超高效液相色谱串联质谱法测定饮用水中壬基酚、辛基酚

奚晔+夏天+詹铭

环境内分泌干扰物（EDCs）是指来源于环境中，进入人体后具有干扰体内正常分泌物质的合成、释放、运转、代谢、结合等过程，激活或者抑制内分泌系统功能从而破坏其维持机体稳定性和调控作用的物质。EDCs会对人体发育及生殖功能产生不良影响[1-2]。烷基酚是一种常用的工业化合物，也是一种重要的环境内分泌干扰物。烷基酚成分中以壬基酚、辛基酚为主，不易降解。目前，文献报道烷基酚的检测方法主要有液相色谱-荧光检测器法，液相色谱-紫外检测器（LC-UV）法，衍生-气相色谱/质谱（GC/MS）法等[3-7]。其中液相色谱法难以排除基质干扰的影响，气相色谱法操作繁琐。由于烷基酚类物质的污染较普遍，普通试剂、塑料耗材中均能检出，如果采用固相萃取技术，其本底污染较难控制。本研究建立液液萃取-超高效液相色谱/串联质谱法检测水中壬基酚、辛基酚，进行了萃取条件优化，并对辖区内自来水进行检测。本方法操作简单，干扰易控制，无需复杂衍生步骤。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

仪器有超高效液相色谱/串联质谱（Waters Acquity UPLC H-class， Xevo TQD，Waters公司产品）；氮吹仪（Biotage公司产品）。试剂有二氯甲烷（农残级）、甲醇（LCMS级）、乙腈（LCMS级）、纯水（HPLC级）均为MERCK公司产品，氯化钠优级纯（国药公司产品）。

壬基酚（NP）的三种异构体：NP-1（支链壬基酚混合物CAS 84852-15-3）、NP-2（直链壬基酚混合物CAS 25154-52-3）、NP-3（4-正壬基酚CAS 104-40-5）；辛基酚（OP）的三种异构体：OP-1（4-正辛基酚CAS1806-26-4）、OP-2（4-特辛基酚CAS 140-66-9）、OP-3（叔辛基苯酚混合物CAS27193-28-8）。

1.2 前处理

取200 mL水样，加入5 g氯化钠（优级纯，经过净化处理），加入6 moL/L盐酸数滴调节酸度，用30 mL二氯甲烷分2次萃取，合并萃取液后用氮吹仪（40℃）浓缩，以乙腈∶[KG-*2]水（1∶[KG-*2]1）定容至1 mL。

1.3 仪器条件

超高效液相色谱/串联质谱：Waters超高效色谱柱（Acquity UPLC BEH C18，2.1×50 mm，1.7 μm ）；流动相：A相为水（0.1%氨水），B相为乙腈（0.1%氨水），梯度洗脱程序如表1所示。进样量20 μL。离子源为电喷雾离子源，负离子模式（ESI—）；毛细管电压为3.0 kV；离子源温度为150℃；去溶剂气温度为500℃，去溶剂气流速为900 L/h；锥孔气流量为50 L/h。 MRM 模式采集数据，自动优化得到各目标物质谱参数见表2，MRM离子质谱图见图1。

2 结果

2.1 标准品的选择和配制

取适量NP、OP各异构体配制储备液，以甲醇稀释定容，冷藏待用。临用前用乙腈∶[KG-*2]水（1∶[KG-*2]1）稀释成浓度系列：0、2.5、10.0、25.0、50.0、75.0、100 μg/L。

2.2 样品前处理过程中的本底控制

烷基酚的实验室污染来源很多，试剂、器皿、洗涤剂、固相萃取小柱、管路以及其他塑料耗材等都会带来污染。本实验研究采用液液萃取方法，对所用试剂、器皿严格控制本底污染，达到了较好的效果。

2.2.1 氯化钠的净化 实验中发现分析纯和优级纯的氯化钠均含有较高的烷基酚本底，因此，需要作净化处理。本实验中以二氯甲烷浸没氯化钠，充分浸泡、搅拌30 min后弃去，重复3次，再500℃以上烘干备用。

2.2.2 分液漏斗的清洗 分液漏斗等玻璃器具尽可能专用，在使用洗涤剂清洗后，应充分冲洗，使用前应以适量二氯甲烷润洗干净。

2.2.3 其他耗材的本底控制 氮吹仪应使用高纯氮气，气路应使用聚四氟乙烯管。采样和分析用器皿都应避免使用塑料制品。

2.3 方法的线性、精密度、检出限和回收率

分别配制不同浓度NP、OP各异构体的混合标准溶液，在上述实验条件下绘制校准曲线。结果表明，方法的线性范围广（5-100 μg/L），相关性好（r>0.992）。以3 μg/L的标准溶液重复测定21次，按照公式DL=4.6σwb（σwb为平行测定批内标准偏差）计算得到检出限。在空白水样中分别加入混合标准物质成0.05、0.25、0.45 μg/L 3个浓度水平，分3日测定，每日测定6次，计算精密度。在空白水样中分别加入混合标准物质成0.05、0.45 μg/L 2个浓度水平的标准物质，测得回收率，结果见表3。

2.4 样品测定

对辖区内某季度95份管网水样品、270件二次供水样品进行检测，NP检出率为15%，OP均未检出。其中NP以NP-1为主，最高浓度为0.28 μg/L。

3 讨论

建立了生活饮用水中NP、OP的液液萃取-超高效液相色谱质谱联用的检测方法，对样品前处理参数进行了优化和验证，均得到了满意的结果。本方法灵敏度高，本底污染可控，抗干扰能力强，满足实验室定性、定量检测的要求。

参考文献

[1]COLBORN T，DUMANOSKI D，MYERS J P.Our stolen future：are we threatening our fertility，intelligence and survival？ A scientific detective story[M].New York：Dutton Books，1996：306.

[2]KAVLOCK R J，DASTON G P，DEROSA C，et al.Research needs for the risk assessment of health and environmental effects of endocrine disruptors：a report of the U.S.EPA-sponsored workshop[J].Environ Health Perspect，1996，104 Suppl 4：715-740.

[3]江泽军，金芬，王静，等.食品中烷基酚类物质污染现状、来源及其检测技术研究进展[J].食品与发酵工业，2016，42（6）：220-229.

[4]王静，潘荷芳，文莹，等.地表水中烷基酚类化合物的超高效液相色谱/串联质谱分析方法[J].中国环境监测，2008，24（5）：8-11.

[5]郑唯韡，王霞，田大军，等.固相萃取一气质联用法检测上海市不同水厂各处理工艺环节水中几种除草剂、杀菌剂和雌激素水平[J].中华预防医学杂志，2010，44（10）：899-902.

[6]冼燕萍，郭新东，杜志峰，等.奶瓶中双酚A、烷基酚及烷基酚聚氧乙烯醚残留量的高效液相色谱-荧光测定法[J].现代食品科技，2008，24（5）：493-495.

[7]熊丽蓓，卢大胜，戴艺，等.水中双酚A和烷基酚聚氧乙烯醚降解物的GC-MS测定方法研究[J].環境卫生学杂志，2013，3（6）：566-570，574.

（收稿日期：2015-05-26）