PRRSV灭活疫苗与弱毒疫苗的免疫效果比较

刘清源

(广东省惠州市惠城区马安畜牧兽医与渔业站，广东 惠州 516001）

PRRSV灭活疫苗与弱毒疫苗的免疫效果比较

刘清源

(广东省惠州市惠城区马安畜牧兽医与渔业站，广东 惠州 516001）

为比较猪蓝耳病灭活疫苗与弱毒疫苗的免疫效果，本试验在惠城区某猪场随机选取100头仔猪，分成两组，分别免疫猪蓝耳病灭活疫苗与弱毒疫苗，采用ELISA方法检测血清中的抗体水平，并对两组抗体的S/P值进行比较。结果表明，猪蓝耳病弱毒疫苗产生的抗体水平比灭活疫苗高，灭活疫苗免疫效果较差，且抗体持续时间短。本研究为猪场蓝耳病的防控及免疫程序的制定提供理论依据。

PRRSV；灭活疫苗：弱毒疫苗；比较

猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起的一种高致病性传染病[1]。由于PRRSV具有免疫抑制的特点，病猪对其他疾病的抵抗能力也会降低，增加混合感染的风险，给养猪业造成巨大的经济损失。该病无特效治疗药物，对猪群进行疫苗免疫和抗体水平监测是防止PRRSV感染的重要手段[2]。我国的PRRSV商品化疫苗以灭活疫苗和弱毒疫苗为主[3]。为比较两种疫苗免疫效果，探讨2种疫苗的选用及免疫程序的制定，本试验分别使用上述两种疫苗对惠城区某猪场的100头猪进行分组免疫，于免疫14 d、28 d、42 d、56 d、70 d后采集血清样品，采用ELISA试剂盒进行抗体检测，并对两种疫苗的免疫效果进行比较和分析，为猪场疫苗的选择及免疫时间的确定提供参考。

1 材料和方法

1.1 仪器及试剂

酶标仪ELX800，购自BIOTEK公司；PRRSV抗体试剂盒，购自武汉科前生物公司。

1.2 疫苗

PRRSV灭活疫苗（NVDC-JAXI株）和弱毒疫苗（JAXI-R株）均为国家招标疫苗。

1.3 动物分组及免疫情况

将某猪场100头猪猪分为A、B两组，每组50头，A组接种灭活疫苗，2 mL/头；B组接种弱毒疫苗，1头份/头，均在颈部肌肉注射，首免后48 d进行二免。

1.4 血清的制备

分别于免疫前、免疫后1 4d 、28 d、42 d、56 d、70 d后从猪前腔静脉采血，6 000 r/min离心15 min，取上清于4℃保存备用。

1.5 抗体检测方法

待检血清采用E L ISA方法检测PRRSV抗体，具体操作步骤参照试剂盒说明书进行。

1.6 结果判定

通过计算样品孔与阳性孔 OD630nm比值 S/P 值来判定被检血清PRRSV抗体的结果。判定标准：S/P 值＞0．42，判定被检血清蓝耳病病毒抗体阳性；S/ P值＜0．42，则判定被检血清蓝耳病抗体阴性。

2 结果与分析

2.1 PRRSV抗体检测阳性率比较

免疫后，A、B两组抗体阳性率有所升高，A组抗体阳性数随时间延长不断增加，二免28 d后，阳性率达到94%；B组在免疫后42 d，抗体阳性率达到100%，二免后抗体水平趋于稳定。B组阳性率在首免后不同时间段内抗体阳性率均高于A组，对猪群的保护作用较A组理想（见表1）。

2.2 PRRSV疫苗诱导抗体的检测结果

从两种疫苗接种后PRRS V抗体S/P值来看（见图1），弱毒疫苗激发机体产生的抗体滴度要明显高于灭活疫苗，B组在首免后抗体水平不断升高，二免后抗体增幅较大，二免28 d后抗体水平达到最高值；A组在免疫后抗体滴度开始升高，首免后28～42 d抗体S/P值出现下降的现象，加强免疫后，PRRSV抗体滴度继续升高，B组接种疫苗28 d内，二免抗体水平高于首免。

