糖尿病肾病患者血清白细胞介素-17A、-23和-35的表达

王淑琼 姚勇利

(青海省人民医院内分泌二科，青海 西宁 810007)



糖尿病肾病患者血清白细胞介素-17A、-23和-35的表达

王淑琼 姚勇利

(青海省人民医院内分泌二科，青海 西宁 810007)

目的 观察糖尿病肾病(DN)患者的临床病理特点及血清中白细胞介素(IL)-17A、-23和-35的表达。方法 DN患者62例作为观察组，20例糖尿病无肾脏疾病的患者作为对照组，20例经体检证实为健康的成人血清标本20例作为正常对照组。检测3组血清中IL-17A、IL-23和IL-35的表达。结果 观察组均表现为典型的病变，其中病变早期5例，弥漫性糖尿病肾小球硬化症35例，结节性糖尿病肾小球硬化症22例。免疫荧光主要为免疫球蛋白(Ig)G沿肾小球毛细血管壁呈线状非特异性沉积。3组中IL-17A、IL-23和IL-35的表达差异显著(P<0.05)，观察组中IL-17A、IL-23和IL-35的表达与病变程度和临床分期密切相关。观察组IL-17A和IL-23呈正相关，IL-23和IL-35呈负相关。结论 DN患者病变形成时血清中IL-17A、IL-23和IL-35的表达异常，三者有一定的协同作用，应关注DN患者IL-17A、IL-23和IL-35的改变。

糖尿病肾病；白细胞介素-17A；白细胞介素-23；白细胞介素-35

糖尿病肾病(DN)是糖尿病微血管病变最常见、最严重的慢性并发症之一，病变表现为肾小球肥大、系膜增生，后期肾小球和肾小管纤维化明显〔1，2〕，病变形成涉及多种生物学作用，其病变机制不完全明确〔3〕。研究显示白细胞介素(ILs)家族中的相关成员与DN形成和进展有关〔4〕。本研究关注DN患者病理特征及血清中白细胞介素(IL)-17A、-23和-35表达。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2012年6月至2015年12月青海省人民医院内分泌二科DN患者62例，其中男30例，女32例，年龄45～85(平均62.0)岁。均经肾穿刺活检后的病理明确诊断。20例糖尿病无肾脏疾病的患者为对照组，其中男女各10例，年龄40～79(平均59.7)岁。20例经体检证实为健康的成人血清标本20例作为正常对照组，其中男9例，女11例，年龄36～67(平均54.3)岁。3组常规资料无明显差异(P>0.05)。

1.2 IL-17A、IL-23和IL-35表达检测 均常规抽取静脉血3 ml，2 000 r/min离心15 min后分离血清，置-20℃冰箱中冻存。样本于1个月内集中检测，均应用酶联免疫吸附(ELISA)法，严格按说明书操作，保证质控的合格。

1.3 统计学方法 采用SAS6.12统计软件进行方差分析、线性相关检验。

2 结 果

2.1 病理特点 早期病变表现为肾小球肥大，进展期出现弥漫系膜增生，晚期形成结节样病变或K-W结节，晚期出现弥漫性硬化。病变可见弥漫性系膜增生性病变、结节性病变、球囊滴、纤维蛋白帽。早期肾小管上皮细胞肥大，近端小管吸收糖类和蛋白质增多，空泡变性，肾小管基底膜弥漫均匀增厚，与肾小球基底膜增厚同时出现，晚期肾小管萎缩，基底分层，间质可见水肿、纤维化，淋巴细胞、单核细胞浸润，入球微动脉和出球微动脉透明变性，出现均质、红染的蛋白质在血管壁全层沉积，间质小动脉壁增厚、硬化。免疫荧光显示免疫球蛋白(Ig)G沿肾小球毛细血管壁呈线状非特异性沉积，在增宽的系膜、玻璃样变的小动脉、滴状病变、毛细血管袢的纤维素样变、帽状病变区可见IgM的非特异性沉积。见图1。

