凋亡抑制基因Livin和Survivin在食管癌中表达及其与胸腔镜下根治术疗效的相关性

2017-08-08刘泉

中国老年学杂志 2017年14期

关键词：胸腔镜根治术食管癌

刘泉

(三峡大学第一临床医学院宜昌市中心人民医院，湖北宜昌 443003)

凋亡抑制基因Livin和Survivin在食管癌中表达及其与胸腔镜下根治术疗效的相关性

刘泉1

(三峡大学第一临床医学院宜昌市中心人民医院，湖北宜昌 443003)

目的探讨凋亡抑制基因Livin和Survivin在食管癌中表达与胸腔镜下根治术疗效的相关性。方法该行胸腔镜根治术治疗的食管癌患者50例，采用免疫组织化学法检测其食管癌组织和癌旁组织中凋亡抑制基因Livin和Survivin的表达，根据凋亡抑制基因Livin和Survivin表达情况分析其与患者胸腔镜下根治术远处转移率、复发率、5年生存率的关系。结果癌组织凋亡抑制基因Livin和Survivin表达阳性率高于正常的癌旁组织(P<0.05)；有远处转移患者的两基因表达阳性率高于无远处转移患者，有复发患者的两基因表达阳性率高于无复发患者，≤5年生存率患者的两基因表达阳性率高于>5年的患者(P<0.05)；凋亡抑制基因Livin和Survivin两者联合评价食管癌患者胸腔镜下根治术疗效敏感性、特异性及准确性均高于两基因单独评价(P<0.05)。结论凋亡抑制基因Livin和Survivin在食管癌中高表达，其与远处转移、复发及患者5年生存率有关，凋亡抑制基因Livin和Survivin阴性表达者术后疗效较良好且对术后疗效判断具有较高的敏感性、准确性及特异性。

凋亡抑制基因Livin；Survivin；食管癌；胸腔镜下根治术

食管癌具有较高的发病率和死亡率〔1，2〕。Livin是凋亡抑制细胞蛋白(IAPs)中一种新发现的基因，能延缓细胞凋亡且在大多数恶性肿瘤中呈高表达状态；Survivn也是凋亡抑制细胞蛋白中一种抗凋亡、调节细胞周期和参与血管生成的基因，在正常细胞中呈关闭状态，而在肿瘤组织中呈高表达状态，可参与肿瘤的发生发展，被认为是肿瘤相关基因〔3，4〕。本研究通过检测胸腔镜下根治术食管癌患者Livin和Survivin表达情况，观察其与手术疗效的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料回顾性分析2010年1月至2011年5月于三峡大学第一临床医学院行胸腔镜根治术治疗食管癌患者50例。纳入标准：(1)均诊断为食管癌且年龄>60岁；(2)均积极配合治疗且可接受长时间随访；(3)没有手术史或其他肿瘤病史〔5〕。排除标准：(1)伴有肝肾等其他器官性疾病；(2)伴有其他全身性代谢疾病等其他严重疾病；(3)有手术禁忌证。其中男30例，女20例，年龄61～72岁，平均(67.32±6.12)岁，TNM分期为Ⅰ期9例，Ⅱ期12例，Ⅲ期21例，Ⅳ期8例，病理诊断为鳞癌35例，腺癌10例，腺鳞癌5例。胸腔镜下根治术中采集全部患者食管癌组织及对应的癌旁组织。本研究通过本院伦理委员会审核及批准。

1.2 试剂与操作方法采用美国Neomarkers公司生产的Livin鼠抗人单克隆抗体，抗体稀释浓度为1∶150，采用免疫组织化学检查法检测Livin。采用美国Santa Cruz公司生产的Survivin鼠抗人单克隆抗体，抗体稀释浓度为1∶100，同时采用免疫组织检查法检测Survivin，由福州迈新生物技术科技公司提供即用型快捷 MaxvisionTM检测试剂盒，每批染色均设已知阳性切片作阳性对照，磷酸盐缓冲液(PBS) 代替一抗为阴性对照。

