高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定琥乙红霉素片中琥乙红霉素含量的方法

王书学

高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定琥乙红霉素片中琥乙红霉素含量的方法

王书学

目的探究高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定琥乙红霉素片中琥乙红霉素含量的应用效果。方法采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法对琥乙红霉素片中琥乙红霉素含量进行测量, 对该种方法的应用效果进行分析。结果在所设定的色谱条件下进行检测, 记录下峰面积。结果发现琥乙红霉素的面积的相对标准偏差为0.93%(n=6), 表明试验中设备仪器的精密度较好。精确获取适量的供试品溶液, 在室温下放置。按照设定的色谱条件在24 h内不同时间点测定, 对峰面积进行记录。结果发现琥乙红霉素的面积的相对标准偏差1.07%(n=6), 表明试品溶液稳定性较好。准确称取供试品溶液多份, 在设定的色谱条件下测定, 对峰面积进行记录。结果发现琥乙红霉素的面积的相对标准偏差0.88%(n=6), 平均含量为98.65%。表明重复性较好。结论采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法对琥乙红霉素片中琥乙红霉素含量进行测定其精确度、稳定性以及灵敏度均较好。

高效液相色谱法；蒸发光散射检测器法；琥乙红霉素

琥乙红霉素是一种抗菌效果较好的大环内脂类药物, 该药物被普遍的应用于临床抗菌治疗中。琥乙红霉素片的药效在很大的程度上取决于琥乙红霉素的含量, 因此准确的测量其含量能够对该药物的临床应用效果进行评定。过去在对琥乙红霉素片中琥乙红霉素的含量进行测定方时通常采用微生物检定法, 该种方法不仅操作较为复杂, 而且容易受到各种因素的影响而导致测量结果精确度较小。在对琥乙红霉素片中琥乙红霉素含量进行测定时需要选用较为高效且精准度较高的检测方法, 以便获得更为准确的检测数据。也有报道中指出选用高效液相色谱法对其含量进行测定, 但是在检测时往往均是采用紫外检测器［1］。由于紫外检测器在进行测量时仅仅是在紫外末端才能够吸收琥乙红霉素, 因此造成检测结果难以提高。在本文的研究中就在蒸发光散射检测器下采用高效液相色谱法对其含量进行检测, 取得了较好的效果。现报告如下。

1 仪器与药品

研究中所选用的仪器为HPLC仪由e2695泵、蒸发光散射检测器以及色谱工作站组成；GHB-4000型数控超声波清洗器(上海工洲阀门有限公司, 功率300 W, 频率：25 kW)；超精准电子天平［捷久计量衡器(上海)有限公司］。所使用的药品为琥乙红霉素片(西安利君制药股份有限公司, 国药准字H61022359, 规格：0.125 g×24片)。除乙腈为色谱纯外,其他均为分析纯。而在研究中所使用的水为超纯水。

2 方法与结果

2. 1 在本次研究中所选用的色谱条件具体见表1。

表1 色谱条件

2. 2 溶液的制备

2. 2. 1 对照品溶液 将精准测量的琥乙红霉素对照品放入到量瓶中, 向量瓶中加入适量的乙腈进行定容。最终所获取的溶液要保证每ml溶液中含有1.216 mg的琥乙红霉素, 将该溶液静置以备使用。将上述所获取的溶液精确量取4 ml,将其置入到10 ml的量瓶中［2］。再次加入乙腈进行定容处理,最终所获取的溶液要保证每1毫升溶液中含有0.486 mg的琥乙红霉素, 该溶液作为对照品溶液。

2. 2. 2 供试品溶液 将琥乙红霉素片精确称取, 将其研磨均匀后放入到100 ml量瓶中。在量瓶中加入乙腈溶液进行使其充分溶解, 对其进行超声溶解。静置冷却后再次加入乙腈进行定容, 将其摇匀滤过后取其滤液［3］。

2. 2. 3 阴性对照溶液 按照供试品的配置方法选用不含琥乙红霉素的辅料制备阴性对照溶液［4］。

在上述色谱条件下对对照品溶液、供试品溶液以及阴性对照溶液进行检测, 检测结果见图1。

图1 检测结果

2. 3 精密度试验在所设定的色谱条件下进行检测, 记录下峰面积。结果发现琥乙红霉素的面积的相对标准偏差为0.93%(n=6), 表明试验中设备仪器的精密度较好。

2. 4 稳定性试验精确获取适量的供试品溶液, 在室温下放置。按照设定的色谱条件在24 h内不同时间点测定, 对峰面积进行记录。结果发现琥乙红霉素的面积的相对标准偏差1.07%(n=6), 表明试品溶液稳定性较好。

2. 5 重复性试验准确称取供试品溶液多份, 在设定的色谱条件下测定, 对峰面积进行记录。结果发现琥乙红霉素的面积的相对标准偏差0.88%(n=6), 平均含量为98.65%。表明重复性较好。

3 讨论

目前对琥乙红霉素含量的测定有多种方法, 比如紫外分光光度法、微生物检测法、电化学法等。以上检测方法虽然在实际检测中应用较为广泛, 但是检测的灵敏度较低且操作较为复杂［5］。及时探究出高效、简单、精确度更高的检测方法至关重要, 有报道曾指出高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定琥乙红霉素片中琥乙红霉素含量［6］。在进行试验的过程中开始先使用流动相对对照组好样品进行溶解, 但是试验发现采用该种方法稳定性不理想［7］。通过对相关文献资料的研究和以往经验发现在进行溶解时选用乙腈作为溶解剂,其稳定性相对较好［8］。在本文的研究中就采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定琥乙红霉素片中琥乙红霉素含量,研究发现采用该种方法精密度、稳定性以及重复试验的相对标准偏差均＜2.0%。

综上所述, 采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法对琥乙红霉素片中琥乙红霉素含量进行测定方法简单, 精确度、稳定性、以及灵敏度均较好, 值得推广使用。

［1］ 李志得, 张彩云, 汪霞. HPLC-ELSD法测定琥乙红霉素片中琥乙红霉素的含量. 中国药房, 2016, 27(33):4744-4746.

［2］ 肖莹, 彭凤, 杨洪芹, 等. 近红外光谱法在琥乙红霉素片定量分析中的应用. 化学研究与应用, 2016, 28(7):954-959.

［3］ 王晓玲, 张萍, 王欢. 琥乙红霉素与二甲酚橙荷移反应及其测定. 广州化工, 2016, 44(7):125-127, 133.

［4］ 陈曦, 刘艳杰. 琥乙红霉素片含量的微生物检定与HPLC法分析比较. 北方药学, 2016, 13(3):14-15.

［5］ 刘雅琴, 赵晓頔, 王伟娜, 等. 琥乙红霉素片含量测定方法的改进. 中国药师, 2012, 15(4):510-511.

［6］ 陈燕, 刘虹, 赵海鹏. 高效液相色谱法测定琥乙红霉素片的含量. 中国药品标准, 2015, 16(2):130-132.

［7］ 罗慧萍, 易秋艳, 王灿, 等. HPLC法测定琥乙红霉素中游离红霉素的含量. 药物分析杂志, 2014, 34(12):2264-2268.

［8］ 王晓玲, 张萍, 陈燕. 甲基红褪色光度法测定琥乙红霉素. 应用化工, 2014, 43(9):1712-1714.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.08.100

2017-03-14］

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