青白灌肠液对活动期溃疡性结肠炎患者临床疗效及炎性因子、黏附因子的影响*

杨 磊李 莹袁星星李丹丹王炳予刘长发张雅丽△

（1.黑龙江省中医药科学院南岗分院，黑龙江 哈尔滨 150001；2.黑龙江省中医药科学院三辅分院，黑龙江 哈尔滨 150036）

·研究报告·

青白灌肠液对活动期溃疡性结肠炎患者临床疗效及炎性因子、黏附因子的影响*

杨 磊1李 莹2袁星星1李丹丹1王炳予1刘长发1张雅丽1△

（1.黑龙江省中医药科学院南岗分院，黑龙江 哈尔滨 150001；2.黑龙江省中医药科学院三辅分院，黑龙江 哈尔滨 150036）

目的观察青白灌肠液对活动期溃疡性结肠炎的临床疗效及对血清炎性因子、黏附因子的影响。方法选取符合诊断和纳入标准的活动期左半结肠型溃疡性结肠炎患者59例，按照随机数字表法分为两组，其中对照组给予美沙拉嗪肠溶片口服治疗，治疗组在对照组的基础上联合中药青白灌肠液治疗，两组疗程均为6周。分别观察两组患者临床疗效、Baron肠镜积分、结肠组织病理评分及血清白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、血管内皮细胞黏附分子-1（VCAM-1）的水平。结果治疗组总有效率为93.33%，明显高于对照组的82.76%（P＜0.05）；治疗组够明显改善结肠Baron内镜及组织病理评分（P＜0.01），明显优于对照组（P＜0.01）；治疗组治疗后血清IL-1β、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1较治疗前均显著降低（P＜0.01），治疗后组间比较，治疗组明显优于对照组（P＜0.01）。结论青白灌肠液联合美沙拉嗪能够显著改善湿热蕴结型活动期溃疡性结肠炎的临床症状及肠道黏膜评分，下调IL-1β、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1水平，疗效显著。

青白灌肠液 活动期溃疡性结肠炎 炎性因子 黏附因子

溃疡性结肠炎是一种病因及发病机制尚不清楚的以侵犯结肠和直肠的黏膜及黏膜下层为主要特征的非特异性炎症。病变呈连续性、弥漫性分布，多从直肠开始，逐渐累及全结肠甚至回肠末端，其临床表现为持续或者反复发作的腹痛腹泻、黏液样脓血便、里急后重和不同程度的周身症状［1-2］。经调查发现，我国轻中度溃疡性结肠炎的病变以左半结肠为主，因此局部治疗起着重要的作用［3］。中医药在治疗溃疡性结肠炎方面富有特色，特别是中药保留灌肠，作为一种治疗轻中度活动期溃疡性结肠炎的重要手段，尤其适用于左半结肠型溃疡性结肠炎，不仅疗效显著而且无明显的不良反应，已被广泛运用于临床［4-5］。青白灌肠液为本院消化科治疗溃疡性结肠炎的经验方，不仅能够明显抑制血管通透性，还有显著的镇痛和止泻的作用，临床疗效显著［6-7］。本研究通过探讨青白灌肠液对活动期左半结肠溃疡性结肠炎患者炎性因子及黏附因子的影响，进一步明确其作用机制，为临床治疗提供新思路。现将研究结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 病例选择 西医诊断标准参考《炎症性肠病诊断与治疗的共识意见（2012年·广州）》［8］中活动期溃疡性结肠炎相关诊断标准；中医诊断标准参考《溃疡性结肠炎中医诊疗共识意见》［9］中湿热蕴结证。纳入标准：符合活动期溃疡性结肠炎西医诊断标准和湿热蕴结证中医辨证标准；病变部位位于左半结肠，包括降结肠、直乙结肠、直肠；年龄20～65岁；签署临床伦理研究知情同意书者。排除标准：缓解期、爆发性溃疡性结肠炎；病变部位位于右半结肠或者全结肠者；3个月内应用糖皮质激素、水杨酸制剂、止泻药等溃疡性结肠炎治疗者；克罗恩病、放射性结肠炎、缺血性结肠炎或肠结核者等；伴严重并发症或胃、十二指肠溃疡、肝功能异常、消化系恶性肿瘤者；伴有呼吸、循环、泌尿、内分泌、神经系统严重疾病；既往有水杨酸制剂过敏史者；妊娠期、准备妊娠及哺乳期妇女。剔除标准：患者依从性差，自行加药或停药者；资料不全影响疗效，影响安全性者；患者在临床试验中因各种原因而不愿意继续者；发生严重的并发症，不宜继续参加本试验者。

