新疆药桑叶中五种活性成分的薄层色谱鉴别

李 玲，朱卫敏，张 琴，孙 莲

(1.新疆医科大学药学院,新疆 乌鲁木齐 830011;2.乌鲁木齐职业大学，新疆 乌鲁木齐 830002)

新疆药桑叶中五种活性成分的薄层色谱鉴别

李 玲1，朱卫敏1，张 琴2，孙 莲1

(1.新疆医科大学药学院,新疆 乌鲁木齐 830011;2.乌鲁木齐职业大学，新疆 乌鲁木齐 830002)

目的:建立新疆药桑叶中同时鉴别五种活性成分的薄层色谱方法。方法：分析不同薄层板、检视方式、展开剂、显色剂对五种活性成分分离的影响。结果：在366nm下以V(甲苯)：V(乙酸乙酯)：V(甲醇)：V(甲酸)=10:3:5:3.5为展开剂在硅胶G高效板上展开，1%三氯化铝为显色剂，药桑叶中芦丁、槲皮素、异槲皮苷、紫云英苷和绿原酸五种成分均得到有效的分离，斑点圆整、清晰，比移值在0.2～0.8之间,符合薄层层析要求。结论：此试验为新疆药桑叶的质量控制提供快速的鉴别方法。

药桑叶；活性成分；薄层鉴别

新疆药桑是新疆独有的桑品种之一，药用价值极高[1]。现代药理研究证明药桑叶具有降血糖、降血压、抗菌和抗病毒等多种药理活性，其中的黄酮类如芦丁、槲皮素、异槲皮苷、紫云英苷，有机酸成分绿原酸均为活性成分[2-5]。本文采用薄层色谱法同时鉴别芦丁、槲皮素、异槲皮苷、紫云英苷和绿原酸五种活性成分。方法操作简单，为新疆药桑叶的质量控制提供快速的鉴别方法。

1 仪器与试剂

1.1 仪器

半自动点样仪(CAMAG LINOMAT 5)，薄层色谱数码成像系统(CAMAGREPROSTAR 3)，超声清洗仪(KQ5200DE型，昆山市超声仪器有限公司)。硅胶H板、硅胶G板、硅胶G高效板、聚酰胺板、GF254板(青岛海洋化工分厂)。

1.2 试剂

芦丁(批号100080-200707)，槲皮素(批号100081-200907)，异槲皮苷(批号111809-201102)，紫云英苷(批号114201-200908)，绿原酸(批号110753-200413)均由中国药品生物制品检定所提供，甲苯、乙酸乙酯、甲酸、甲醇、无水乙醇、95%乙醇、磷钼酸、香草醛、三氯化铝均为分析纯；药桑叶药材采自于新疆和田，经生药学帕丽达·阿布力孜教授鉴定为药桑叶。

2 试验方法[6-16]

2.1 试样溶液的制备

精密称取过60目筛干燥的药桑叶粉5.0 g，置于100 mL的锥形瓶中，加甲醇30 mL，超声提取30 min，过滤，得供试品溶液，用0.22微米微孔滤膜过滤后备用。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取芦丁、槲皮素、异槲皮苷、紫云英苷、绿原酸对照品各5.0 mg，置于10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容，配成0.5 mg/mL的对照品溶液。用微量移液器吸取上述五种对照品溶液各200 μL制成混标(芦丁、槲皮素、异槲皮苷、紫云英苷、绿原酸浓度均为0.1 mg/mL)，用0.22微米微孔滤膜过滤后备用。

2.3 显色剂的配制

(1) 1%三氯化铝 称取1g三氯化铝溶于100mL95%乙醇中。

(2) 磷钼酸试剂 称取10g磷钼酸，溶于100mL乙醇中；喷洒后120℃条件下加热15min。

(3) 香草醛 称取5g香草醛溶于100mL10%硫酸乙醇溶液。

3 薄层色谱鉴别[17-26]