2.2 3组血清IL-17A、IL-23和IL-35表达的比较 3组血清中IL-17A、IL-23和IL-35的表达差异显著(P<0.05)。见表1。

2.3 观察组不同病变类型及临床分期血清中IL-17A、IL-23和IL-35表达 观察组不同病变类型及临床分期血清中IL-17A、IL-23和IL-35表达差异显著(P<0.05)。见表2，表3。

图1 IgG沿肾小球毛细血管壁呈线状非特异性沉积(免疫荧光，×200)

组别nIL-17A(pg/ml)IL-23(μg/ml)IL-35(pg/ml)观察组62372.79±68.8547.54±17.13122.63±36.43对照组20312.24±58.6421.80±7.90150.89±46.30正常对照组20261.70±46.8211.98±3.15162.59±40.33F/P值8.65/0.00979.76/0.00137.20/0.0109

表2 观察组不同病变类型血清中IL-17A、IL-23和IL-35表达

表3 观察组不同临床分期患者血清中IL-17A、IL-23和IL-35表达

2.4 观察组中IL-17A、IL-23和IL-35表达的相关性 IL-17A和IL-23呈正相关(r=0.49，P=0.045 1)，IL-23和IL-35呈负相关(r=-0.47，P=0.040 1)。

3 讨 论

目前认为1型糖尿病是一种由遗传和环境因素介导的以胰腺β细胞进行性破坏为特征的自身免疫性疾病，而2型糖尿病是以胰岛素抵抗和胰岛素相对不足为特征的非免疫性疾病〔5〕。DN是糖尿病病变中最严重的微血管并发症，也是引起肾小球硬化和终末期肾病的重要病因(约40%)。病变的早期表现有肾小球的高滤过状态，管状上皮细胞的增生肥大、微蛋白尿的形成等，之后肾小球基底膜增厚、系膜基质增多、大量蛋白尿形成，最终引起肾小球硬化〔6，7〕。本研究结果提示，IL-17A、IL-23和IL-35高表达与病变的形成和进展有直接关联。三者高表达是病变进展的重要促进因素。IL-17可以促进炎性相关因子的生成，引起趋化因子的大量分泌和释放〔8，9〕。也有学者认为IL-17可以直接刺激IL-6等促炎因子的产生，对炎性因子的内环境形成强大的调节作用〔10，11〕。而且IL-17作用可能受IL-23的调控〔12〕。IL-23能促使记忆CD4阳性的T细胞增殖，也有研究认为IL-23在活化的巨噬细胞中表达较高〔13，14〕，这可能与DN形成中间质的炎性反应强烈有关〔15〕。IL-35是近年来发现的ILs家族的新成员，主要由Treg分泌，不仅对炎性反应具有一定的抑制作用，还能对免疫反应起到一定的中心性调节作用。IL-35对炎症因子的抑制作用能使自身免疫反应减弱〔16，17〕。IL-35受到激活后，可以抑制CD4和CD8阳性的T细胞功能〔18，19〕。本研究提示IL-17A、IL-23和IL-35在DN患者血清中的表达有一定协同作用，这种协同作用与免疫反应有关，也与炎性因子形成过程中的瀑布效应有关〔20～22〕。

1 Kume S，Thomas MC，Koya D.Nutrient sensing，autophagy，and diabetic nephropathy〔J〕.Diabetes，2012；61(1)：23-9.

2 Meng L，Zhuo C，Hu G，etal.Therapeutic strategies of diabetic nephropathy：recent progress and future perspectives〔J〕.Drug Discovery Today，2014；20(3)：332-46.

3 Rivero A，Mora C，Muros M，etal.Pathogenic perspectives for the role of inflammation in diabetic nephropathy〔J〕.Clin Sci，2009；116(6)：479-92.

4 Collison LW，Workman CJ，Kuo TT，etal.The inhibitory cytokine IL-35 contributes to regulatory T-cell function〔J〕.Nature，2007；450(7169)：566-9.

5 汉吉洪.糖尿病肾病患者血清Hcy、MMP-9、IL-6及TNF-α的变化及意义〔J〕.中国实用医药，2012；7(16)：9-10.

