细胞室的布局、管理与日常维护探析

李晶晶++刘磊++潘艳++邓林红

摘要：指出了细胞室是生物医学工程领域科研产出的重要平台，如何建立、管理和维护好细胞室一直是研究的重要问题。从常州大学生物医学工程与健康科学研究院细胞培养室的建设、运行的实际经验出发，探讨了细胞室的建设布局、人才培养及管理制度、日常监管及维护等问题。以促进相关领域科研水平的提升及实现可持续发展。

关键词：细胞室；管理；维护

中图分类号：R318

文献标识码：A 文章编号：16749944（2017）10023202

1 引言

细胞培养技术是指将活体的一小部分组织用机械或消化的方法分散成单个细胞悬液，然后进行培养、繁殖的技术[1]。现代生物技术的发展几乎都离不开细胞培养技术，尤其是在生物医学工程领域的发展，细胞培养技术更具有特殊的作用。许多重要的生物产品如疫苗、单克隆抗体、生长因子等都是通过细胞得来的，因此细胞培养技术的价值不言而喻。如今，细胞培养技术已然成为生命科学领域必备的基本实验技术之一[2，3]。

细胞室是进行细胞培养、细胞相关研究活动的重要场所，由于细胞培养要求无菌操作，因此细胞室的建设布局、维护管理也就有别于一般的实验室。笔者根据常州大学生物医学工程与健康科学研究院（医工院）中细胞室的建设经验，探讨细胞室的布局、管理与维护的方法。

2 细胞室的布局

细胞培养的区域划分一般涉及以下几方面：无菌操作，细胞培养用液配制，细胞孵育，储存，清洗、包装和灭菌。其中无菌操作，细胞培养用液配制、细胞孵育和储存区域对环境的要求严格，清洗、包装和灭菌区只需正常实验室环境即可。因此，细胞培养区域的布局可以按照操作类型和洁净要求进行划分。医工院实验室将细胞培养相关区域做如下规划：清洗、包装和灭菌工作在准备间中进行；细胞培养用液配制，储存，无菌操作及细胞孵育区在细胞室进行；准备间与细胞室相邻，以便进行物品传递。

准备间无特殊要求，划分清洗、包装和灭菌三个区域即可；细胞室要求较高，一般都装有高效空气过滤装置及专业恒温恒湿空调系统以保证室内环境清洁，细胞室顶部装有紫外灯以便进行日常无菌维护，墙面也多为易于消毒灭菌的彩钢板[4]。

医工院细胞室的区域布局如下：①日常服装存放区，用于存放外套、鞋、包等日常物品；②洁净室鞋服存放区，用于更换细胞室专用洁净服、洁净鞋及佩戴口罩等，该区域顶部装有紫外灯，以便对日常维护洁净物品；③风淋区，对洁净服外进行再次清洁，风淋区地面设有粘尘地垫，以保证除尘效果；④洁净走廊，洁净走廊内设有传递窗，以便递送灭菌物品等，另外洁净走廊可通向培养室；⑤培养室，细胞培养操作的区域，室内设有废液缸和消毒桶等。

3 细胞室的管理

细胞室建成以后，应从人才培养、制度建设、日常监管三方面加强细胞室的管理。

3.1 人才培养

细胞是一种特殊的生命，很多因素都能导致其发生微妙的变化，其中人员复杂同时缺乏系统技术培训是引起细胞室经常性污染的主要原因之一，一旦细胞室发生污染，那么就会造成科研工作的严重滞后，因此，要注重细胞室实验人员及学生的技能培训。

医工院通过引进、培训等手段建设一支具有专业素养的细胞室技术人员队伍，然后由细胞室技术人员对进入细胞室的人员进行统一培训和考核，考核合格后方能进入细胞室工作，尽可能的减少人为因素造成的细胞培养室污染，平时医工院内部细胞室技术人员举办讨论交流活动，也参加相关讲座、培训班及外出参观学习等活动，不断提高细胞室技术人员的技术水平。

3.2 制度建设

3.2.1 细胞室日常管理制度

医工院细胞室的日常管理制度涵盖了安全、卫生、公共事务等几方面内容。安全方面包括用电安全、用水安全、用火安全及用气安全；卫生方面包括个人卫生、实验室值日安排、消毒灭菌安排等内容；公共事务方面包括洗涤、包装、灭菌、配置消毒液、配置或分装细胞用液等内容。

