气相色谱法测定白花菜子中油酸的含量

赵磊，于丹，赵宾

（1．四平市食品药品检验所，吉林 四平 136000；2．长春长生生物科技有限责任公司，吉林 长春 130000）

气相色谱法测定白花菜子中油酸的含量

赵磊1，于丹2，赵宾1

（1．四平市食品药品检验所，吉林 四平 136000；2．长春长生生物科技有限责任公司，吉林 长春 130000）

目的：建立气相色谱法测定白花菜子中油酸的含量。方法：采用毛细管色谱柱；载气：氮气；氢火焰离子化检测器；流速2.0 mL/min；进样口温度：280℃；柱温箱温度：250℃；检测器温度：280℃；载气流速：2.0 mL/min。结果：油酸在0.0981～0.981 mg/mL内与峰面积具有良好的线性关系；加样回收率均符合要求。结论：该方法简便快捷，准确、重现性好，灵敏度高，可用于白花菜子的含量检测。

白花菜子；油酸；气相色谱；含量测定

白花菜子为白花菜科植物白花菜（Cleome gynandra L.）的种子，具有祛风散寒、活血止痛的功效。常用于治疗风湿痹痛、跌打损伤、痔疮漏管等。其全草为一年生草本植物，生于低海拨田野、路边、荒地，分布广泛，资源丰富，嫩茎叶可供食用[1-3]。目前，尚无控制其含量测定的报道。在《中药大辞典》（上册）[7]1028页白花菜子中，含有油酸成分，因此采用气相色谱法测定其主要成分油酸，具有稳定可控的效果。

1 仪器与试药

1.1 仪器

安捷伦7890B气相色谱仪，氢火焰离子化测器；气相色谱柱为WondaCAP5 30 m×320 μm×0.25μm；BT125D型万分之一电子分析天平（上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂）。

1.2 试剂与试药

油酸对照品（中国食品药品检定研究院，批号：111621-200301）；白花菜子（河北安国药材市场，经鉴定为白花菜成熟的种子）；石油醚溶液60～90℃（天津康科德科技有限公司，批号：160118）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：WondaCAP5 30 m×320 μm×0.25 μm；载气：氮气；进样口温度：280℃；柱温箱温度：250℃；检测器温度：280℃；载气流速：2.0 mL/min；隔垫吹扫量：3 mL/min，尾吹：35 mL/min，仪器设定分流比：20∶1进样量：1 μL；检测器：氢火焰离子化检测器[4]。

2.2 溶液的制备

2.2.1 油酸对照品的制备 精密称取9.78 mg的油酸对照品，置10 mL容量瓶中，加入石油醚（60～90℃）溶液，稀释至刻度，配置成浓度为0.978 mg/mL的对照品溶液，备用。

2.2.2 供试品溶液的制备 精密称取白花菜子0.2504 g，置锥形瓶中，精密加入石油醚（60～90℃）溶液50 mL，称定质量，84℃加热回流30 min，放冷，补足减失的质量，摇匀，滤过，既得[5]。

2.3 色谱图

分别精密吸石油醚（60～90℃）溶剂、油酸对照品溶液、供试品溶液1 μL，注入气相色谱仪分析，见图1。

图1 气相色谱图

2.4 重复性试验

取供试品6份，按照“2.2.2”项下的配制方法制备溶液，并依照上述色谱条件测定，结果油酸的相对标准偏差（RSD）为1.81%。表明方法重复性良好[5]。

2.5 精密度试验

精密吸取油酸对照品溶液1 μL，连续进样6次，测定其峰面积，RSD分别为0.86%（n＝6）。结果表明仪器精密度良好。

2.6 线性关系

将油酸对照品置于10 mL容量瓶中，精密称取9.81 mg，稀释至刻度采用石油醚（60～90℃）溶解，混匀。精密吸取溶液0.1，3，5，7，10 mL置10 mL容量瓶中，加石油醚（60～90℃）稀释至刻度，混匀。注入气相色谱仪，按照“2.1”色谱条件对样品进行测定，以横坐标（X）为浓度，纵坐标（Y）为峰面积，峰面积（Y）对浓度（X）作为线性回归方程，