在自动点样仪上给薄层板点样，点样量为2μL，吹干溶剂，放入已用展开剂预饱和30min的层析缸中，在室温条件下，进行上行展开，展距为8cm，挥干展开剂，用显色剂显色，计算比移值Rf。

3.1 薄层板的选择

选取硅胶H板、硅胶G板、硅胶G高效板、聚酰胺板、GF254板按2.2步骤将各种薄层板放入展开剂中展开，考察不同薄层板的分离效果，结果见图1。

3.2 检视方法的选择

分别在366nm，254nm及自然光下观察展开效果，结果见图3。

3.3 展开剂的选择

将硅胶G高效板薄层板分别放入表1展开剂中展开，考察不同展开剂的展开效果，结果见图4。

表1 不同展开剂和配比

3.4 显色剂的选择

选取2.3中显色剂,考察使用不同显色剂的效果。

4 结果与讨论

4.1 不同薄层板的选择

按照3.1中薄层板对药桑叶中五种活性成分的进行分离，效果见图1。

图1 不同薄层板对分离效果的影响

由图1可以看出，药桑叶中五种活性成分在不同薄层板的展开效果表现出明显差别，其中在硅胶G高效板上的展开效果明显好于其它。

4.2 检视方法的选择

按3.2步骤考察不同检视方法的效果，见图2。

图2 不同检视方法的效果

从图2可以看出，当在366nm下效果明显好于其它。

4.3 展开剂的选择

按3.3步骤考察不同展开剂对展开效果的影响，见图3。

从图3可以看出，当展开剂为甲苯：乙酸乙酯：甲醇：甲酸，体积比为10:3:5:3.5时，展开效果最好。

图3 不同展开剂对展开效果的影响

4.4 显色剂的选择

按3.4步骤考察不同显色剂的效果，见图4。

图4 不同显色剂的效果

从图4可以看出，当显色剂为1%三氯化铝时，斑点最清晰。

5 小结

在试验中，分析了不同薄层板、检视方式、展开剂、显色剂对五种活性成分分离的影响。在硅胶G高效板上，366nm下选取甲苯：乙酸乙酯：甲醇：甲酸为展开剂，体积比为10:3:5:3.5， 1%三氯化铝为显色剂时，药桑叶中芦丁、槲皮素、异槲皮苷、紫云英苷和绿原酸五种成分均得到有效的分离，斑点圆整、清晰，比移值在0.2～0.8之间,符合薄层层析要求，为药桑叶的质量控制提供快速的鉴别方法。

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(本文文献格式：李 玲，朱卫敏，张 琴，等.新疆药桑叶中五种活性成分的薄层色谱鉴别[J].山东化工，2017，46(04)：78-79，83.)

Simultaneous Determination of Five Active Ingredients by Thin-Layer Chromatography in The Medicine Mori Folium of Xinjiang

LiLing1,ZhuWeimin1,ZhangQin2,SunLian1

(1.The Pharmacy college，Xinjiang Medical University, Urumqi 830011,China;2.Urumqi vocational university, Urumqi 830002,China)

The TLC method was established separate five active ingredient in the mori folium of Xinjiang. Method：The different plate, view mode, developing agent, Color rendering agent were analyzed on the separation of components in the effection of five kinds of active components. Result：In 366nm toluene, ethyl acetate: methanol, formic acid as expansion agent (10:3:5:3.5) on silica gel G board launched, 1% aluminum chloride as chromogenic agent, The rutin , quercetin, isoquercetin,astragalin and chlorogenic acid get effective separation. Conclusion：This test provides rapid identification method for quality control of medicine mulberry in Xinjiang.

the mori folium; active ingredient; TLC

2017-01-09

新疆医科大学科研创新(XJC201316)

李 玲(1982— )，女，讲师，主要从事新疆天然产物开发利用；孙 莲(1961— )，女，教授，主要从事天然产物分析研究。

TQ460

B

1008-021X(2017)04-0078-02