3.2.2 细胞培养室人员准入制度

细胞培养室采取刷卡进入制度，非细胞培养室管理技术人员在进入细胞培养室前必须进行一段时间严格的安全与技术培训，经考核合格后方能开放临时卡进入细胞培养室开展工作，开展工作后有三个月实习期，实习期内无安全事故、无污染事故、认真履行职责、服从安排者可开卡长期出入细胞培养室，若实习期未达标则不允许进入细胞培养室或重新进行培训。

3.2.3 细胞培养室设备管理制度

细胞培养室内的设备一般包括超净台、细胞培养箱、离心机、液氮罐、倒置显微镜、冰箱、钢瓶等设备，这些设备应具备操作流程及注意事项，由专人维护，医工院细胞室设备采用预约制度保证日常工作有序开展。

3.2.4 细胞培养室意外事故应急预案

任何实验室都应该准备实验室意外事故应急预案，细胞室也不例外，但由于细胞室本身结构的特殊性导致其事故应急预案更具有针对性。

细胞培养室容易发生二氧化碳泄露，酒精灯起火或爆炸，培养箱长期不断电运转造成的起火等风险，因此，要建立专门的应急预案应对消防安全事故的发生。

对于细胞培养室来说，生物安全也是必须引起重视的。对于细胞的原代培养实验来说，经常接触到动物组织、尸体等生物废弃物，如操作处理不当，易引起生物安全事故。这不仅要求我们实验过程中严格遵守操作规程，做好实验防护工作，还要根据实际情况建立生物安全应急预案，以便应对突发生物安全事故。

另外，在细胞培养过程中容易出现细胞污染的情况，细胞污染大致可以分为细菌污染、真菌污染、根据细胞污染的类型建立细胞培养室污染应急预案有利于降低细胞培养室损失。

3.3 日常监管

细胞培养室的日常监管主要包括学生的操作技术，细胞培养试剂耗材，细胞培养室环境监控等内容。医工院检查学生的操作技术是通过随机抽查某个学生的细胞培养实验的方式来进行，以便及时纠正学生在细胞培养过程中不正确操作；细胞培养用的试剂耗材按价值分为不同的管理类型，由不同的人员负责，保证实验的顺利进行及避免浪费；细胞培养室内的环境监控主要是检查细胞培养室内空气的洁净程度及氧气浓度，因此细胞培养室内要定期采用沉降法测定菌落数量及配备氧浓度检测器。

4 细胞培养室的维护

细胞培养室的维护分为细胞培养室环境维护和细胞的维护。细胞培养室的环境维护分为“硬件”维护和“软件”维护两类，“硬件”维护主要是指定期检查、更换细胞培养室高效过滤系统、超净台过滤器、紫外灯管等设备配件；“软件”维护主要是指细胞培养室的值日安排、大扫除安排等。细胞的维护就是要规范细胞的储存，做好细胞的名称、数量、位置、储存日期、储存者等相关信息的记录存档工作，长期储存的细胞应取出复苏，以便检查细胞状态，定期检查液氮罐、超低温冰箱等细胞存储设备，确保设备能够正常运行。

5 结语

作为生物医学工程领域科研成果产出的重要场所，细胞培养室的重要性不言而喻，建立科学合理的实验室布局，提升细胞培养室管理、技术人员的技术水平，建立完善的细胞培养室管理制度，做好细胞室的日常维护，可以促进相关领域科研水平的提升及实现可持续发展。

参考文献：

[1]司徒镇强， 吴军正. 细胞培养 [M]. 2版. 西安：世界图书出版西安有限公司， 2007.

[2]孟祥玉， 谷铁军， 赵兴红， 等. 国家工程实验室中细胞培养室的建设与管理[J]. 中国现代教育装备， 2014， 17（4）： 29～31.

[3]陈功星， 王世贵， 俞 诚，等. 普通细胞培养室的建设与管理[J]. 實验室研究与探索， 2011， 30（11）： 151～154.

[4]姜 丹， 孟令军， 邵 妍，等. 细胞培养室管理的研究与探索[J].中国现代教育装备，2016， 245（13）：20～21.