血细胞形态学复检标准的建立与应用

刘萍 周淑美 江苏省扬州市口腔医院 （江苏 扬州 225002）

血细胞形态学复检标准的建立与应用

刘萍 周淑美 江苏省扬州市口腔医院 （江苏 扬州 225002）

目的：探讨临床样本检验过程中血细胞形态学镜检标准的设立。方法：对本院2016年经血液分析仪检测中存在问题的临床标本进行涂片镜检后原因统计和分析。结果：白细胞分类计数异常的占42.5%，血红蛋白＜70g/L的占15.3%，血小板异常的占7.7%等。结论：当血液分析仪检测结果白细胞总数高于20×109/L或低于4×109/L、血红蛋白＜70g/L、血小板＞600×9/L或＜80×109/L时必须及时镜检，这样才会使仪器检测与传统镜检完美结合，提高临床应用价值。

血细胞分析 复检标准

随着基础医学的深入研究和高新技术的应用，血细胞分析仪的检测水平进入了新的阶段，新的检验参数为临床提供了更多的诊断指标，促进了检验医学的发展[1]，实现了真正意义上的全自动分析。

中华检验学会制订复检标准的原则，在保证筛选质量的基础上，尽量使复检率降低[2]，本研究对本院经血液分析仪检测的大批量临床检验标本结果进行了统计、筛查分析，探讨临床样本检验过程中血细胞形态学镜检标准的设立，找到仪器高效性与镜检准确性的最佳结合点；通过仪器检验与镜检的比对，提高幼稚细胞、有核红细胞等异常细胞形态学检出率，增强临床应用价值。

1.材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样本。2013年1月～2016年12月经血液分析仪检测的10950次门诊和住院患者，其中男5823人次，女5127人次。

1.1.2 仪器和试剂。光电MEK-7300P血细胞分析仪及其原装配套试剂，奥林巴斯CX21显微镜。

1.2 方法

镜检时血涂片制备[3]采用手工推片法，尽量使用新鲜血液，若无新鲜血液则用混匀的抗凝血。在清洁干燥无尘无油脂的载玻片进1/3处，加一滴新鲜血液，用推片以30～45度角推出数张厚薄适宜，头尾明显，细胞分布均匀的合格涂片。采用瑞氏吉姆萨复合染色法后用普通光学显微镜人工分类200个有核细胞，并计算各类有核细胞所占百分率。相关操作参考《全国临床检验操作规程》进行。

2.结果

对2016年日本光电MEK-7300P血液分析仪检测的10950份临床标本结果进行了统计分析，其中仪器结果正常不需要复检的标本数量为8160份，占检测总数的74.4%，存在相关问题需要镜检标本为2790份，镜检率为25.5%。

2.1 根据国际血涂片复审准则[4-6]制定适合本院的镜检复审标准，见表1。

2.2 血细胞分析仪检测结果异常需显微镜人工复检标本的组成与例数，见表2。

2.3 经显微镜镜检后存在的细胞学形态改变参考相关阳性图片判断标准[7]。可分为以下几种：

2.3.1 白细胞异常：细胞数量和比例改变，常见的包括中毒颗粒、空泡变性粒细胞可提示感染，见到原始细胞、及各幼稚阶段细胞均提示白血病等恶性系统血液病。

2.3.2 红细胞异常：成熟红细胞明显大小不一中央苍白区扩大，提示缺铁性贫血，可反过来对比仪器细胞直方图分布，并检查其与血红蛋白检测结果的相关性。

2.3.3 血小板异常：数量过多或过少均有临床意义。对于仪器检测血小板数量过少的标本，有部分病例在血片镜检中可见到5～7个血小板成簇可见的情况，若血片见到成簇血小板提示其数量不少，可能仪器在检测体积偏小的血小板时由于光电的敏感性而导致遗漏。

3.讨论

3.1 血细胞镜检标准的设立

在2790份临床标本中，由于白细胞总数及分类异常复检的标本量最多，占总复查样本例数的47%。在出现报警中的白细胞总数、中性粒细胞百分比、幼稚粒细胞百分比、幼稚粒细胞的患者中，白细胞显著增高，未分类等[8]。我们设定的标准为白细胞总数＞20×109/L，白细胞总数＜4×109/L，当仪器显示白细胞分类计数无分类结果或伴有异常提示时，即使是白细胞数量在正常参考范围内，也是强制镜检的标准之一。

血红蛋白＜70g/L需要镜检，往往与白细胞总数、血小板总数检测结果具有相关性，此时必须复检以防止再生障碍行贫血、免疫性溶血性贫血、白血病的存在，并对所有检测数据比对评估方可发出检验报告。