3 讨论

本研究表明，PRRSV弱毒疫苗接种后能快速激发机体产生抗体，从表1中可以看出，接种弱毒疫苗28 d后，B组试验猪群的平均抗体滴度超过国家规定的“抗体合格率超过70%”的标准。而A组结果显示，PRRSV灭活疫苗在二免前猪群抗体合格率仅为64%，需要进行补免才能使抗体合格率达到国家的基本要求。图1结果显示，B组在接种弱毒疫苗28 d后，PRRSV抗体检测结果呈阳性。随后，S/P值继续升高，表明体内的抗体滴度在免疫后不断增强，抗体水平稳定，能够有效保护猪群不受该病的感染。而A组在接种灭活疫苗后28 d，仍有部分猪的抗体S/P值低于0．42，表1 中A组在免疫后42 d相比2周前抗体阳性率较高，但是在28～42 d内，S/P值还出现下降的趋势，说明首免28 d后抗原蛋白在机体内激发抗体产生的能力已开始减弱，因此，即使抗体阳性率符合规定标准，仍需对抗体S/P值进行定期监测，不能忽视因为体内抗原降解而导致的猪群在出栏前抗体水平下降。二免后抗体水平虽然有所上升，首免70 d后，还存在个别猪出现抗体阴性的现象。在整个免疫过程中，灭活疫苗诱导的抗体始终低于弱毒疫苗，弱毒疫苗在接种1头份/头即可产生良好的效果，无需进行二次免疫。而灭活疫苗要达到国家规定的抗体合格率，则需进行加强免疫，时间设置在首免30日左右最为适宜。

表1 PRRSV灭活疫苗与弱毒疫苗免疫组的抗体阳性率 %

图1 接种疫苗后PRRSV抗体S/P值变化情况

PRRSV灭活疫苗安全性较高，易于运输和保存，使用方便，因此为众多养殖户所青睐[4]。灭活疫苗可能在加工过程中造成一些重要的抗原表位丧失[5]，仅能诱导机体产生体液免疫，导致首免效果不理想，需要二次免疫才能产生对猪群的有效保护。而弱毒疫苗具有快速诱导抗体产生，抗体有效时间长等优点，近年来也备受用户关注，这可能是因为弱毒疫苗接种后，机体内部免疫与自然感染病毒类似，能同时诱导体液反应和细胞免疫反应[6]，使得抗体的产生速度更快，持续时间更长。但是PRRSV弱毒疫苗使用过程中存在安全性方面的问题，活的毒株可能在猪体内发生弱毒返强的现象。猪场在疫苗选择的问题上，应该根据具体实际情况而定，在周边PRRSV感染威胁较小的情况下，应尽可能选用灭活疫苗，增加免疫次数，进行定期抗体水平监测，以期达到净化PRRSV的目的[7]。而在PRRSV流行地区，或猪场已经暴发该病，则应选用弱毒疫苗，但需注意的是，断奶仔猪不宜接种弱毒疫苗，因为部分弱毒疫苗可能由于减毒效果不理想，使抵抗力较低的仔猪出现“疫苗毒”感染[8]。另外，PRRSV弱毒疫苗的毒株在机体内容易与其他毒株发生重组，产生病毒变异株，因而猪场在选用弱毒疫苗时，应尽量避免不同毒株的疫苗混用。

[1] 李祥健， 刘有昌， 赵东升． 猪蓝耳病[J]． 畜禽业， 2009 (3)： 64-66．

[2] 刘生杰， 刘成文． 猪蓝耳病及继发感染试验诊断与综合防治研究[J]． 中国农学通报， 2007， 23(9)： 40-43．

[3] 邱立新， 郑杰． 高致病性猪蓝耳病的临床诊断与防治[J]． 中国畜牧兽医，2008， 35(1)： 114-115．

[4] 曹斌， 王海燕， 周广生， 等． 不同类型猪蓝耳病疫苗的体液免疫效果比较[J]． 中国动物检疫， 2010， 27(8)： 51-52．

[5] VANHEE M， DELPUTTE P L，DELRUE I， et al． Development of an experimental inactivated PRRSV vaccine that induces virusneutralizing antibodies[J]． Veterinary research， 2009， 40(6)： 1-15．

[6] 王小三， 张春杰， 赵星灿． 猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗的应用现状及研究进展[J]． 河南农业科学， 2012， 41(3)：12-15， 25．

[7] 戴火林， 华威， 毕淑珍． 猪蓝耳病灭活苗与弱毒苗免疫效价试验[J]． 中国畜禽种业， 2014 (11)： 87-88．

[8] 吴锦艳， 田宏， 尚佑军， 等． 高致病性猪蓝耳病病毒 GS/LZh/07 株的分离， 鉴定及其非结构蛋白 Nsp2 基因特性分析[J]． 畜牧兽医学报， 2009，40(3)： 438-443．

2017-02-16）

刘清源（1990-），男，广东惠州人，硕士研究生，从事临床兽医方面研究