浅谈犬库布病毒及检测方法

侯 巍 阳爱国 郭 莉 莫 西

（四川省动物疫病预防控制中心，四川成都 610041）

浅谈犬库布病毒及检测方法

侯 巍 阳爱国 郭 莉 莫 西

（四川省动物疫病预防控制中心，四川成都 610041）

犬库布病毒（Canine Kobuviruses，CaKoV）属于小RN A病毒科（Picornaviridae）A型爱知病毒（Aichivirus A）属。研究表明犬库布病毒（Canine Kobuviruses）与犬病毒性腹泻存在一定相关，2011年该病毒第一次在美国从患急性胃肠炎的犬中检测出[1]，而后中国[2]、非洲[3]、意大利[4]、英国[5]等国家相继被发现。

库布病毒；检测

1 犬库布病毒的简史

1.1 犬库布病毒的发现及其分类

库布病毒属于小RNA病毒科中新增加的属。2011年，从美国患有急性胃肠炎的犬中检测出第一株犬库布病毒。根据基因序列分析，其距离AiV基因A和B型，因此研究人员对这些病毒命名为犬科库布病毒（CaKoV）[1]。研究证明[2]- [7]，库布病毒通过被污染的食物或水粪-口途径感染，并且它们在人和动物[8][9]的胃肠炎中具有潜在的致病作用[10]。

根据基因序列分析显示，CaKoV在遗传上接近小鼠库布病毒M-5（在氨基酸水平同源性84.0%）[4]与 AiV（在氨基酸水平同源性达80.0%）[11]。根据国际病毒分类学委员会（ICTV）制定的标准（小RNA病毒科内，如果在P1、P2和P3区域氨基酸具有40%、40%和50%同源性，就可以归为一属），因此CaKoV可以被认为是来自鼠科布病毒（MuKoV 1型）和人类AiV（AiV1型）的不同基因型（CaKoV 1型），同属爱知A型[12]。

1.2 犬库布病毒的流行

犬库布病毒的国内外流行情况见表1

表1 犬库布病毒流行情况表

2 犬库布病毒基因结构

犬库布病毒是一种极小的球形病毒，直径约为 30nm，二十面体、无囊膜的单股正链 RNA 病毒。与所有的微RNA 病毒一样，CaKoV成员具有相似的基因组结构：包括 5- UTR、一个大的开放阅读框（open reading frame，ORF）、3-UTR以及Poly（A）tail。ORF编码的蛋白依次为L（非结构蛋白）、VP0、VP3和VP1（结构蛋白）、2A-2B-2C（非结构蛋白）和3A-3B-3C-3D（非结构蛋白）。

根据Genbank载录的全基因序列分析中国株CH-1，韩国株12D049，英国株UK003， 美国株US-PC0082。中国CH-1株长度为8216bp，韩国12D049株长度为8292bp，英国UK003株的长度为8213bp。

3 病毒的鉴定

3.1 病毒的培养

病毒分离培养是鉴定病原行之有效的方法，AiV可以在Vero或BS-C-1细胞上增殖并能观察到明显的细胞病变[13]。

3.2 病毒的检测

3.2.1 免疫学检测方法

2016年日本学者通过酶联免疫吸附的方法在犬的粪便中成功检测到AiV[14]。此外，报道称，有研究学者在198只狗血清样品和97只猫血清样品中检测到爱知病毒IgG抗体的，分别为74只（37.4%）的67只（69.9%），检测到的抗体最高滴度为1：2000。

3.2.2 分子生物技术

由于PCR 方法具有敏感、快速、特异及可重复性的优点，因此对于CaKoV的检测大都采用了RT-PCR 的方法。由于CaKoV的致病性及其机制尚不清楚，临床诊断也无法进行，基因检测可能是在未来很长时间内的主要检测方法见表2。

表2 检测犬库布病毒方法

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