乙肝检验假阳性与假阴性原因分析

黄建军，马双双

国防科技大学医院防检所(长沙，410000)

乙肝检验假阳性与假阴性原因分析

黄建军，马双双

国防科技大学医院防检所(长沙，410000)

目的 研究分析乙肝检验结果为假阳性与假阴性的原因。方法 运用MK-2酶标仪、 试剂盒、 酶联免疫吸附法、 胶体金测试卡对6000名体检人员进行乙肝检验。统计分析假阳性与假阴性的原因。结果 ①假阳性检测错误原因： 实验室操作(51.41)、 试剂(33.75%)、 检验方法(14.38%)等因素与其他原因(0.46%)差异显著(P<0.05)； ②假阴性检测错误原因： 实验室操作(53.57%)、 试剂(23.57%)、 检验方法(22.14%)等因素与其他原因(0.72%)差异有统计学意义(P<0.05)。结论 实验室操作、 试剂、 检验方法规范， 可保障乙肝检验结果的真实性。

乙肝检验； 假阳性； 假阴性

乙肝最为普遍的传染途径是血液传播、 血液制品传播[1]。该病在全球范围内引起了高度重视， 但近些年乙肝发病率没有任何下降的趋势， 临床的乙肝筛查工作也越来越重要。本次针对乙肝筛查过程中出现乙肝假阳性、 乙肝假阴性的原因进行分析， 希望能够促进临床乙肝检验的规范化发展。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2014年2月-2016年5月期间6 000名在我院检查乙肝的体检人员作为研究对象。男2 817名， 女3 183名； 年龄分布在22～76岁， 平均年龄(53.5 12.5)岁。所有体检人员的乙肝检验均由3位检验科的专业医生亲自操作。

1.2 方法

回顾性分析6 000名体检人员的体检记录， 统计其假阴性、 假阳性的出现次数， 经统计学处理进一步分析假阴性与假阳性的原因。乙肝检验方法如下： ①选择MK-2酶标仪作为检测仪器； ②试剂盒选择英科新创科技有限公司生产的乙型肝炎五项产品； ③检测方法为酶联免疫吸附法； ④选择英科新创科技有限公司生产的胶体金测试卡。检验标准如下： A≥0.210 0为阳性， 0.105 0≤A<0.210 0为疑似阳性， 假阴性率=假阴性率+阴性率， 假阳性率=假阳性率+阳性率。

1.3 统计方法

2 结果

6 000名体检人员中， 13%检查错误， 共780例。其中， 假阳性640例， 占82.05%； 假阴性140例， 占17.95%。假阳性病例中， 51.41%检查错误与实验室操作有关， 33.75%与试剂相关， 14.38%与检验方法具有紧密联系， 0.46%属于其他原因造成检查错误； 假阴性病例中， 53.57%检查错误与实验室操作有关， 23.57%与试剂相关， 22.14%与检验方法具有紧密联系， 0.72%属于其他原因造成检查错误。由此得知， 实验室操作、 试剂、 检查方法等因素与其他因素差异显著(P<0.05)， 具有统计学意义。详情见表1。

表1 乙肝检验假阳性与假阴性的原因分析 [n(%)]

3 讨论

对乙肝检查者的检验标本进行检验时， 许多因素可在不经意间参与乙肝的疾病发展， 严重影响了疾病转归[2]。通常， 临床将人体免疫应答作为乙肝的感染指标， 并从中观察乙肝病毒的相互作用。检验科医师辨识乙肝疾病时， 或因个人疏忽， 或因专业能力不强， 再或因试剂经验过少， 导致实验室操作、 检验方法、 试剂存在很大的问题， 对临床乙肝检验工作造成了影响， 因而出现了假阳性与假阴性。建议临床运用酶联免疫法对乙肝病毒或检验标本进行检验， 该检验法具有敏感性高、 操作简单的特点， 北京万泰、 上海科华的试剂能够批量操作， 敏感度与特异度均高达100%或95%以上[3]。

