV-DNA的含量。现将大致研究结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取我院2014年8月至 2016年8月收治的64例乙型肝炎患者的作为研究对象，其中男36例，女28例，年龄在 13～75岁之间，平均（33.9±15.1）岁，所选取的患者都符合病毒性肝炎的诊断标准。且各类型的肝炎患者之间的资料没有明显的差异，结果具有可比性。

1.2 检测的仪器和试剂 HBV血清检测标志物检测试剂盒和HBV核酸扩增荧光检测试剂盒；荧光定量聚合酶链反应（PCR）分析仪。

1.3 方法 在患者晨起空腹时抽取 5 ml静脉血，将血清离心分装在 -20℃下保存备用。然后通过 ELISA（酶联免疫吸附试验）来检测乙型肝炎的病毒血清标志物，操作步骤按照试剂盒的规定进行。临床方法采集患者的肘静脉血，采取实时荧光定量PCR方式对乙肝DNA进行检测。观察对比荧光定量PCR方式对乙肝DNA检测的准确率。阴性的标准为荧光定量PCR在1×103拷贝数/ml以下；阳性的标准为荧光定量PCR在1×103拷贝数/ml以上。对比观察阴性与阳性结果的差异，并且分析影响检测结果的因素[2]。

1.4 观测的指标 观测患者血清学的诊断指标和 HBV-DNA的阳性率以及定量检测的结果情况；血清学的诊断分组：第一组为HBcAb、HBeAg、HBsAg，第二组为 HBcAb、HBeAg、HBsAg，第三组为HBeAg、HBsAg，第四组为HBcAb、HBsAg，第五组为HBeAb、HBcAb、HBsAb，第六组为HBcAb、HBeAb，第七组为 HBsAb以及全阴。

1.5 统计学方法 采用 SPSS16.0统计学软件对数据进行统计学处理，以P＜0.05为差异具有统计学意义的基础。

2 结果

64例患者血清学的诊断指标和 HBV-DNA的阳性率以及定量检测的结果情况，详见表1。

表1 患者血清学的诊断指标和HBV-DNA的阳性率以及定量检测的结果情况【n（%）】

第三组 H B e A g、H B s A g 4 4（1 0 0%） 7.7 9±0.6 1第四组 H B c A b、H B s A g 3 1（3 3.3%） 6.1 9±0.5 1第五组 H B e A b、H B c A b、H B s A b 5 1（2 0%） 3.4 9±0.5 2第六组 H B e A b、H B c A b 3 1（3 3.3%） 3.6 6±0.5 1第七组 H B s A b 8 1（1 2.5%） 3.1 1±0.3 3全阴 5 0 0

3 讨论

乙型肝炎是严重威胁人类健康的、发病率很高的传染病，对乙肝病毒（HBV）的研究虽然取得了很大进展，但是目前仍然没有非常有效的办法，随着HBV基因型概念的提出，乙肝的研究进入了一个新的阶段。HBV的基因型存在一定的地区分布特征，并可能与疾病的进展有一定的关联[3]。随着分子生物技术的发展，病毒感染的临床诊断技术已从定性检测发展到定量检测。从核酸杂交技术到定量PCR技术检测HBVDNA，其灵敏度和特异性不断提高，且在研究病毒感染量与临床病毒的关系、评价和检测抗病毒药物疗效等方面具有重要指导作用。我国现在属于乙型肝炎大国，发病率在全世界排在前几位。有研究表明，HBsAg的流行率大约为 9.75%，当人体感染了乙型肝炎病毒之后会出现不同的症状以及临床表现。HBeAg呈阳性表示患者体内的乙型肝炎病毒在活跃的复制，表明其具有很强的传染性[4]。HBcAb、HBeAg、HBsAg的 HBV-DNA的阳性率为96.6%，HBeAg、HBsAg为 100%，说明本组患者的 HBeAg阳性血清指标的模式组主要为第一组和第三组，而且其 HBV-DNA的阳性率以及 HBV-DNA的定量都比其他各组要高，说明 HBeAg有可能与HBV-DNA的含量之间存在一定的正相关性[3]。HBcAb、HBeAg、HBsAg为 14.3%，HBV-DNA 的对数的平均值为（5.01±1.79），HBcAb、HBsAg为 33.3%，HBV-DNA 的对数的平均值为（6.19±0.51），说明当 e系统的抗原阴转时，HBV-DNA还是有可能被检测到，虽然其含量比第一组和第三组低。HBeAb、HBcAb、HBsAb为33.3%，HBV-DNA 的对数的平均值为（3.66±0.51），说明 HBsAb是一种保护性的抗体。

综上所述，各种类型的乙型肝炎患者都有一定程度 HBV-DNA复制，HBeAg的阳性患者其 HBV-DNA的水平最高，将 HBV-DNA和 HBeAg定量联合进行诊断，可以为早期的乙型肝炎筛查以及治疗提供可靠的依据。

[1]李金明.乙型肝炎病毒血清标志物测定及结果解释的若干问题.中华检验医学杂志，2006，29（5）：385.

[2]梅玉峰，黄敏，陈丽娟.HBV-DNA阳性乙肝感染者血清学标志物临床分析[J].国际检验医学杂志，2010，31（9）：1004-1005.

[3]Sadakazu U，Hiroaki O，Hiroko I，et al.Serological detection of hepatitis B virus genotypes by ELISA with monoclonal antibodies to typespecific epitopes in the preS2-region product[J].J of Virol Methods，1999，80：97¯112.

[4]潘春燕.溶血对乙型肝炎病毒 DNA 定量检测的影响.左江医学，2008，36（1）：53.

R373.2

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1672-5018（2017）01-214-01