提取时间对青花菜气相指纹图谱的影响

王冬群

(慈溪市农业监测中心，浙江 慈溪 315300)

提取时间对青花菜气相指纹图谱的影响

王冬群

(慈溪市农业监测中心，浙江 慈溪 315300)

研究了溶剂乙腈不同提取时间对青花菜气相色谱图谱的影响，以期确定最佳提取时间。同一颗青花菜用乙腈分别提取0.5、1、4和24 h，提取液利用气相色谱法配火焰光度检测器(FPD)和毛细管柱(DB-1701)进行检测，得到青花菜气相色谱指纹图谱。利用相关指标对青花菜指纹图谱差异和特征进行了分析。结果发现，随着提取时间的延长，所有峰的峰面积都呈现逐渐增大的趋势，6号峰最为明显，而各个峰峰面积之比保持相对稳定。进行青花菜气相色谱指纹图谱研究时，建议把提取时间控制在一定范围。

提取时间； 青花菜； 气相色谱； 指纹图谱

青花菜营养丰富，在中国部分地区已成为出口创汇的蔬菜种类之一[1]，在慈溪市也有大面积种植。青花菜因富含硫磷等元素，在气相色谱上常会出现一些面积大小不一的色谱峰，目前，色谱峰出现的特点或规律研究较少。在日常检测工作中发现，不同品种的青花菜气相色谱图谱有所不同[2]，但只有对相同方法、相同条件下得到的气相色谱图谱进行比较才有意义，因此，建立稳定的气相色谱指纹图谱提取方法对进一步深入研究指纹图谱非常重要。

本文研究了青花菜前处理过程中溶剂乙腈提取时间长短对青花菜气相色谱图谱的影响，以确定最佳的提取时间，为建立可靠的青花菜气相色谱指纹图谱提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

2015年3月23日，在慈溪市坎墩玉兰蔬菜农场随机抽取品种名为喜鹊的青花菜为样本。该青花菜当时正处生产晚期，花冠颜色微微泛黄，处于正要开花，而未开花的状态。

Agilent公司6890N气相色谱仪，配7683自动进样器，采用火焰光度检测器(FPD)，选取DB-1701色谱柱。丙酮为色谱纯，乙腈为AR级。

1.2 气相色谱条件与分析方法

DB-1701色谱柱，载气为高纯氮气，流量30 mL·min-1；氢气流量为75 mL·min-1，空气流量110 mL·min-1；柱前压9.95 psi，恒流方式，尾吹氮气；进样口温度220 ℃，检测器温度25 ℃；采用不分流进样方式，进样量1 μL，进样0.85 min后吹扫。柱温程序：初始温度100 ℃，以40 ℃·min-1升温至200 ℃，再以2 ℃·min-1升温至210 ℃，然后以30 ℃·min-1升温至240 ℃并保留4 min，至样品全部流出。采用保留时间定性，峰面积定量。变异系数RSD来判定数据稳定性[2]。

1.3 提取与净化

分别称取25.0 g样品置于125 mL的试剂瓶中，加入50.0 mL乙腈，用匀浆机高速匀浆2 min，分别提取0.5、1、4、24 h，充分振荡1 min，摇匀，然后分别倒入100 mL离心管中；离心管以4 000g离心5 min，吸取上层乙腈10 mL到10 mL带塞玻璃刻度试管中，用水浴80 ℃的氮吹仪吹至近干，用丙酮定容至5.0 mL。

2 结果与分析

2.1 青花菜的气相色谱图

青花菜样品按1.3节方法进行处理，分别静止提取0.5、1、4和24 h，各做1个重复试验(24 h的没有做重复)。提取液经气相色谱仪(6890N)配火焰光度检测器(FPD)和DB-1701毛细管柱分离得到相应的色谱图。图1中A、B、C、D分别是静止提取0.5、1、4和24 h得到的图谱。从图中可以直观地看到，不同提取时间得到的图谱差异较大，随着提取时间的延长，陆续出现了一些小峰，部分峰峰高增高较快。为便于考察，对在图谱上出现的主要峰分别编号，编为峰1、峰2、峰3、峰4、峰5、峰6，详见图1。从图中可见这6个峰在不同提取时间都有相对稳定的保留时间。

