脑梗死血浆正五聚蛋白3的动态改变及与颈动脉不稳定斑块的关系

李巧思毕国荣张晓天黄瑞

·论 著·

脑梗死血浆正五聚蛋白3的动态改变及与颈动脉不稳定斑块的关系

李巧思*毕国荣*张晓天*黄瑞*

目的 研究急性缺血性脑卒中与血浆正五聚蛋白3（pentraxin 3,PTX3）水平的关系，并探索血浆PTX3水平与颈动脉粥样硬化的关系。方法 纳入急性缺血性脑卒中患者共103例，对照组患者83例。应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测所有患者入院时的血浆PTX3水平，以及急性缺血性脑卒中患者规律治疗第7天的血浆PTX3水平。对急性缺血性脑卒中患者进行颈部多普勒血管超声检查，根据颈动脉斑块稳定性将患者分为两组。研究血浆PTX3水平与急性缺血性脑卒中及颈部斑块稳定性之间的关系。结果 ①急性缺血性脑卒中组的血浆PTX3水平明显高于对照组（P＜0.05），经规律治疗7 d后，恢复期的血浆PTX3水平明显低于急性期（P＜0.05），但仍高于对照组（P＜0.05）。经多因素Logistic回归后提示血浆PTX3水平与急性缺血性脑卒中密切相关（OR=15.043，95%CI：3.46～65.45，P＜0.001）。②急性缺血性脑卒中组中，不稳定斑块组急性期和恢复期的血浆PTX3水平均高于无斑块与稳定斑块组（P＜0.05）。结论 急性缺血性脑卒中患者具有较高的血浆PTX3水平，伴有颈动脉不稳定斑块的急性缺血性脑卒中患者血浆PTX3水平更高。血浆PTX3水平与急性缺血性脑卒中密切相关。

正五聚蛋白3 脑卒中 颈动脉粥样硬化

脑卒中是高致死率、高致残率的疾病[1]。出于这个原因，对疾病严重程度的评估和早期对危险因素的评估显得至关重要[2]。动脉粥样硬化是缺血性脑卒中的主要病因[3]，而炎症在动脉粥样硬化的发生发展过程中起到重要作用。已经提出一些炎性因子，如正五聚蛋白3（pentraxin 3，PTX3）、脂肪酶、高敏C反应蛋白（high-sensitivity c-reactive protein，hs-CRP），可以作为脑卒中预测的指标之一[4]。很多研究人员发现PTX3作为一种炎症因子，在动脉粥样硬化和心血管病中起到重要作用，并不断探索其中的发病机制。高水平的PTX3与心血管疾病的发病率增加和死亡率增加都有关[5-9]。近几年已经有一些基础实验表明，PTX3在脑缺血后起到重要的作用[10-13]。然而，PTX3与缺血性脑卒中之间的临床研究甚少，本文旨在明确急性缺血性脑卒中和颈动脉粥样硬化与血浆正五聚蛋白3水平的关系。

1 对象及方法

1.1 研究对象 收集2015年12月至2016年5月于中国医科大学附属盛京医院神经内科住院的急性缺血性脑卒中的患者作为病例组，选择同期入院的非脑梗死患者作为对照组。病例组的纳入标准：病例均符合中国急性缺血性脑卒中诊治指南2014[14]；②均在症状发生后3 d内完善头部磁共振序列平扫、弥散加权成像，及颈动脉多普勒超声；③年龄均大于18岁且小于90岁，且发病后在急性期与恢复期两次静脉采取血样。病例组的排除标准如下：①既往有过的脑卒中病史；②发病7天内有出血性转化；③冠心病（心绞痛、心肌梗死）病史；心衰；严重的肝肾功能不全；严重感染及慢性炎症性疾病；肿瘤；结缔组织病等自身免疫性疾病；④近期使用过炎症抑制药物；⑤近期外伤手术史。对照组的纳入标准：①既往无症状性脑梗死，本次入院无新发急性脑梗死；②年龄均大于18岁且小于90岁，入院后次日内接受静脉采取血样。对照组的排除标准：①冠心病（心绞痛、心肌梗死）病史；心衰；严重的肝肾功能不全；严重感染及慢性炎症性疾病；肿瘤；结缔组织病等自身免疫性疾病；②近期使用过炎症抑制药物；③近期外伤手术史。最终，病例组纳入103例，男性72例，女性31例，平均年龄（63.8±12.1）岁；对照组纳入83例，男性28例，女性55例，平均年龄（64.2±11.1）岁。本实验已取得盛京医院伦理委员会同意并签署知情同意书。

1.2 研究方法

1.2.1 一般资料收集 全面收集患者各项临床资料、各项实验室指标及辅助检查。一般资料包括：年龄、性别、高血压病史、糖尿病病史、吸烟史。实验室指标包括：低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、甘油三脂、总胆固醇、空腹血糖、白细胞计数、血小板计数、纤维蛋白原、同型半胱氨酸及尿酸等；辅助检查包括：头磁共振成像及弥散成像、颈动脉多普勒超声。实验室指标均在入院次日清晨空腹收集，影像学于入院后72 h内完成。

