探讨乙肝病毒基因分型与HBV-DNA载量及临床表现的关系

彭学样，聂林贞，纪前

（1.山东省临沂市莒南县人民医院，山东 临沂 276600；2.莒南县大店中心卫生院，山东 临沂 276600）

探讨乙肝病毒基因分型与HBV-DNA载量及临床表现的关系

彭学样1，聂林贞2，纪前1

（1.山东省临沂市莒南县人民医院，山东 临沂 276600；2.莒南县大店中心卫生院，山东 临沂 276600）

目的 探讨乙肝病毒分型的不同和HBV-DNA载量及临床表现的关系。方法 收集我院于2013年2月-2016年5月间收治的慢性乙型肝炎患者120例，统计分析患者采用FQ-PCR方法对患者HBV-DNA进行定量检测，检测患者血清中ALT、白蛋白、球蛋白、AST、TBIL水平。结果 根据乙肝病毒基因分型情况显示，B型患者41例（34.17 %），C型患者61例（50.83 %），D型患者6例（5.00 %），混合型患者6例（5.00 %），未分型患者6例（5.00 %）。B型HBV-DNA水平明显低于C型和混合型，差异均有统计学意义（P＜0.05）。D型HBV-DNA水平明显低于C型和混合型，差异均有统计学意义（P＜0.05）。B型患者中原发性肝细胞癌、肝硬化、慢性乙型肝炎的发病率均低于C型，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 本次研究中乙肝病毒分型以B型和C型为主，C型较为活跃，复制能力较强，对人体肝功能的破坏能力更强。

乙肝病毒；基因分型；HBV-DNA；临床表现

0 引言

因分型的不同导致了病毒表现出的生物学特性也不尽相同，进而直接影响了患者的临床表现[1-3]。本次研究旨在探讨乙肝病毒分型的不同和HBVDNA载量及临床表现的关系，为临床治疗提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集我院于2013年2月-2016年5月间收治的慢性乙型肝炎患者120例，其中男性患者66例，女性患者54例，年龄23-51岁，平均年龄为（36.36±12.24）岁；本次研究经伦理会审核同意。

1.2 方法

采用FQ-PCR方法对患者HBV-DNA进行定量检测，UNG酶、dUTP均由上海华美生物工程公司制造，HBV-DNA大于103量则视为阳性表达，本次研究中纳入的患者均经两次检测后为阳性。使用HBV基因分型杂交试剂盒，对纳入研究的患者进行基因分型。具体操作为：取混合液100 ul先置于离心管，加入血清检测样本100 ul进行混合，经高温煮沸15min后再经高速离心5 min，取上层清液置于试管中混合均匀，之后依次进行预变性、循环38次，最后进行延伸。采用扩增产物进行冰浴。取核酸探针25 ul、杂交液90 ul加入反应孔内，设置空白对照，摇动混合均匀后在50℃的水浴中放置60 min。在每个孔中加杂交洗液200 ul，重复清洗两次。每孔加入显色剂，检测结果判定方法按P/ N值进行评价，P/N值≥3.0则判定为阳性，P/N值＜3.0则判定为阴性[4]。

1.3 观察指标

检测患者血清中ALT、白蛋白、球蛋白、AST、TBIL水平。

1.4 统计学方法

采用SPSS20.0数据处理，计数资料采用（n，%）表示，经χ2检验，（P＜0.05）表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 乙肝病毒基因分型情况

根据乙肝病毒基因分型情况显示，B型患者41例（34.17 %），C型患者61例（50.83 %），D型患者6例（5.00 %），混合型患者6例（5.00 %），未分型患者6例（5.00 %）。

2.2 基因分型与HBV-DNA载量的关系

B型HBV-DNA水平明显低于C型和混合型，差异均有统计学意义（P＜0.05）。D型HBV-DNA水平明显低于C型和混合型，差异均有统计学意义（P＜0.05）。B型、D型HBV-DNA水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）。C型和混合型HBV-DNA水平比较差异无统计学意义（P＞0.05），详见表1。

表1 基因分型与HBV-DNA载量的关系

2.3 基因分型临床表现的关系

B型患者中原发性肝细胞癌、肝硬化、慢性乙型肝炎的发病率均低于C型，差异均有统计学意义（P＜0.05）；B型患者中无症状携带者的人数明显高于C型，差异有统计学意义（P＜0.05），详见表2。

表2 基因分型临床表现的关系[n(%)]