1.3 结果判断选用两位有经验的医师采用双盲法观察每张切片。Survivin定位在细胞质，染色为棕褐色颗粒为阳性表达，Livin主要定位在细胞质，也有少部分在细胞核中，染色为黄色颗粒的为阳性表达，依照相关报道定下阳性判断标准〔6〕。对切片中组织染色强度进行计分：细胞无显色为0分，细胞呈淡黄色为1分，细胞呈棕黄色为2分，细胞呈棕褐色为3分(参照背景着色相而确定染色深浅)。对切片中癌细胞数的百分比进行评分：阴性为0分，阳性癌细胞≤10%为1分，11%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分，染色强度计分与阳性细胞的百分比计分的乘积>3分为免疫反应阳性。

1.4 统计学方法采用SPSS22.0软件进行χ2检验、t检验。

2 结果

2.1 凋亡抑制基因Livin和Survivin在食管癌及癌旁组织中表达比较癌组织中凋亡抑制基因Livin和Survivin表达阳性率〔32例(64.00%)、35例(70.00%)〕高于癌旁组织〔4例(8.00%)，3例(6.00%)，χ2=34.03,43.46,均P<0.05〕。

2.2 凋亡抑制基因Livin和Survivin表达与患者临床疗效的关系有远处转移患者的凋亡抑制基因Livin和Survivin表达阳性率高于无远处转移患者，有复发患者的两基因表达阳性率高于无复发患者，≤5年生存患者的两基因表达阳性高于>5年的患者(P<0.05)。见表1。

2.3 患者凋亡抑制基因Livin和Survivin表达及两者联合评价疗效的价值凋亡抑制基因Livin和Survivin均表达阳性时，两者联合评价食管癌患者胸腔镜下根治术疗效敏感性、特异性及准确性均高于两基因单独评价(P<0.05)，见表2。

表1 凋亡抑制基因Livin和Survivin表达与患者临床疗效的关系〔n(%),n=50〕

表2 患者凋亡抑制基因Livin和Survivin表达及两者联合评价疗效的价值(%)

3 讨论

细胞凋亡紊乱会直接或间接促进肿瘤的发生发展，细胞凋亡受到抑制时会延长细胞存活时间，同时有助于突变的细胞生长，促进肿瘤形成。机体能稳定生存有赖于细胞内信号转导、抑制凋亡蛋白家族(IAPS)、Smac、细胞凋亡通路和 p53、C-myc、Bcl-2 家族等通路构成复杂的网络对凋亡进行精细地调控〔7〕。不断有学者依据此理论对肿瘤细胞特异性因子进行深入研究，最终发现凋亡抑制基因Livin和Survivin均是抑制凋亡蛋白家族成员之一。有研究显示〔8〕，两者在肿瘤组织呈高表达状态，参与肿瘤的恶性演进过程，能作为肿瘤的恶性程度的评价指标之一。

Livin有Livinα和 Livinβ两种mRNA亚型，能通过其BIR 区与 Caspase 结合而使Caspase 酶的活性受到抑制，而达到抑制细胞凋亡。有研究显示，其可能参与组织胚胎的生长发育，而在正常成人的大多数终末组织中呈低表达或不表达，但在恶性肿瘤中呈现高表达状态，能作为肿瘤治疗的重要靶点〔9，10〕。本研究证明了Livin在食管癌组织中是呈高表达其表达与食管癌手术后疗效及预后密切相关，参与了食管癌的恶性演进过程。

Survivin是IAP 家族成员之一也是目前研究热点，其抗细胞凋亡主要是通过直接阻滞 Caspase-3 和Caspase-7 而促进细胞异常增殖和恶性转化，同时对抗G2/M期凋亡的诱导，促进异常细胞进行有丝分裂异常增殖，进而促进肿瘤的形成〔11〕。有研究显示，其在恶性肿瘤组织中呈高表达，而在正常组织中呈关闭状态，其可在肿瘤的发生早期过程中被激活并参与肿瘤的发生发展，其表达与恶性肿瘤的侵袭和预后密切相关〔12，13〕。本研究证明Survivin在食管癌组织中呈高表达，另外提示其与食管癌的恶性进展及预后有关。最后结果显示，凋亡抑制基因Livin和Survivin均表达阳性时，联合两者对食管癌术后疗效评价的敏感性、特异性及准确性均高于单独使用其中任意一个，可能是两者联合能减少单独评价的漏诊率和误诊率，从而提高其评价的敏感性、特异性及准确性。

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