1.2.2 标本收集及PTX3水平检测 每例患者均在入院后第2天清晨，及急性缺血性脑卒中患者规律治疗第7天的清晨，空腹平卧位采静脉血3 mL，置于EDTA抗凝管中混匀，以3000 r/min离心15 min，取上层清液后储存于-80℃冰箱保存待测。采用武汉优尔生公司试剂，以免疫吸附法（ELISA）检测，所有操作步骤均按照说明书进行。

1.2.3 颈动脉超声检查 入院后72 h内，使用彩色多普勒超声仪对患者进行检查。报告分为无斑块、弱回声斑块、强回声斑块及混合回声斑块，将强回声斑块归为稳定斑块，弱回声及混合回声斑块归为不稳定斑块。

1.2.4 统计学方法 统计学处理采用SPSS21.0软件，正态分布的计量资料以（±s）表示，两两比较采用独立样本t检验；非正态分布的计量资料以中位数（四分位间距）表示，采用秩和检验。计数资料以阳性例数、构成比表示，采用χ2检验。多因素分析采用Logistic回归分析，以比值比（OR）值及95%置信区间（95%CI）估计各因素的危险度，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 病例组与对照组分析 本实验中，病例组与对照组相比，病例组中低密度脂蛋白（low-density lipoprotein,LDL）、高密度脂蛋白（high-density lipoprotein,HDL）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、白细胞计数（white blood count,WBC）、空腹血糖（fasting plasma glucose,FPG）、同型半胱氨酸、急性期血浆PTX3水平、恢复期血浆PTX3水平、男性比例、高血压比例及吸烟比例均高于对照组（P＜0.05），上述结果具有统计学意义。而两组中年龄、纤维蛋白原（plasma fibrinogen,FIB）、尿酸、甘油三酯（triglyceride,TG）、血小板计数及糖尿病比例的差异无统计学意义（P＞0.05）（表1）。病例组患者恢复期的血浆PTX3水平（9.78±2.63 ng/mL）明显低于急性期（12.74±3.15 ng/mL）（P＜0.001），但病例组患者恢复期的血浆PTX3水平（9.78± 2.63 ng/mL）仍高于对照组（6.68±1.25 ng/mL）（P＜0.001）。以急性缺血性脑卒中发生为因变量，急性期血浆PTX3水平为自变量，调整可能存在的混杂因素，经多因素Logistic回归显示，急性期血浆PTX3水平与急性缺血性脑卒中发生的密切相关（P＜0.001）（表2）。

2.2 颈部超声结果与血浆PTX3水平的关系 根据颈动脉超声多普勒检查结果，将病例组患者分为两组：无斑块患者23例（22.3%）与稳定斑块患者17例（16.5%）合并为一组，以及不稳定斑块组63例（61.2%）。无斑块患者与稳定斑块患者急性期血浆 PTX3水平 [（11.01±2.90 ng/mL） vs. （11.32±2.28 ng/mL）]和恢复期血浆PTX3水平[（8.56±2.60 ng/mL）vs.（9.04±1.92 ng/mL）]都无统计学意义（P＞0.1），但无斑块患者与稳定斑块患者急性期和恢复期的血浆PTX3水平都显著低于不稳定斑块患者（P＜0.05）（表3）。

3 讨论

在很多国家，缺血性脑卒中是导致死亡的主要病因之一，在发病的第1年内，死亡率为21%~ 27%，而15%~30%的人会留下明显的残疾[1]。脑缺血可引起神经细胞坏死及氧自由基产生，触发一系列缺血所致的炎性级联反应，促进炎性细胞因子、趋化因子及粘附因子等释放。很多研究都表明炎症在缺血性脑卒中的发生发展中起到重要的作用[15]。PTX3是与炎症反应相关的炎性指标之一，它与hs-CRP同属于Pentraxin家族。hs-CRP主要由促炎因子白细胞介素-6（IL-6）刺激肝细胞产生[16]，而PTX3由促炎因子如白细胞介素-1（IL-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、氧化的低密度脂蛋白及某些细菌成分[16-17]，刺激巨噬细胞、内皮细胞及血管平滑肌细胞等产生，所以PTX3的释放可以看作成对于血管损伤后一个特殊的反应，暗示着PTX3与其他炎性分子（如hs-CRP）相比，可能在动脉粥样硬化的发生发展过程中会提供一些更明确的信息[5]。PTX3作为一种急性期的炎症标记物，能迅速反应局部组织的炎症及损伤程度[18]。