A为提取0.5 h；B为提取1 h；C为提取4 h；D为提取24 h图1 青花菜气相色谱图谱

2.2 不同提取时间主要特征峰峰面积的变化特点

选择主要的6个峰作为研究对象。对4个不同时间提取的1～5号峰峰面积进行了统计分析。各峰峰面积详见表1。从表1可见，随着提取时间的延长，1～5号峰峰面积均有逐渐增加的趋势。有图1可知，峰6变化最为明显，提取0.5 h时，峰6的峰高、峰面积与其他峰相比都差异不大，但随着提取时间的延长，峰6峰高逐渐变高，峰面积逐渐增大。

2.3 不同提取时间主要特征峰峰面积之间的比值

通过对不同提取时间峰1～峰5的面积比例关系进行计算，得到表2。随着提取时间的延长，各个峰峰面积之间的比例变化不明显。各对峰峰面积比值平均为0.07～4.58；RSD为7.44%～36.20%；峰2/峰1为1.47～1.83；峰3/峰1为3.47～5.67；峰4/峰1为0.67～1.07；峰5/峰1为0.19～0.42；峰3/峰2为2.37～3.49；峰4/峰2为0.37～0.67；峰5/峰2为0.13～0.26；峰4/峰3为0.13～0.28；峰5/峰3为0.05～0.09；峰5/峰4为0.19～0.56。可见，随着溶剂乙腈提取时间的延长，这5个峰的峰面积之比相对保持稳定，始终在一定范围内。

表1 不同提取时间喜鹊青花菜气相色谱图谱的峰面积

提取时间/h峰面积/(pA×s)丙酮峰1峰2峰3峰4峰505292377442360737236206222307148163879051772385102868293582892483825082157291186846551527979599288831388350174591128162656656710353402818943819541770854290030850650136354032698090813222536642926738551411253520296719838256161414241849418346981478550349970711973303797

表2 气相色谱图谱主要峰之间峰面积比例关系的变化

提取时间/h峰2/峰1峰3/峰1峰4/峰1峰5/峰1峰3/峰2峰4/峰2峰5/峰2峰4/峰3峰5/峰3峰5/峰40516746606903728004202201500805305163567075042349046026013008056117852407003229504001801300604511834980670312720370170140060464160384107026240067017028007025414734709801923706701302800501924177419085036237048021020009043平均值168458082032273050019019007041RSD%744172019232387149625112205362016593383

3 讨论

利用乙腈提取青花菜时，提取时间对青花菜气相指纹图谱中峰的保留时间没有影响，但是对峰的数量和面积有影响。随着提取时间的延长，峰数量增多，峰面积增大。因此，在进行青花菜气相指纹图谱研究时，一定要控制溶剂提取时间，尽量减少提取时间对指纹图谱的影响。从不同提取时间主要特征峰峰面积之间的比例可知，随着提取时间的增加，各个峰峰面积之比相对保持稳定，始终在一定范围内。

[1] 陆信娟, 杨峰, 樊继德. 青花菜主要农艺性状的相关分析[J]. 江西农业学报, 2011, 23(1): 49-51.

[2] 王冬群. 3个品种青花菜气相色谱分析[J]. 浙江农业科学, 2016, 57(4): 500-503.

(责任编辑：侯春晓)

2017-03-04

王冬群(1976—)，男，浙江宁波人，高级工程师，硕士，主要从事农产品质量安全监测工作，E-mail：wdq1213@sohu.com。

10.16178/j.issn.0528-9017.20170542

S685.99

A

0528-9017(2017)05-0855-03

文献著录格式：王冬群. 提取时间对青花菜气相指纹图谱的影响[J].浙江农业科学，2017，58(5)：855-857.