利用组织培养快速繁殖林木良种研究

李慧　李启峰　赵慧

摘要 通过对林木良种进行2年的组织培养试验，结果表明，组培育苗是快速繁殖林木良种的一条重要途径，特别是通过组培获得良种自根苗，然后与根蘖或插根育苗相结合，能更快更多地大量繁殖良种苗木用于造林，具有很高的经济价值。

关键词 刺槐；组织培养；愈伤组织；培养基；生长激素

中图分类号 S722.8；Q813.1+2 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）14-0135-02

Abstract Through tissue culture experiments of improved tree varieties for 2 years，the results showed that the tissue culture was an important way to rapid breeding of forests，especially gained scion-root seedling improved varieties by tissue culture.And then combined with root sucker or inserting seedling，it could be more quickly and more mass breeding seedlings for afforestation，and had very high economic value.

Key words Robinia pseudoacacia；tissue culture；callus；medium；growth hormone

通过组织培养，能快速繁殖林木良种苗木，但实验室的研究结果用于生产实践，还有很多问题需要研究解决。为了解决这些问题，特进行了组织培养快速繁殖的生产性试验，现总结如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料

以刺槐、白杨派内种间杂种（南林杨×毛新）中27号、榆属种间杂种白榆×春榆、白榆×毛果旱榆的嫩枝（半木质化）为原始材料。

1.2 试验方法

1.2.1 试验条件。将试验材料剪成长5～10 cm的小段（带有3～4个饱满叶芽），剪除叶片（保留一段叶柄），用15%漂白粉溶液或0.2%升汞溶液消毒试验材料的表面1 h，然后在无菌箱中用无菌水冲洗2～3次，剪成一芽一段，插入已配好并经高压灭菌的培养基中，置于25 ℃左右、自然光照的条件下培养[1-2]。

1.2.2 组培。培养15 d左右，叶芽开始萌动生长，再经15 d芽长到3 cm左右，即成为无菌芽苗。剪下插入另一瓶培养基中。经15 d左右，芽苗下部逐渐形成愈伤组织，并长出3～5个甚至更多的芽苗。长到3 cm左右时，再把这些芽苗剪下插入新的瓶中，旧瓶仍继续培养，经2～3周又长成第2批芽苗10条左右，剪取后还可培养第3批芽苗。但因为这时培养基内的营养成分已消耗殆尽，所以第3批芽苗一般较弱，除个别壮苗外，一般不用或经壮苗培养基培育后再用。获得的芽苗，一部分用于扩大繁殖，另一部分插入生根培养基中培养成完整植株。插入后约经1周芽苗基部膨大，渐生新根，3周左右长出3～4条主根，即可移入花盆中[3-4]。

移植所用土壤应先用福尔马林溶液或经锅炒消毒，杀灭其中的病虫害，移植后灌0.1%高锰酸钾溶液，并用玻璃盖上2～3 d，以后慢慢使其见光，7 d左右将其移至室外锻炼2～3 d，即可带土移入大田中。

1.2.3 繁殖试验。2014年夏季开始繁殖试验，并获得了刺槐、杨树的无菌芽苗及少量完整植株。2015年春节后才开始较多地繁殖芽苗，并扦插生根，从6月中旬开始移入大田，截至7月中旬共移入大田刺槐160株、杨树10株；移入花盆的刺槐 90株、杨树20株；另外，尚有正在生根的刺槐、杨树共300株。榆树的组织培养，2014年尚未获无菌芽苗，2015年2月剪取越冬芽，剥去芽鳞放入分化培养基中，在长出愈伤组织的同时，从原来的生长点上长出了1株芽苗。但后来由于高温造成芽苗及愈伤组织坏死。2016年6月又重新嫩枝扦插，已发芽。