2.4 基因分型与肝功能情况比较

B型患者中TBill、ALT、球蛋白及AST水平均低于C型患者，差异均有统计学意义（P＜0.05），详见表3。

表3 基因分型与肝功能情况比较

3 讨论

乙型肝炎是全球高发的疾病，据调查显示，世界范围内的HBV携带者高达3亿多人[5]。而我国是HBV的高发地区，我国流行病学调查显示，我国HBV携带者约1.2亿人，乙肝患者高达2000万，约有5 %的几率可能转化为肝癌[6]。乙肝病毒在不断进化，正是由于其不断的进化形成了目前已知的A-H八种类型的基因分型[7]。

在本次研究中探讨了乙肝病毒分型的不同和HBV-DNA载量及临床表现的关系，结果显示，在基因分型与HBV-DNA载量的关系中B型HBVDNA水平明显低于C型和混合型（P＜0.05）。D型HBV-DNA水平明显低于C型和混合型（P＜0.05）。以上结果表明，C型和混合型的病毒较为活跃，复制能力较强。这与之前的报道相似[8-9]，该报道显示，不同基因型的乙肝病毒活跃度及抵御机体免疫系统的能力不同。

综上所述，基因分型呈现出一定的地域差异，本次研究中乙肝病毒分型以B型和C型为主，C型较为活跃，复制能力较强，对人体肝功能的破坏能力更强。乙肝病毒分型的研究有助于确定传染源，对临床治疗具有重要价值。

[1] 苏荣,罗娜,杨延斌,等.HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者乙肝病毒基因变异和分型研究[J].南方医科大学学报,2012,32(12):1804-1807.

[2] 刘爱平,徐洪涛,邢同京,等.乙肝病毒基因分型与慢性乙型肝炎患者临床和病理的相关性研究[J].中西医结合肝病杂志,2010,20(3):175-177.

[3] 李卫昆.乙肝病毒基因分型与HBVDNA及临床表现的关系[J].中国社区医师,2015,29(8):105-105,107.

[4] 孙珍,赵志军,师志云,等.宁夏地区乙肝病毒感染者HBV基因分型与临床意义[J].宁夏医科大学学报,2014,36(1):34-37.

[5] 李洁萍,谢新生,张戡,等.嘉兴地区乙肝病毒基因分型与病理及耐药的关系[J].全科医学临床与教育,2014,12(2):159-160,163.

[6] 刘永兰,包晗,赵锦荣,等.高通量流式荧光微球悬液芯片检测乙肝病毒基因分型[J].现代生物医学进展,2012,12(35):6805-6809.

[7] 牟一坤,顾琳,曾淑珍,等.不同临床类型慢性乙肝患者乙肝病毒基因型检测[J].分子诊断与治疗杂志,2010,2(1):46-49.

[8] 胡玉弘,李莹,冯军,等.浅谈承德地区HBV的基因分型与阿德福韦酯的疗效及耐药变异的关系[J].当代医药论丛,2014,12(16):5-6.

[9] 李延武,李卓成.基因芯片技术在乙肝病毒分型和耐药突变检测中的应用[J].实用临床医药杂志,2015,19(9):49-51,58.

To Investigate the Relationship between Hepatitis B Virus Genotype and HBV-DNA Load and Clinical Manifestation

PENT Xue-yang1, NIE Lin-zhen2, JI Qian1

(1.The People’s Hospital of Junan, Linyi, Shandong, 276600, China; 2.Dadian Central Health Center of Junan, Linyi, Shandong, 276600, China)

Objective To investigate the relationship between hepatitis B virus typing, HBV-DNA load and clinical manifestations. Methods A total of 120 patients with chronic hepatitis B admitted in our hospital from February 2013 to May 2016 were collected. were analyzed by FQ-PCR method for quantitative detection of patients with HBV-DNA, serum ALT, albumin, glob ulin, AST, TBIL. Results According to hepatitis B virus genotype the situation display,there were 41 patients with type B (34.17%),there were 61 patients with type C (50.83%),there were 6 patients with type D (5%),there were 6 patients with mixed type (5%),unclassified patients were in 6 patients (5%).The levels of type HBV-DNA B were lower than those of type C and mixed type,the differences were statistically significant (P＜0.05).The levels of type HBV-DNA D were lower than those of type C and mixed type,The differences were statistically significant (P＜0.05).The incidence of primary hepatocellular carcinoma, cirrhosis and chronic hepatitis B in patients with type B is lower than that of type C,the differences were statistically significant (P＜0.05). Conclusion Hepatitis B virus subtypes are mainly type B and type C in this study, C type is more active, replication ability is stronger, and the damage to human liver function is stronger.

Hepatitis B virus; Genotyping; HBV-DNA; Clinical manifestation

10.19335/j.cnki.2096-1219.2017.08.56