左卡尼汀对糖尿病腹膜透析患者外周血T细胞亚群及炎症因子的影响

2017-08-22杨芦蓉宋志霞何川鄂三峡大学第一临床医学院宜昌市中心人民医院肾内科湖北宜昌443000三峡大学药学院湖北宜昌443000

中国药房 2017年20期

杨芦蓉，杨林，宋志霞，何川鄂，马岚（.三峡大学第一临床医学院/宜昌市中心人民医院肾内科，湖北宜昌 443000；.三峡大学药学院，湖北宜昌 443000）

杨芦蓉1＊，杨林1，宋志霞1，何川鄂1，马岚2（1.三峡大学第一临床医学院/宜昌市中心人民医院肾内科，湖北宜昌 443000；2.三峡大学药学院，湖北宜昌 443000）

目的：探讨左卡尼汀对糖尿病腹膜透析患者外周血T细胞及炎症因子的影响。方法：选取2013年9月－2015年10月宜昌市中心人民医院收治的100例糖尿病腹膜透析患者为研究对象，按随机数字表法分为常规治疗组和左卡尼汀组，各50例。常规治疗组患者给予腹膜透析治疗及常规治疗；左卡尼汀组患者在常规治疗组的基础上加用左卡尼汀1.0 g加入0.9%的氯化钠注射液20 mL中，每周3次，静脉注射，连续应用12周。两组患者均于治疗前后检测CD3+、CD4+、Th1、Th2及肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（INF-γ）、白细胞介素10（IL-10），IL-4含量变化，并比较两组患者T-bet及GATA-3转录因子表达量。结果：治疗后，两组患者CD3+、CD4+、Th2细胞、GATA-3表达量及IL-10、IL-4水平均显著升高，Th1细胞、T-bet表达量及TNF-α、INF-γ水平显著降低，且左卡尼汀组显著优于常规治疗组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：左卡尼汀可通过改善T细胞亚群及Th1/Th2细胞亚群，从而改善患者的炎症状态，促进相关转录因子表达。

Th1；Th2；T细胞亚群；炎症因子；左卡尼汀；腹膜透析

糖尿病是引起终末期肾病的主要病因之一，腹膜透析作为一种有效的治疗手段已被越来越多的患者所接受。但腹膜透析存在多种并发症，且病死率较高，然而其相关机制至今仍未明确。有研究表明，免疫因素可引起腹膜透析患者多种因子的调控异常[1]。根据产生相关细胞因子的不同，T细胞分为Th1及Th2细胞，其中Th1主要分泌肿瘤坏死因子α（TNF-α）及干扰素γ（INF-γ），Th2细胞主要分泌白细胞介素10（IL-10）及IL-4等炎症因子。在机体免疫系统中，Th1/Th2稳态起着至关重要的作用，已有研究发现，Th1及Th2细胞参与糖尿病腹膜透析疾病的发生发展[2]，但国内对此研究较少。为此，本研究观察了糖尿病腹膜透析患者外周血Th1/Th2的变化，以探讨其在糖尿病腹膜透析中的意义。

1 资料与方法

1.1 纳入与排除标准

纳入标准：符合《中国2型糖尿病防治指南》[3]中的糖尿病及糖尿病肾病Ⅴ期的诊断标准。

排除标准：（1）有重度心功能不全（左室射血分数＜0.35）者；（2）有心肌梗死、脑梗死及脑出血等病史者；（3）严重营养不良者；（4）存在糖尿病酮症及乳酸酸中毒等严重并发症者；（5）近1个月使用其他抗氧化药物者。

1.2 研究对象

选取2013年9月－2015年10月宜昌市中心人民医院收治的糖尿病腹膜透析患者100例，按随机数字表法分为常规治疗组和左卡尼汀组，各50例。其中，常规治疗组患者男性24例，女性26例；年龄为43～68岁，平均年龄（57.4±9.8）岁；病程1～7年，平均病程（4.1±1.3）年。左卡尼汀组患者男性25例，女性25例；年龄为45～70岁，平均年龄（58.2±9.1）岁；病程1～7年，平均病程（4.4±1.6）年。两组患者在性别、年龄、病程等一般资料比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会批准，且患者与家属均知情同意，并签署知情同意书。

1.3 治疗方法

常规治疗组患者在采取腹膜透析治疗的基础上给予控制血压、血糖、血脂，纠正贫血及钙磷代谢紊乱等治疗。左卡尼汀组患者在常规治疗组的基础上加用左卡尼汀注射液（东北制药集团沈阳第一制药有限公司，批准文号：国药准字H20113215，规格：规格5 mL∶1 g）1.0 g加入0.9%氯化钠注射液20 mL，每周3次，静脉注射，连续应用12周。