1.2 临床资料 选取2016年5月至2016年12月于黑龙江省中医药科学院南岗分院消化科门诊及住院处就诊的溃疡性结肠炎患者59例，按照就诊先后顺序编号，采用随机数字表法，分为对照组29例与对照组30例，两组患者性别、年龄、病程、发病类型、程度及发病部位等一般资料差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

1.3 治疗方法 对照组给予美沙拉嗪肠溶片（国药准字H19980148，葵花药业集团有限公司）口服，每次1 g，每日4次。治疗组在对照组基础上给予青白灌肠液（组成：青黛5 g，白头翁15 g，白及10 g，血竭10 g，地榆炭10 g，血余炭5 g，三七5 g，冰片0.3 g）保留灌肠，由本院中药制剂室统一熬制，每次300mL，睡前灌肠，两组疗程均为6周并随访8周。

表1 两组患者一般资料比较

1.4 观察项目 1）肠镜检查评分。分别于治疗前、后给予两组患者结肠镜检查，并采用Baron评分方法［10］。2）结肠组织病理评分。分别于治疗前、后取结肠组织进行病理检查，以黏膜固有层有少量中性粒细胞浸润计0分；黏膜固有层有明显中性白细胞浸润，累及50%以上隐窝者计2分；黏膜固有层大量中性粒细胞浸润，伴隐窝脓肿计4分；黏膜固有层有明显急性炎症伴溃疡形成计6分。3）炎性因子及黏附因子。分别于治疗前、后收集两组患者清晨空腹静脉血，室温环境凝固30min后以2500 r/min离心10min，上清液于-20℃保存。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）法检测白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、血管内皮细胞黏附分子-1（VCAM-1）的浓度，检测步骤严格按照试剂盒说明书。

1.5 疗效标准 参照《溃疡性结肠炎中西医结合诊疗指南（草案）》中疗效标准［11］。完全缓解：临床症状消失，肠镜显示黏膜病变基本消失或主要症状及肠黏膜病变活动指数总分值降低≥95%。显效：临床主要症状明显缓解，肠镜显示黏膜病变明显减轻或主要症状及肠黏膜病变活动指数总分值降低≥70%，<95%。有效：临床主要症状有所缓解，肠镜示黏膜病变有所减轻或主要症状及肠黏膜病变活动指数总分值降低≥30%，<70%。无效：经治疗后临床症状、内镜及病理检查结果均无改善或加重，或主要症状及肠黏膜病变活动指数总分值降低<30%。

1.6 统计学处理 应用SPSS19.0统计软件。计量资料以（±s）表示，两组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用配对样本t检验；计数资料组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组临床疗效比较 见表2。治疗组总有效率明显高于对照组（P＜0.05）。

2.2 两组黏膜内镜及组织病理评分比较 见表3。两组治疗后Baron内镜及组织病理评分较治疗前均降低（P＜0.05或P＜0.01），治疗组均优于对照组（P＜0.01）。

2.3 两组治疗前后炎性因子比较 见表4。两组治疗后IL-1β、TNF-α较治疗前均降低（P＜0.05或P＜0.01），治疗组均优于对照组（P＜0.01）。

表2 两组临床疗效比较（n）

表3 两组黏膜内镜及组织病理评分比较（分，±s）

与本组治疗前比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与对照组治疗后比较，△P＜0.05，△△P＜0.01。下同。

组 别 时间 Baron内镜评分 结肠组织病理评分治疗组 治疗前 6.43±2.07 4.93±1.97（n＝30） 治疗后 1.31±1.28**△△1.29±1.01**△△对照组 治疗前 5.93±1.94 5.21±2.02（n＝29） 治疗后 3.66±1.72*3.15±1.56*