2 结果与分析

2.1 组织培养能快速繁殖林木良种

经试验，1株一年生刺槐，全部挖出其粗0.4 cm以上的根，可插根育苗20株，第1年生产组培苗1 000株，第2、3年分别可插根育苗2亿、40万株。由此可见，繁殖规模大，产量高，品种纯正，种苗脱毒，推广价值高。提高成苗率的关键在于给予适宜的培养温度与光照。注意温度不能过高，否则容易造成芽苗及愈伤组织坏死。生根培养基的成分基本上不能影响生根的快慢与移栽的成活与否。芽苗的粗壮程度关系着根系发育的好坏。芽苗繁殖时，在培养条件合适的情况下给予充足的光照，5 d即可开始生根，根系发育良好，生根率可达90%。

生根培养的适宜温度为25～28 ℃。夏季由于温度过高，短时间的38 ℃对苗危害不严重，但一旦超过40 ℃则芽苗细弱枯黄，根系逐渐变黑坏死。因此，夏季要采取一定的措施将温室温度控制在35 ℃以下，在此前提下充分利用温室的靠窗面，保证有充足的光照，促使芽苗茁壮成长、根系发育良好。生长激素对刺槐、杨树的生根条件与效果基本相同，由于扦插时试验材料上已有叶片，本身可以制造有机质，无需再额外添加营养物质，所以培养基内的营养物质对生根的影响很小，但是生长激素可以刺激生根。由表1可知，NAA和IBA按比例组合使用，可以提高成活率，使根部粗壮。

2.2 原始材料选择

阔叶树种在进行组织培养时一般选择接近木质化带有发育充实叶芽的嫩枝，可以快速获得芽苗，但是如果用芽尖作为培养材料时，虽然能快速形成愈伤组织，但是诱导苗需要的时间很长。

2.3 利用组织培养繁殖良种

白杨派树种（包括杂种）、刺槐、榆树在扦插繁殖时均比较困难，虽然嫁接可以提高成活率，但是由于嫁接繁殖繁琐、时间长，且嫁接繁殖不能生产自根苗，所以一般不选择此种方式进行白杨派树种（包括杂种）、刺槐、榆树等的良种繁殖推广。组织培养可以生产自根苗，利用组培苗建立根蘖圃，或进行插根育苗，能长期繁殖良种苗。

2.4 无菌芽苗培育

无菌芽苗繁殖可以根据实际需要与生根同时进行，适当繁殖。但生根过程需要连续进行，此过程是决定产量的关键因素。以2人参加生产计算，除完成其他操作外，平均每天可扦插生根芽45管，以成苗30株计（移栽大田成活算1株），产量相当可观。

3 结论

组织培养育苗生产性试验表明，组培育苗是多快好省的繁殖林木良种的一条重要途径，通过简化培养基降低组培苗成本、提高成苗率。特别是通过组培获得良种自根苗，然后与根蘖或插根育苗相结合，能更快、更多地大量繁殖良种苗木用于造林，较为经济。大面积营造林木良种壮苗不仅可改善生态环境，还可用于发展畜牧业，带动农牧民早日致富。最重要的是适当控制培养条件以培育出健壮的芽苗，这些芽苗具有生根快、根系好、移栽成活率高的特点[5-7]。

4 参考文献

[1] 刘静宇.林木植物组织培养的研究进展[J].农业开发与装备，2017（2）：31.

[2] 黄烈健，王鸿.林木植物组织培养及存在问题的研究進展[J].林业科学研究，2016（3）：464-471.

[3] 訾梅廷，徐连峰，李振海，等.林木组织培养及工厂化育苗中污染的控制技术[J].防护林科技，2005（3）：119-120.

[4] 牛焕琼，晋开颜，徐斌.植物组织培养在林业中的应用及进展[J].林业建设，2003（3）：27-30.

[5] 贺窑青，冯改霞，贺小青.林木组织培养的应用与研究[J].河南林业科技，2003（1）：27-29.

[6] 周晓箸馥，徐宏伟，宋大伟，等.组织培养和原生质体培养在林木上应用的现状[J].松辽学刊（自然科学版），1995（4）：81-84.

[7] 利用组织培养繁殖林木良种苗的研究初报[J].山东农学院学报，1980（1）：79-83.endprint