查阅检查错误的780名被检人员的临床资料、 体检记录， 发现： ①假阴性结果成因： 抗原体与酶化合物的浓度较低， 对其吸光功能的影响较为明显， 具有形成假阴性结果的良好条件； 抗原体与酶化合物的浓度较高， 吸光度会显著增加， 容易导致检验结果不能正常显示， 漏诊率高[4]。②假阳性结果成因： 运用酶联免疫法经验时， 试剂、 检验方式、 血清分离操作水平对检验结果的影响较为明显， 血液样本检验或离心处理的不规范可提高假阳性率。无论是临床失误造成的误诊， 还是吸光度增加导致的漏诊， 临床都应予以重视， 将乙肝检查工作规范化， 提高乙肝检验结果的准确性， 以便及时地为患者制定有效的治疗方案。

在本次研究中， 780例乙肝假阳性或假阴性分析结果与文献[5]中的研究结果基本一致， 均认为乙肝检验结果受到了实验室操作、 检验方法与试剂的制约。

针对假阴性、 假阳性问题， 应采取以下措施： ①使用样品前先将试剂盒温度与室温保持一致； ②溶血标本存在“不可检验”的情况时， 重新抽血制作标本， 并予以检验； ③完成抽血后， 将样品在温水中放置2 h使其凝块收缩， 对其加大离心时间， 以3 000 r/min的速度离心， 从而将红细胞、 纤维蛋白完全沉淀； ④将标本放置10 h,然后对其进行检测， 确保血凝块的收缩情况良好， 从而让标本非特异性活性物质全部或部分失活， 并降低非特异性反应。总之， 提高样本检验的规范性， 能够有效解决假阴性、 假阳性问题。

综上所述， 实验室操作、 检验方法试剂等因素对乙肝检验结果存在很多的影响， 既会形成乙肝假阴性， 又会形成乙肝假阳性， 临床需要将样本检验的规范性提高， 才能增加乙肝检验结果的可靠性。

[1] 严红平.乙肝检验的假阴性与假阳性结果原因研究[J].医药前沿,2014,02(35):78-79.

[2] 韩霞.乙型肝炎检验的假阴性与假阳性结果原因分析[J].中国保健营养(下旬刊),2013,23(7):4112-4113.

[3] 庄岳鹏,庄惠萍,吴双,等.影响乙肝表面抗原检测结果的因素及对策[J].标记免疫分析与临床,2012,19(6):380-382.

[4] 刘娟,康金贤,刘运东,等.应用酶联免疫吸附法检测乙肝核心抗体设定灰区在结果判读中的意义[J].广东医学,2011,32(6):695-697.

[5] 谭旭明.乙型肝炎检验的假阴性与假阳性结果原因分析[J].检验医学与临床,2012,09(48):1105-1106.

Causes Analysis of False Positive and False Negative on Hepatitis B

HUANG Jianjun, MA Shuangshuang

Inspection Office, Hospital of National University of Defense Technology (Changsha, 410000)

Objective To study the causes of false positive and false negative detection results on hepatitis B. Methods Hepatitis B test was carried out on 6 000 physical examination people by the methods of MK-2 ELISA kit, ELISA kit and colloidal gold test card. Then, the reasons of the false positives and false negatives were statistically analyzed. Results The causes for false positive detection included laboratory operation (51.41), reagents (33.75%), test methods (14.38%) and other factors (0.46%) (P<0.05) while the causes of the false negative detection included laboratory operation (53.57%), reagents (23.57%), test methods (22.14%) and other reasons (0.72%) (P<0.05). Conclusion Specification of laboratory operation, reagents and test methods can ensure the authenticity of hepatitis B test results.

hepatitis B test, false positive, false negative

10.3969/j.issn.1674-1242.2017.02.017

黄建军，E-mail:chenbiaoqiang@126.com

R446.6

A

1674-1242(2017)02-0108-02

2016-11-9)