当血小板数量＞600×9/L或血小板数量＜80×109/L，要及时镜检。由于血小板体积偏小，仪器的光电敏感性存在误差，特别容易漏检。复检血片中血小板的形态非常重要，同时可以筛检出血小板增多症、免疫性血小板减少症等特殊病例，大血小板增多，血小板凝集，血凝块形成可使血小板假性减低[9]。

3.2 需要显微镜镜检2790份标本的异常血细胞形态特征分析

血涂片镜检是判断血细胞形态病理变化的金标准，质量高的镜检[10]包括观察炎症引起的白细胞“毒性”变化、白血病病理变化、贫血红细胞形态变化、血小板形态特点，以及血液内寄生虫检查，这些是任何血细胞分析仪不可取代的。有资料显示[11]，国内各医院血细胞分析仪实际镜检率在0～15%，大部分＜5%。本组对所有镜检标本的异常情况做如下分析：

白细胞异常：白细胞总数＞20×109/L的64例中大多数因为急性感染和化脓性炎症引起，涂片镜检可见核左移，杆状核增多，伴少数晚幼粒、中幼粒细胞，有时可见中毒颗粒、空泡变性、核变性等质的改变。白细胞总数＜4×109/L的76例中的涂片中常见核右移，分叶核增多，5叶核以上的细胞＞3%；淋巴细胞形态学的改变，其中有21例异常淋巴细胞均大于0.13，最多为0.56，且以不规则异常淋巴细胞为主，原始细胞、各幼稚阶段细胞的存在均提示白血病等恶性系统血液病。

红细胞异常：血红蛋白＜70g/L的428例中最多见的是小细胞低色素性贫血，涂片中多为低色素小细胞，也可见泪滴状、口形、棘形、球形、靶形、嗜碱性点彩红细胞等。

表1 . 血细胞分析仪检测结果异常需显微镜人工复检的标准

表2 . 血细胞显微镜复检原因分类

血小板异常：在217例血小板异常中多数为数量的改变，血小板形态正常，也有部分形态上有异常改变，巨大、退变及不典型畸形血小板。

3.3 通过本组大样本临床检验的统计和比对，我们初步从白细胞、红细胞、血小板等方面设立了血细胞形态学镜检的标准，找到了仪器高效性与镜检准确性的最佳结合点，并对镜检过程中经常出现的异常形态学特征进行了细致的分类分析，增加了仪器检验与手工检验的吻合度，标准制定的规则有效的[12]提高了血细胞检验的临床应用价值。由于仪器设备的配置不同，以及显微镜镜检的经验差异，在实际工作中我们还需根据具体情况，及时沟通临床，以期得到更客观更准确的检验结果。

[1] 丛玉隆,乐家新.再论血细胞分析技术进展与临床应用[J].中华检验医学杂志,2007,30(4):365-369.

[2] 魏峰,潘杨.国际血液分析仪41条复检规则的临床应用评价及实验室复检标准的建立[J].检验医学与临床,2011,8(22):2727-2729.

[3] 叶应妩,王毓三,申子瑜,等.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:123.

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[11] 古旭东.5454份血涂片染色镜检分析[J].检验医学与临床,2007,4(8):742-743.

[12] 陈亚芳,毛颖华.血细胞分析复检规则的建立及其应用[J].国际检验医学杂志,2015,5(9):1297-1298.

Establishment and Application of Blood Cell Morphological Re - examination Standard

LIU Ping ZHOU Shu-mei Yangzhou Stomatological Hospital of Jiangsu Province (Jiangsu Yangzhou 225002)

Objective: To investigate the standard establishment of the microscopic examination of the blood cell morphology in the process of testing for clinical samples. Methods: The cause analysis and census of a smear of the clinical samples which have problems detected by the blood analyzer in our hospital in 2016. Results: Among those samples, abnormal WBC differential count accounted for 42.5%, hemoglobin＜70 g/L accounted for 15.3%, platelet abnormalities accounted for 7.7%, etc. Conclusion: When the detection results of blood analyzer in WBC amount more than 20×109/L or less than 4×109/L, hemoglobin＜70g/ L, platelet＞600×109/L or＜80×109/L, they must be timely microscopic examined, that will combine the instrument detection with traditional microscopic examination perfectly, and improve the clinical application value. Key words: blood cell analysis, criteria of reexamination

1006-6586(2017)16-0010-03

R446.1

A

2017-06-23

刘萍，副主任检验师。