不同产地巴戟天药材中大黄素甲醚的含量测定

吴凌凤，谢华松

(嘉应学院医学院，广东 梅州 514000)

不同产地巴戟天药材中大黄素甲醚的含量测定

吴凌凤，谢华松*

(嘉应学院医学院，广东 梅州 514000)

目的：对不同产地巴戟天药材中大黄素甲醚的含量进行比较研究。方法：采用HPLC测定不同产地巴戟天药材中大黄素甲醚的含量，色谱柱：Agilent(4.6 mm×250 mm,5μm)；以甲醇-0.1%磷酸水为流动相(78:22)；流速1.00 mL·min-1；柱温30 ℃；检测波长254 nm。结果：巴戟天药材中大黄素甲醚的线性范围为0.118-1.18 μg/mL，r2=0.9991,大黄素甲醚的平均回收率在87.12%。不同产地巴戟天药材中大黄素甲醚的含量有所不同。结论：所建立的分析方法可以测定巴戟天药材中大黄素甲醚的含量。

巴戟天；大黄素甲醚；高效液相色谱法；含量测定

巴戟天为茜草科巴戟天属植物巴戟Morinda officinalis How．的干燥根茎，具补肾阳、强筋骨、祛风湿功效，临床用于治疗阳痿遗精、宫冷不孕、月经不调、少腹冷痛、风湿痹痛、筋骨痿软等症。巴戟天始载于《神农本草经》，列为上品，历代本草均有记载，主要分布在广东、福建、广西、海南等省的热带和亚热带地区，其中以广东德庆为道地产地。巴戟天含多种化学成分，如蒽醌、环烯醚萜、寡糖、多糖等成分。巴戟天中的蒽醌类成分有具有促进骨髓基质细胞增殖[1]等作用，而大黄素甲醚具有很强的抗炎、抗癌作用[2]，且有抗骨质疏松活性[3]。

1 材料

岛津LC-10AT高效液相色谱仪(SPD-10A检测器)。巴戟天药材于2016年10月购于五华，德庆等地，经嘉应学院医学院副教授丘明建鉴定为巴戟天M．officinalis．的干燥成熟根茎。大黄素甲醚(中国药品生物制品检定所，批号：110758-201013)，甲醇为色谱纯(天津科密欧化学试剂有限公司)，纯净水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

AgilentC18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相以甲醇-0.1%磷酸水(78：22)；流速1.00 mL·min-1；柱温30 ℃；检测波长254 nm。在此实验条件下，供试品溶液中大黄素甲醚对照品与其他成分得到良好分离，其色谱峰保留时间与相应对照品一致(见图1)。理论塔板数以大黄素甲醚峰计算应不低于4 000。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取2.36mg大黄素甲醚对照品，置100mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容，备用。

2.3 供试品溶液的制备取

巴戟天粉末1 g(过三号筛)，精密称定，置100 mL圆底烧瓶中，加少量20%硫酸湿润，静置1h，精密加入三氯甲烷50mL，回流提取2 h，滤过，加硅胶(200-300目)0.2g拌匀，置水浴上蒸干，加于硅胶柱[200～300目，1g，内径为1cm，干法装柱]上，以三氯甲烷-石油醚(5：5)混合溶液20ml洗脱，弃去洗脱液，再用三氯甲烷-石油醚(8:2)混合溶液10ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。

2.4 标准曲线的制备

分别取上述对照品溶液0.05，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mL至10 mL容量瓶中，稀释至刻度，成系列对照品溶液。按“2.1”色谱条件，分别进样20μL，测定峰面积。以大黄素甲醚浓度为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：y=1.8E+7X+1452.6,r2=0.9991。大黄素甲醚0.118～1.18μg/mL与峰面积的线性关系良好。

图1 A为大黄素甲醚对照品的色谱图 B为巴戟天样品的色谱图

2.5 精密度试验

取“2.4”项对照品溶液按“2.1”色谱条件重复进样6次，每次20 μL，峰面积的RSD为0.8%(n=6)。结果表明精密度良好。

2.6 稳定性试验

在上述色谱条件下，精密吸取同一供试品溶液20μL，然后每隔4 h各考察1次。结果表明，供试品溶液在12h内测定结果稳，供试品溶液中大黄素甲醚色谱峰面积的RSD为1.6%说明样品溶液在12h内稳定。

2.7 重复性试验

对同一批巴戟天样品按“2.3”项方法平行制备六份，按"2.1"项色谱条件进样，峰面积RSD为2.1%(n=6)。结果表明本方法重复性良好。

2.8 加样回收率试验

精密称取6份已知含量的样品粉末，每份0.5 g，分别加入大黄素甲醚对照品溶液，按按“2.3”项方法平行制备六份，按“2.1”项色谱条件进样，峰面积平均回收率为87.12%，说明该测定方法测定结果准确。

2.9 不同样品的含量测定

取不同产地巴戟天药材，按2.3项下制备成供试品溶液，并按2.1项下色谱条件进行含量测定，结果如下。

表1 不同产地巴戟天药材中大黄素甲醚含量 μg/g

3 讨论

本实验样品提取条件的选择比较了氯仿，硫酸-氯仿，硫酸-石油醚，甲醇几种提取方法，发现以硫酸-石油醚提取的样品虽然杂质较少，但大黄素甲醚的提取较少。以硫酸-氯仿提取的样品大黄素甲醚含量最高，但杂质也较多，故需对样品进行纯化。通过TLC筛选，发现氯仿-石油醚(8:2)能将大黄素甲醚与杂质分开。实验结果表明，收集的样品中不同产地的巴戟天药材中大黄素甲醚的含量是有一定差距的，以玉林产地的含量为最高，其次为钦州，而南靖的含量最低。本实验为探求高质量的巴戟天产地，筛选优良品种和扩大药源提供了参考依据，但单一成分并不能说明药材总体质量，还需结合其他成分含量进一步研究。

[1] 凌 昆，郭素华，赵谐.闽产巴戟天中促进骨骼基质细胞增殖成分的初步研究[J].中国现代应用药学杂志,2008,25(4):271.

[2] 唐 康.穗花大黄化学成分的研究[D]. 成都：西南交通大学,2009．

[3] 吴岩斌.巴戟天抗骨质疏松活性成分及品质评价[D]. 福州：福建中医药大学,2009.

(本文文献格式：吴凌凤，谢华松.不同产地巴戟天药材中大黄素甲醚的含量测定[J].山东化工，2017，46(14)：76-77，79.)

HPLC analysis of physcion in Morinda officinalis from different locations

WuLingfeng,XieHuasong*

(Medical College of Jiaying University,Meizhou 514000,China)

Objective :To establish a HPLC method to determine the quantitative of physcion in Morinda officinalis from different locations.Methods:Separation column was Agilent C18(4.6×250mm,5μm)with the column temperature of room temperature.The mobile phase composition was methonal-0.1% phosphoric acid (78：22) and the flow rate was 1.0ml/min.The UV detection wavelength was 254nm.Results :A good linearity was obtained in the range of 0.118-1.18μg/mL with r2=0.9991.The average recovery was87.12%.Conclusion : The content of physcion was vary with the producing area of Morinda officinalis.The method was good for determining physcion in Morinda officinalis.

morinda officinalis;HPLC;physcion;content determination

2017-05-05

吴凌凤(1988—)，女，广东梅州人，助教，主要从事药物分析研究。

O657.7+2

A

1008-021X(2017)14-0076-02