表4 两组治疗前后炎性因子比较（ng/mL，±s）

表4 两组治疗前后炎性因子比较（ng/mL，±s）

组别 时间 IL-1β TNF-α治疗组 治疗前 1.30±0.37 4.95±1.21（n＝30） 治疗后 0.66±0.22**△△1.59±0.83**△△对照组 治疗前 1.23±0.34 4.71±1.02（n＝29） 治疗后 1.07±0.38*3.15±1.16*

2.4 两组治疗前后黏附因子比较 见表5。两组治疗后ICAM-1、VCAM-1较治疗前均降低（P＜0.05或P＜0.01），治疗组均优于对照组（P＜0.01）。

表5 两组治疗前后黏附因子比较（ng/mL，±s）

表5 两组治疗前后黏附因子比较（ng/mL，±s）

组别 时间 ICAM-1 VCAM-1治疗组 治疗前 68.38±6.17 74.95±21.25（n＝30） 治疗后 47.16±4.22**△△43.15±11.17**△△对照组 治疗前 65.73±5.74 73.71±23.01（n＝29） 治疗后 57.07±4.98*61.59±16.82*

2.5 不良反应 两组治疗过程中均无病例退出、失访，且无明显不良反应事件发生。对照组随访复发7例，复发率24.14%，治疗组随访复发3例，复发率10.00%，两组复发率组间比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨 论

溃疡性结肠炎是一种原因尚不明确的肠道非特异性炎性病变，其病机可能与遗传、环境、免疫等多因素参与有关，而细胞因子的调控失衡是引起肠道黏膜免疫反应异常和慢性炎症的主要原因。NF-κB信号通路的活化是多种炎症介质作用机制的共同通道，由NF-κB调控的前炎性因子IL-1β、TNF-α等细胞因子在溃疡性结肠炎的发生发展过程中起着举足轻重的作用［12］。近年来的研究发现，IL-1β、TNF-α与溃疡性结肠炎的疾病活动度、Baron积分及组织病理学分级呈明显正相关，活动期溃疡性结肠炎患者血清IL-1β水平明显高于缓解期，重度溃疡性结肠炎患者血清IL-1β水平明显高于轻、中度患者［13-14］。另由中性粒细胞、巨噬细胞和内皮细胞所分泌的IL-1β一方面能够促进炎症细胞的聚集与活化，另一方面还能通过刺激其他炎症介质产物、细胞因子上调炎症反应，参与溃疡性结肠炎黏膜的炎症反应［15］。且由巨噬细胞、T细胞和单核细胞所产生的TNF-α能够作用于中性粒细胞产生大量的氧自由基，其一方面通过协调INF-γ改变肠上皮的屏障特性和形态结构，增加肠道黏膜的通透性从而诱导肠上皮的细胞凋亡，另一方面能够通过吞噬补体的片段和细胞的产物，引起间质中蛋白质的破坏、细胞坏死和黏膜水肿的发生［16］。黏附分子（AMS）是一类具有多种生物功能的糖蛋白，能够介导细胞与细胞基质、细胞与细胞间的相互作用并参与免疫与炎症反应，其中的ICAM-1、VCAM-1与溃疡性结肠炎的发生和维持关系最为密切［17-18］。研究发现，炎症刺激可以促进ICAM-1和VCAM-1的表达，而黏附因子的表达有可以进一步刺激并活化NF-κB，由此形成的反馈循环使得炎症不断加重［19-20］。