Y＝15.347X，r＝0.9991，

线性范围为0.0981～0.981 mg/mL。结果表明，呈现出良好线性关系[6]。

2.7 稳定性试验

取同一供试品溶液，按照“2.1”色谱条件分别作3，6，9，12，24 h的色谱图，测定其稳定性，油酸的峰面积RSD为0.86%，由实验数据说明样品溶液在24 h内基本稳定，该方法稳定性良好。

2.8 加样回收率试验

精密称取已知含量的供试品6份，分别依次精密加入用石油醚（60～90℃）配置成浓度1.01 mg/mL的油酸对照品5 mL，按供试品气相色谱方法及色谱条件制备，计算其加标回收率。结果表明，6份油酸的总回收率为96.91%，RSD值为1.29%，平均回收率为95.78%，RSD值为1.67%，该方法准确率高，见表1。

表1 加样回收率试验结果

2.9 样品含量测定

按“2.1”色谱条件测定市售三批供试品溶液，样品中百分含量值测定结果见表2。

表2 三批样品含量测定结果 （%）

3 讨论

3.1 供试品溶液的制备采用石油醚回流提取，应采用补足减失质量法，因为回流中会有溶剂损失。

3.2 进样口温度：280℃；柱温箱温度：250℃；检测器温度：280℃，效果较好。

3.3 曾采用槲皮素作为对照品，采用液相色谱进行定量测定，结果未检出槲皮素。见文献报道[7]油酸在白花菜子中含量较高，因此采用气相色谱法，作为测定油酸的定量依据。

[1]冯文.白花菜子药材质量评价标准的探讨[J].中国药物评价,2014,31(4):196-198.

[2]耿红梅,王艳,高焕君,等.白花菜子化学成分的初步研究[J].时珍国医国药,2011,22(3):560-561.

[3]耿红梅,苗庆峰,吕海燕.等.白花菜子挥发油抗炎镇痛作用的实验研究[J].时珍国医国药,2012,23(1):58-59.

[4]伍乃英,叶崇义,董小平.气相色谱法测定辛香止痛散中薄荷脑和冰片含量[J].中国药科大学学报,1996,27(3):167-171.

[5]赵磊,邓莹,李岩,等.GC法同时测定利胆排石片中厚朴酚及和厚朴酚含量[J].解放军药学学报,2014,3(3):237-238.

[6]王天亮,诸葛俊.气相色谱法同时测定活络酊中樟脑、薄荷脑的含量[J].中成药,2010,32(9):1644-1646.

[7]南京中医药大学编委会.中药大辞典(上册)[S].上海:上海科学技术出版社,2006:1028.

本文编辑：张钰

Determination of Oleinic Acid Content in Cleome gynandra Seeds by Gas Chromatography

Zhao Lei1, Yu Dan2, Zhao Bin1

(1. Siping Institute for Food and Drug Control, Jilin Siping 136000, China; 2.Changchun Changsheng Biotechnology Limited Liability Company, Jilin Changchun 130000, China)

Objective：To develop a gas chromatography (GC) method for determination of oleic acid content in Cleome gynandra seeds. Methods：Capillary column was adopted serving nitrogen as carrier gas. Hydrogen flame ionization detector was used. The flow rate was 2 mL/min, while the inlet temperature was 280℃, the column temperature was 250℃, the detector temperature was 280℃, and the flow rate of carrier gas was 2.0 mL/min. Results：The oleic acid at a concentration of 0.098 1～0.981 µg/mL showed good linear relationship to the peak area. The recovery rate of samples met the relevant requirements. Conclusion：The developed method is simple, rapid, accurate, reproducible and sensitive, which may be used for determination of oleic acid content in Cleome gynandra seeds.

Cleome gynandra Seed; Oleic Acid; Gas Chromatography (GC); Content Determination

TS227；O657.7＋1

A

10.3969/j.issn.2096-3327.2017.04.008

2017-02-08

赵磊，男，硕士，副主任药师。研究方向：色谱与光谱。通讯作者E-mail：zhaolei0433@sina.com