1.4 观察指标

（1）观察两组患者治疗前后T细胞亚群、Th1/Th2细胞亚群表达水平。（2）观察两组患者治疗前后炎症因子（TNF-α、INF-γ、IL-10、IL-4）水平。（3）观察两组患者治疗前后T-bet及GATA-3转录因子表达量。

1.5 统计学方法

采用SPSS 17.0软件对数据进行统计分析。计量资料以±s表示，采用t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者治疗前后T细胞亚群表达水平比较

治疗前，两组患者CD3+、CD4+表达水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，两组患者CD3+、CD4+表达水平均显著升高，且左卡尼汀组显著高于常规治疗组，差异均有统计学意义（P＜0.05），详见表1。

2.2 两组患者治疗前后Th1/Th2细胞亚群表达水平比较

表1 两组患者治疗前后T细胞亚群表达水平比较（±s,%%）Tab 1 Comparison of the expression of T cell subsets between 2 groups before and after treatment（±s,%%）

注：与治疗前比较，＊P＜0.05；与常规治疗组比较，#P＜0.05Note：vs.before treatment，＊P＜0.05；vs.conventional therapy group，#P＜0.05

n组别常规治疗组50左卡尼汀组50时期治疗前治疗后治疗前治疗后CD3+40.3±6.9 47.7±7.3＊39.8±7.1 55.4±7.9＊#CD4+15.4±6.1 21.5±6.9＊14.9±6.2 29.2±6.1＊#

治疗前，两组患者体内CD4+INF-γ+T细胞（Th1细胞）及CD4+IL-10+T细胞（Th2细胞）表达水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，两组患者Th1细胞表达水平显著降低，Th2细胞表达水平显著升高，且左卡尼汀组显著优于常规治疗组，差异均有统计学意义（P＜0.05），详见表2。

表2 两组患者治疗前后Th1/Th2亚群表达水平比较（±s,%%）Tab 2 Comparison of the expression of Th1/Th2 subsets between 2 groups before and after treatment（±s,%%）

注：与治疗前比较，＊P＜0.05；与常规治疗组比较，#P＜0.05Note：vs.before treatment，＊P＜0.05；vs.conventional therapy group，#P＜0.05

CD4+IL-10+ 9.2±6.8 15.2±7.6＊8.9±6.9 18.9±7.1＊#组别常规治疗组n 50左卡尼汀组50时期治疗前治疗后治疗前治疗后CD4+INF-γ+ 44.3±6.5 38.9±6.6＊45.1±6.4 31.5±6.8＊#

2.3 两组患者治疗前后炎症因子水平比较

治疗前，两组患者体内TNF-α、INF-γ、IL-10、IL-4水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，两组患者TNF-α、INF-γ水平显著降低，IL-10、IL-4水平显著升高，且左卡尼汀组显著优于常规治疗组，差异均有统计学意义（P＜0.05），详见表3。

表3 两组患者治疗前后炎症因子水平比较（±s，pg/mL）Tab 3 Comparison of inflammatory factor levels between 2 groups before and after treatment（±s，pg/mL）

注：与治疗前比较，＊P＜0.05；与常规治疗组比较，#P＜0.05Note：vs.before treatment，＊P＜0.05；vs.conventional therapy group，#P＜0.05

IL-4 134.6±19.2 234.2±16.9＊132.7±18.4 292.9±17.1＊#组别常规治疗组n 50左卡尼汀组50时期治疗前治疗后治疗前治疗后TNF-α 321.3±14.5 267.6±18.9＊323.5±13.9 154.5±18.3＊#INF-γ 349.2±16.7 244.8±17.1＊351.2±17.1 136.9±16.8＊#IL-10 125.2±22.3 172.9±23.6＊122.3±21.7 231.5±24.8＊#

2.4 两组患者治疗前后T-bet及GATA-3转录因子表达量比较

治疗前，两组患者体内T-bet及GATA-3表达量比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，两组患者T-bet表达量显著降低，GATA-3表达量显著升高，且左卡尼汀组显著优于常规治疗组，差异均有统计学意义（P＜0.05），详见图1、图2。

图1 两组患者T-bet转录因子表达量比较Fig 1 Comparison of the expression of T-bet transcription factor between 2 groups

图2 两组患者GATA-3转录因子表达量比较Fig 2 Comparison of the expression of GATA-3 transcription factor between 2 groups