现代医学对溃疡性结肠炎的治疗缺乏行之有效的根治方法，临床上主要采氨基水杨酸制剂、糖皮质激素、免疫抑制剂等药物对症治疗，但病情控制情况及预后均欠佳［21］。美沙拉嗪目前己经广泛应用于溃疡性结肠炎的治疗中［22］。中医学认为溃疡性结肠炎属于“泄泻”“肠癖”等范畴，本病多因饮食不节或不洁，嗜食辛辣刺激之物，导致湿浊蕴结脾胃，困阻中焦，瘀而化热，湿热下注大肠，阻滞气机以致血瘀，故湿热、血瘀交杂贯穿本病全过程，湿热交杂缠绵不愈，反复发作，病程较长。青白灌肠液具有清热利湿、凉血解毒、化瘀止痛的功效，方中青黛味咸，性寒，归肝经，具有清热解毒凉血的功效，为君药。通过体内及体外研究发现，青黛能够显著改善溃疡性结肠炎大鼠肠道黏膜炎症，还能够显著降低体内及细胞内的的炎性因子［23］。白头翁性苦、寒，归胃、大肠经，清热解毒、凉血止痢，既能清胃肠之湿热，又能清血分之热毒，白及味苦、甘、涩，性微寒，归肝、胃经，收敛止血、消肿生肌，血竭味甘、咸，性平，祛瘀定痛，止血生肌，地榆炭味苦、酸、涩，性微寒，凉血止血，解毒敛疮，以上诸药共为臣药。研究发现，地榆、白及能够通过降低IL-1β，升高IL-10水平，下调NF-κB p65蛋白活性，从而抑制NF-κB活性改善溃疡性结肠炎模型大鼠的肠道形态损伤及肠组织病理学评分［24］。血余炭、三七止血化瘀，能够协同血竭、地榆炭增强止血的功效，作为止血之药而不留瘀，共为佐药。实验研究发现，三七提取物能够促进肠道溃疡面的愈合［25］。冰片清热止痛，《医林纂要》中云“冰片主散郁火，催生，性走而不守，亦能生肌止痛”。现代研究证明，通过局部应用冰片轻微刺激感觉神经，能够达到一定的抑菌抗炎、止痛、防腐的作用［26］。本研究发现，青白灌肠液联合美沙拉嗪能够明显改善活动期左半结肠型溃疡性结肠炎Baron内镜及组织病理评分，明显优于对照组，且总有效率明显优于对照组。治疗后两组血清IL-1β、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1较治疗前均降低，其中青白灌肠液联合美沙拉嗪与本组治疗前比较，差异均具有显著统计学意义。两组治疗过程中均无病例退出、失访，且无明显不良反应事件发生。治疗组复发率明显低于对照组。

综上所述，青白灌肠液联合美沙拉嗪能够显著改善湿热蕴结型活动期溃疡性结肠炎的临床症状及肠道黏膜评分，其作用机制可能是通过下调IL-1β、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1水平，抑制NF-κB通路的活化实现的，其疗效显著，复发率低，值得临床进一步研究。

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Effects of Qingbai Enema on Inflammatory Factors and Adhesion Factors in Patientswith Active Ulcerative Colitis

YANG Lei，LI Ying，YUAN Xingxing，et al. Heilongjiang Academy of Traditional ChineseMedicine，Nangang District，Heilongjiang，Harbin 150001，China.

Objective：To observe the clinical effect of Qingbai Enema in patients with active ulcerative colitis and its influence on serum inflammatory cytokines and adhesion factors.Methods：59 patients with active left colonic ulcerative colitis of accumulated damp-heat type were divided into the control group（29 cases）and the treatment group（30 cases）according to random number table.The control group was treated with Mesalazin enteric-coated tablets and the treatment group was treated with Mesalazin enteric-coated tablets combined with Qingbai Enema；the course of treatmentwas 6 weeks in both groups.The clinical efficacy，Baron endoscopic score and colon tissue pathology scorewere observed；ELISA method was used to detect the levels of serum inflammatory factors（IL-1β，TNF-α）and adhesion factors（ICAM-1，VCAM-1）.Results：The total effective rate of the treatment group was 93.3%，the control group 82.76%；the difference was statistically significant（P<0.05）.Baron endoscopic score and colon tissue pathology score were improved in the treatment group after treatment（P< 0.01），obviously better than the control group（P<0.01）.After treatment，the serum IL-1β，TNF-α，ICAM-1 and VCAM-1 were significantly lower in the treatment group（P<0.01），obviously better than the control group（P< 0.01）.Conclusion：Qingbai Enema combined with Mesalazin enteric-coated tablets can obviously improve the clinical symptoms，Baron endoscopic score and colon tissue pathology score of patientswith active ulcerative colitis of accumulated damp-heat type，down-regulation of the level of IL-1β，TNF-α，ICAM-1 and VCAM-1，with an obvious curative effect.

Qingbai Enema；Active ulcerative colitis；Inflammatory factor；Adhesion factor

R574.62

A

1004-745X（2017）07-1145-04

10.3969/j.issn.1004-745X.2017.07.005

2017-04-05）

国家中医药管理局科学技术专项课题（2016ZX05）；黑龙江省博士后科研启动基金（LBH-Q13156）

△通信作者（电子邮箱：zhangyl_2013@sina.com）