多穗金粟兰提取物的抑菌活性测定

李黎星

【摘 要】以研究多穗金粟兰提取物的不同萃取相对大肠杆菌等6种细菌的抗菌作用为目的，将多穗金粟兰提取分离，每种萃取相进行抑菌实验。结果表明，多穗金粟兰提取物中抑菌活性最强的为乙酸乙酯相，且对大肠杆菌最为敏感。

【关键词】多穗金粟兰；提取物；抑菌活性

多穗金粟兰（Chloranthus multistachys Pei）也称四块瓦（陕西）、白毛七等，属于金粟兰科金粟兰属植物。该属植物为民间传统草药，以根、根茎或全草入药，具有舒经活络，祛风散寒，消腫止痛等功效[1]。近年来，从金粟兰属植物中分离到的化合物主要为萜类，其余还有香豆素类、木脂素类、甾体类等，现代药理学研究还表明，其具有抑菌、抗肿瘤、抗病毒等作用[2-3]。本文为开发利用天然、高效、低毒的抑菌药物提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

多穗金粟兰采自陕西省宁陕县，自然阴干；大肠杆菌，蜡状芽孢杆菌，巨大芽孢杆菌，金黄色葡萄球菌，白色葡萄球菌，表皮葡萄球菌均购于陕西省微生物研究所。

1.2 方法

1.2.1 多穗金粟兰的提取与分离

取干燥的多穗金粟兰全草500g，粉碎，用甲醇回流提取3小时，抽滤，收集甲醇滤液，旋转蒸发，除去溶剂，然后浓缩液在干燥箱40～50℃条件下烘干，得甲醇提取物浸膏。将此浸膏用过MCI柱脱去色素，进而得到多穗金粟兰的甲醇提取物，然后依次用乙酸乙酯和正丁醇进行多次萃取，分别得到乙酸乙酯层、正丁醇层和水层，每个萃取层浓缩除去溶剂，浓缩液于干燥箱40～50℃烘干，即获得多穗金粟兰的乙酸乙酯相部分、正丁醇相部分及水相部分，置于冰箱4℃保存备用。

1.2.2 样品液的制备

分别取上述多穗金粟兰提取物的三种萃取相，配制成浓度为100 mg/ml的样品液，过滤除菌备用。

1.2.3 培养基及菌悬液的配置

牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化钠5g，琼脂 15～20g，水1000ml，充分溶解，pH于7.0～7.2，高压灭菌，备用。

将6种供试菌分别在斜面培养基上活化后，无菌条件下，挑取活化好的菌种于生理盐水中，调节菌悬液浓度为106 CFU/ml（实验用）。

1.2.4 抑菌活性测定

用牛津杯法测定各种提取物的抑菌活性。无菌操作台中将培养基倒入平皿，每个平皿约15～20mL，待凝固。吸取0.1mL配好的菌悬液加入凝固的平板，将其涂布均匀，每个平板放3个牛津杯，每个牛津杯加入50μL的样品溶液，另设阳性对照和空白对照。平板在4℃放置2h，然后在37℃恒温箱内培养18～24h。测定抑菌圈直径，每组实验重复三次。

2 实验结果与分析

多穗金粟兰提取物的三种萃取相分别对6种细菌的抑菌活性见表1。结果显示，多穗金粟兰提取物对供试菌种有不同程度的抑制作用，抑菌活性最强的为乙酸乙酯相，其次是正丁醇相，水相无抑菌圈。乙酸乙酯相抑菌效果最好，表明多穗金粟兰抑菌的有效成分多存在于此相中，有实验证明这部分富含倍半萜二聚体类成分[4]。多穗金粟兰提取物乙酸乙酯相对表皮葡萄球菌和蜡状芽孢杆菌的抑制效果较明显，且以大肠杆菌最为敏感。

表1 多穗金粟兰提取物不同萃取相的抑菌活性

抑菌圈直径单位：mm； -代表无抑菌圈

3 结论

在社会飞速发展的今天，人类受到更多疾病的威胁，开发抗菌活性强且稳定，安全无毒，无毒副作用等已成为研究热点，所以，具有抗菌活性的天然药物便备受关注。人们对金粟兰科中的植物草珊瑚一直有所研究和临床应用，而多穗金粟兰却只作为民间中草药使用，其开发和利用便受到限制。本实验证明多穗金粟兰具有良好的抑菌作用，虽作用不及阳性对照，但它们是天然的抑菌药物，其的价值有待我们进一步研究，从中开发出更多的有效成分。

【参考文献】

[1]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志，第20卷，第1分册[M].北京：科学出版社，1982：79-80.

[2]曹聪梅，彭勇，肖培根.金粟兰属植物的化学成分和药理作用研究进展[J].中国中药杂志，2008，33（13）：1509-1515.

[3]邹雍，刘传珍.金粟兰属药用植物研究进展[J].江西中医学院学报，2009，21（3）：98-100.

[4]冉新辉.多穗金粟兰的化学成分研究[D].广州中医药大学，2010：3-60.

[责任编辑：朱丽娜]