3 讨论

目前，由糖尿病引发的终末期肾病的发病率逐年升高，腹膜透析以其设备简单、操作方便的特点被广大患者所采用。已有研究表明，长期炎性物质、化学因素、代谢性酸中毒、贫血及氧化应激的刺激，体内肌酐、β2微球蛋白等的聚集，均导致机体处于微炎症状态，表现为体内存在较高浓度的IL-1、IL-6及超敏C反应蛋白等炎症因子，并且这些炎症因子还可促进单核巨噬细胞分泌更多的炎症因子，使机体处于慢性炎症状态，从而加重肾衰竭的发展，并增加并发症的发生[4-6]，对预后产生不良的影响。因此，如何降低这些炎症反应，从而提高患者的生存率和生活质量已经成为临床研究的重点内容。左卡尼汀是广泛存在于体内的一种常见氨基酸——左旋肉毒碱，是脂肪氧化过程中的重要分子，具有一定的抗炎和抗氧化作用，可抑制氨基末端激酶及体内磷酸化蛋白的活性，从而抑制炎症因子的分泌，降低体内单核细胞的活化，改善患者生存质量[7]。

Th1/Th2细胞是由体内幼稚T细胞分化而来，参与适应性免疫应答，两者具有独立的分化和调节机制，可通过多种途径调节机体免疫状态。传统观念根据分泌的细胞因子的不同将两者分开，Th1细胞可分泌较多的TNF-α、INF-γ等，多介导细胞免疫；Th2细胞可分泌较多的IL-10、IL-4等，多介导体液免疫[8]，并且，体内Th1/Th2的失衡可导致多种疾病的发生发展[9]。在T细胞向不同方向分化中，不同的转录因子起着不同的作用[10]。T-bet在Th1细胞分化中起着决定性的作用，而GATA-3在Th2细胞分化中起着决定性的作用。

T细胞作为机体免疫反应中最主要的效应细胞，左卡尼汀可通过调控T细胞的反应来影响疾病的相关进展[11]。本研究结果显示，治疗后，左卡尼汀组患者T细胞亚群及Th1/Th2细胞亚群表达水平、炎症因子水平、T-bet及GATA-3转录因子表达量均显著优于常规治疗组，差异均有统计学意义（P＜0.05），与多项研究结果基本吻合[11-12]。提示左卡尼汀可明显改善机体炎症状态，促进机体T细胞向Th2细胞极化偏移，从而改善机体的炎性状态，促进疾病的恢复。

综上所述，左卡尼汀可通改善T细胞亚群及Th1/ Th2细胞亚群，从而改善患者的炎症状态，促进相关转录因子表达。但本研究样本量较小，有待大样本、多中心的研究进一步探讨。

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（编辑：黄欢）

Effects of Levocarnitine on Peripheral Blood T Cell Subsets and Inflammatory Factors in Diabetic Patients Underwent Peritoneal Dialysis

YANG Lurong1，YANG Lin1，SONG Zhixia1，HE Chuan’e1，MA Lan2（1.Dept.of Nephrology，First College of Clinical Medicine，China Three Gorges University/Yichang Central People’s Hospital，Hubei Yichang 443000，China；2.School of Pharmacy，China Three Gorges University，Hubei Yichang 443000，China）

OBJECTIVE：To investigate the effects of levocarnitine on peripheral blood T cell subsets and inflammatory factors in diabetic patients underwent peritoneal dialysis.METHODS：A total of 100 diabetic patients underwent peritoneal dialysis in selected as research objects were divided into conventional therapy group and levocarnitine group according to random number table，with 50 cases in each group.Conventional therapy group

peritoneal dialysis and conventional therapy.Levocarnitine group was additionally given levocarnitine 1.0 g added into 0.9%Sodium chloride injection 20 mL intravenously，3 times a week，on the basis of conventional therapy group for 12 weeks.CD3+，CD4+，the proportion of Th1 and Th2，the contents of TNF-α，INF-γ，IL-10 and IL-4 in supernatant were all detected before and after treatment.The expression of T-bet and GATA-3 were compared between 2 groups.RESULTS：After treatment，CD3+，CD4+，Th2 cells，GATA-3 expression and IL-10，IL-4 levels were significantly increased，the expression of Th1 cells，T-bet content and TNF-α and INF-γ were significantly reduced，and levcarnitine group was significantly better than conrentional therapy group，with statistically significant（P＜0.05）.CONCLUSIONS：Levocarnitine can improve inflammatory reaction and the expression of related transcription factors by promoting T cell subsets and Th1/Th2 cell subsets.

Th1；Th2；T cell subsets；Inflammatory factors；Levocarnitine；Peritoneal dialysis

R459.5

1001-0408（2017）20-2837-03

2016-07-20

2017-04-28）

＊副主任医师。研究方向：肾内科疾病。电话：0717-6483576。E-mail：296639644@qq.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.20.29