表1 病例组与对照组一般资料比较

表2 急性缺血性脑卒中危险因素的Logistic多元回归分析

表3 病例组颈部超声结果与血浆PTX3水平的关系

在一项临床研究中，SEZER等[19]将急性缺血性脑卒中患者与对照组患者的血浆PTX3水平作比较，他们发现急性缺血性脑卒中患者的血浆PTX3水平明显高于对照组，且与脑卒中的严重程度相关。评估PTX3水平与缺血性脑卒中患者预后的关系时，RYU等[20]发现脑卒中患者的PTX3水平增高，且在死亡患者中更高，PTX3水平可以作为急性缺血性脑卒中患者长期预后的独立危险因素。本研究中发现急性缺血性脑卒中患者的血浆PTX3水平明显高于对照组，且具有统计学意义，与既往研究结果一致。且本实验中还得出，经规律治疗7 d后，病例组恢复期的血浆PTX3水平明显低于急性期水平，但明显高于对照组，且均具有统计学意义。其具体机制仍然不明，可能为急性期炎症反应较重，经规律治疗后，斑块趋于稳定或炎症较急性期有所减轻，血浆PTX3水平下降。血浆PTX3是否有助于区别脑卒中患者与非脑卒中患者，还需大量临床试验进行探索。

炎症反应参与动脉粥样硬化整个发生发展过程，炎症因子PTX3在动物模型和人的动脉粥样硬化斑块中均呈高表达[21-22]。INOUE等[9]的实验中发现PTX3浓度可以反映斑块的不稳定性。刘华等[23]在动物模型中发现动脉粥样硬化斑块中PTX3 mRNA和蛋白的表达量更高，说明PTX3是参与动脉粥样硬化发生和发展的重要炎症因子之一。本实验中发现，急性缺血性脑卒中患者颈动脉无斑块组与稳定斑块组的血浆PTX3水平相比较后未见明显差异，但二者水平显著低于不稳定斑块组。将无斑块组和稳定斑块组合并为一组后，无论急性期还是恢复期的血浆PTX3水平都明显高于不稳定斑块组，其结果具有统计学意义。PTX3可能影响动脉粥样硬化，与斑块的稳定性相关，具体的机制还需要更多实验来研究。

本实验也有一定的局限性：首先，由于两次采血，我们不能获得所有缺血性脑卒中患者的血液样本，及各种临床及生化信息的缺乏，不能纳入所有患者，导致选择性偏倚；此外，本实验样本量较少，组与组之间病例个数分布不均匀，且性别构成比存在差异；最后，本实验未能监测hs-CRP水平变化，无法与PTX3水平相比较，也未能收集其他炎症标记物的水平，如IL-1、TNF-α。

本实验提示急性缺血性脑卒中患者血浆PTX3水平较高，且伴有颈动脉不稳定斑块者具有更高的血浆PTX3水平。血浆PTX3水平与急性缺血性脑卒中密切相关。急性缺血性脑卒中急性期炎症反应较明显，治疗炎症反应，可能成为改善动脉粥样硬化的一个新兴目标。PTX3作为一个新型炎症标记物，有助于对急性缺血性脑卒中患者进行分层。仍需要大量的临床试验及基础试验进一步研究，PTX3在急性缺血性脑卒中起到的作用，从而指导治疗，改善预后。

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The dynamic change of plasma Pentraxin 3 levels in Acute Ischemic Stroke and its association with theCarotid Artery Atherosclerosis unstable plaques.

LI Qiaosi,BI Guorong,ZHANG Xiaotian,HUANG Rui.Department of Neurology,Sheng Jing Hospital Affiliated to China Medical University,Shenyang 110000,China.Tel:024-96615.

Objective The aim of this study was to examine the association between plasma Pentraxin 3(PTX3) levels with acute ischemic stroke and carotid artery atherosclerosis.Methods We enrolled 103 patients with acute ischemic stroke(AIS)and 83 control subjects.The levels of plasma PTX3 were measured by using Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)at admission and after 7 days treatment in the AIS group.The carotid artery plaques in the AIS group were detected by using Color Doppler Ultrasound.Patients with AIS were divided into two groups according to the stability of carotid artery atherosclerosis plaques.The association between plasma PTX3 levels with acute ischemic stroke and the stability of carotid artery atherosclerosis plaques was examined.Results① The plasma PTX3 levels were significantly higher in the AIS group than in the control group(P＜0.05).After 7 days standard treatment,the plasma PTX3 levels in AIS group were significantly decreased(P＜0.05),but still higher than those in control group(P＜0.05).Multivariable logistic regression suggested that the plasma PTX3 levels had a close relationship with AIS (OR=15.043,95%CI:3.46～65.45,P＜0.001).② In the AIS group,the plasma PTX3 levels before and after treatment were significantly higher in unstable plaque group than in no plaque and stable plaque group(P<0.05).Conclusion The plasma PTX3 levels are higher in patients with acute ischemic stroke.The plasma PTX3 levels are signif-icantly higher in AIS group with unstable plaque.The plasma PTX3 levels are closely associated with acute ischemic stroke.

Pentraxin 3 Stroke Carotid artery atherosclerosis

R743.3

A

2016-08-18）

（责任编辑：李立）

10.3969/j.issn.1002-0152.2017.03.001

* 中国医科大学附属盛京医院(沈阳110000)

通信作者（E-mail:bigr@sj-hospital.org）