6 毛春谱，李小毅，张红梅，等.银杏叶提取物对早期糖尿病肾病患者IL-6、TNF-a的影响〔J〕.重庆医科大学学报，2010；35(6)：842-4.

7 刘志红，李世军，陈朝红，等.糖尿病肾病患者足细胞病变的临床病理特征〔J〕.肾脏病与透析肾移植杂志，2003；12(2)：144-8.

8 Korn T，Bettelli E，Oukka M，etal.IL-17 and Th17 cells〔J〕.Ann Rev Immunol，2009；27(1)：485-517.

9 哈华兰，赵 静，黄新梅，等.2型糖尿病肾病患者IL-17浓度的改变及意义〔J〕.中国中西医结合肾病杂志，2016；17(1)：56-7.

10 沈红艳，邓演超，徐 湛，等.IL-17和IL-22水平与2型糖尿病肾病关系的研究〔J〕.中国实验诊断学，2014；18(12)：1999-2002.

11 沈红艳，邓演超，徐 湛，等.2型糖尿病肾病患者外周血IL-17和IL-22 mRNA水平〔J〕.现代检验医学杂志，2015；29(2)：30-2.

12 Zhou L，Ivanov II，Spolski R，etal.IL-6 programs T(H)-17 cell differentiation by promoting sequential engagement of the IL-21 and IL-23 pathways〔J〕.Nature Immunol，2007；8(9)：967-74.

13 Costa VS，Mattana TC，Da SM.Unregulated IL-23/IL-17 immune response in autoimmune diseases-diabetes research and clinical practice〔J〕.Diabe Res Clin Pract，2010；88(3)：222-6.

14 Murphy CA，Langrish CL，Chen Y，etal.Divergent pro-and antiinflammatory roles for IL-23 and IL-12 in joint autoimmune inflammation〔J〕.J Exp Med，2003；198(12)：1951-7.

15 Mensah-Brown EPK，Shahin A，Al-Shamsi M，etal.New members of the interleukin-12 family of cytokines：IL-23 and IL-27 modulate autoimmune diabetes〔J〕.Ann N Y Acad Sci，2006；1079(1)：157-60.

16 Niedbala W，Wei XQ，Cai B，etal.IL-35 is a novel cytokine with therapeutic effects against collagen-induced arthritis through the expansion of regulatory T cells and suppression of Th17 cells〔J〕.Eur J Immunol，2007；37(11)：3021-9.

17 Collison LW，Pillai MR，Chaturvedi V，etal.Regulatory T cell suppression is potentiated by target T cells in a cell contact，IL-35-and IL-10-dependent manner〔J〕.J Immunol，2009；182(10)：6121-8.

18 Li X，Mai J，Virtue A，etal.IL-35 is a novel responsive anti-inflammatory cytokine-a new system of categorizing anti-inflammatory cytokines〔J〕.PLoS One，2012；7(3)：65-5.

19 Liu F，Tong F，He Y，etal.Detectable expression of IL-35 in CD4+T cells from peripheral blood of chronic hepatitis B patients〔J〕.Clin Immunol，2011；139(139)：1-5.

20 Cheung PF，Wong CK，Lam CW.Molecular mechanisms of cytokine and chemokine release from eosinophils activated by IL-17A，IL-17F，and IL-23：implication for Th17 lymphocytes-mediated allergic inflammation〔J〕.J Immunol，2008；180(8)：5625-35.

21 施 敏，魏 珏，孟文颖，等.乙型肝炎肝硬化患者外周血IL-35和IL-17的表达及意义〔J〕.肝脏，2014；19(1)：15-9.

22 Yen D，Cheung J，Scheerens H，etal.IL-23 is essential for T cell-mediated colitis and promotes inflammation via IL-17 and IL-6〔J〕.J Clin Investig，2006；116(5)：1310-6.

〔2016-03-19修回〕

(编辑 苑云杰)

王淑琼(1979-)，女，硕士，主治医师，主要从事内分泌代谢病研究。

R692

A

1005-9202(2017)14-3476-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.14.042